In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO
40%PEG300
5%Tween80
50%ddH2O
Convalidato dai laboratori Selleck. Se sono necessarie modifiche a questa formulazione, contattare il nostro team di vendita per test personalizzati.
0.75mg/ml
(1.69mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 15 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution
5% DMSO
95% Corn oil
Convalidato dai laboratori Selleck. Se sono necessarie modifiche a questa formulazione, contattare il nostro team di vendita per test personalizzati.
0.75mg/ml
(1.69mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 15 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile. * Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto. * Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)
Preparazione delle soluzioni stock
Attività biologica
Descrizione
PD173955 è un potente inibitore di Bcr-Abl con IC50 di 1-2 nM, che inibisce anche l'attività di Src con IC50 di 22 nM.
Target
Bcr-Abl
Src
1 nM-2 nM
22 nM
In vitro
PD173955 inibisce potentemente la crescita cellulare dipendente da Bcr-Abl con IC50 di 2-35 nM in linee cellulari Bcr-Abl-positive, circa 100-200 volte più sensibile rispetto alle linee cellulari Bcr-Abl-negative. Questo composto inibisce anche la proliferazione delle cellule M07e dipendente dal ligando kit con IC50 di 40 nM, attraverso l'inibizione dell'autofosforilazione di c-kit dipendente dal ligando kit. Inoltre, questa sostanza chimica, come inibitore di Src, inibisce potentemente la progressione mitotica durante la mitosi precoce nelle cellule di tutti i tipi e induce vari gradi di morte cellulare apoptotica.
Il complesso Bcr-Abl legato a SHIP2 viene immunoprecipitato da lisati cellulari di cellule K562 mantenute in condizioni di coltura in fase logaritmica. I complessi vengono raccolti su proteina A-Sepharose, e i complessi vengono lavati tre volte in tampone di lisi e quindi lavati due volte in tampone di chinasi abl [50 mM Tris (pH 8.0), 10 mM MgCl2, 1 mM DTT, 2 mM p-nitrofenilfosfato e 2 μM ATP; tampone e protocollo New England Biolabs]. I saggi di chinasi vengono eseguiti con 10 μM [γ-32P]ATP/campione per 15-60 min a 30°C in presenza o assenza delle concentrazioni indicate di farmaco. La reazione viene interrotta con l'aggiunta di tampone per campioni SDS-PAGE e riscaldata a 100°C per 10 min. Le proteine vengono separate su gel di SDS-poliacrilammide al 7,5%, i gel vengono essiccati sotto vuoto e la fosforilazione viene visualizzata mediante autorradiografia su pellicola a raggi X.
Bcr-Abl-positive cell lines (R10(+), R10(−), K562, and RWLeu4); Bcr-Abl-negative cell lines (HL-60, SK-N-ER, SK-N-MC, U138MG, and HS-16)
Concentrazioni
10 μM
Tempo di incubazione
48 hours
Metodo
Cell growth is determined by two methods. For the [3H]thymidine assay, cells (104 cells/well) are cultured in 96-well, round-bottomed plates with diluted DMSO (control) or with varying concentrations of this compound that is resuspended in DMSO for 48 h at 37°C. [3H]Thymidine is added at a concentration of 1 μCi/well, and cells are incubated for an additional 18 h. Cells were harvested with the Unifilter system, scintillation fluid (25 μl/well) is added to each well, and [3H]thymidine incorporation is determined on a Packard Scintillation Counter. Data points for all assays are obtained in triplicate, and background incorporation from cell-free wells is determined and subtracted from all data points. For cell viability, control and drug-treated harvested cells are counted on a hemocytometer using the trypan blue dye exclusion method.
Riferimenti
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12154026/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10626805/
Sellecks PD173955 È stato citato da 5 Pubblicazioni
Establishment and characterization of immortalized sweat gland myoepithelial cells
[ Sci Rep, 2022, 12(1):7]
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