AMD3100 (Plerixafor)

Plerixafor (AMD3100) inibisce la chemiotassi mediata da CXCL12 con una potenza leggermente migliore della sua affinità per CXCR4. [1]

Antagonizza anche il legame del ligando SDF-1/CXCL12 con un IC50 di 651 nM. Questo composto inibisce il legame GTP mediato da SDF-1, il flusso di calcio mediato da SDF-1 e la chemiotassi stimolata da SDF-1 con IC50 di 27 nM, 572 nM e 51 nM, rispettivamente. Non inibisce il flusso di calcio contro le cellule che esprimono CXCR3, CCR1, CCR2b, CCR4, CCR5 o CCR7 quando stimolate con i loro ligandi cognati, né inibisce il legame del recettore di LTB4. Da solo, non induce un flusso di calcio nelle cellule CCRF-CEM, che esprimono molteplici GPCRs inclusi CXCR4, CCR4 e CCR7. [2]

In topi diabetici, una singola applicazione topica di Plerixafor (AMD3100) promuove la guarigione delle ferite aumentando la produzione di citochine, mobilitando le cellule EPC del midollo osseo e migliorando l'attività dei fibroblasti e dei monociti/macrofagi, aumentando così sia l'angiogenesi che la vasculogenesi. [3]

A coorti di topi vengono somministrati PBS, IGF1, PDGF, SCF o VEGF per cinque giorni consecutivi e questo composto il 5° giorno. Il numero e la dimensione delle colonie sono più alti nei topi iniettati con IGF1 più questo composto rispetto ai gruppi trattati con PDGF, SCF e VEGF, in combinazione con Plerixafor. [4]

• Saggi di legame recettoriale

  Per gli studi di legame competitivo contro CXCR4, Plerixafor (AMD3100) viene incubato in un intervallo di concentrazioni per 3 ore a 4 °C in tampone di legame (PBS contenente 5 mM MgCl₂, 1 mM CaCl₂, 0,25% BSA, pH 7,4) con 5 × 10⁵ cellule CCRF-CEM e 100 pM di ¹²⁵I-SDF-1α (2200 Ci/mmol) in piastre filtranti Milipore Durapore^TM. Il ¹²⁵I-SDF-1α non legato viene rimosso lavando con 50 mM HEPES freddo, 0,5 M NaCl pH 7,4. Il saggio di legame competitivo contro BLT1 viene eseguito su membrane da cellule CHO-S che esprimono BLT1 ricombinante. Le membrane vengono preparate mediante lisi cellulare meccanica seguita da centrifugazione ad alta velocità, risospese in tampone 50 mM HEPES, 5 mM MgCl₂ e congelate rapidamente. Questo composto viene incubato con la preparazione di membrana per 1 ora a temperatura ambiente in una miscela di saggio contenente 50 mM Tris, pH 7,4, 10 mM MgCl₂, 10 mM CaCl₂, 4 nM LTB₄ miscelato con 1 nM ³H-LTB₄ (195,0 Ci/mmol) e 8 μg di membrana. Il ³H-LTB₄ non legato viene separato per filtrazione su piastre filtranti Millipore Tipo GF-C.

• Modelli animali

  Twelve-week-old C57BL/6 mice with segmental bone defect

• Dosaggi

  5 mg/kg

• Somministrazione

  Administered via i.p.