PACAP 1-38

PACAP 1-38 ha effetti stimolatori potenti, efficaci e sostenuti sulla produzione di NPY neuronale simpatico e catecolamine[1]. È un neuropeptide pleiotropico, che esibisce una varietà di azioni biologiche, incluse attività come neurotrasmettitore, neuromodulatore, fattore neurotrofico, nonché un immunomodulatore, nelle cellule immunitarie attraverso il suo effetto sulla segnalazione MAPK e la modulazione dell'attivazione di NFκB. Questo composto previene drasticamente il danno delle cellule tubulari renali prossimali coltivate causato dalle catene leggere del mieloma attraverso la soppressione della produzione di citochine proinfiammatorie, inibendo la p38 MAPK e la traslocazione di NFκB tramite entrambi i recettori PAC1 e VPAC1. Inibisce la crescita delle cellule di mieloma direttamente e può anche indirettamente sopprimendo la produzione del fattore di crescita, IL-6, dalle cellule stromali del midollo osseo, che è stimolata dall'adesione delle cellule di mieloma. Questo neuropeptide ha soppresso il rilascio di IL-6 e TNFα in modo dose-dipendente[2].

PACAP38 è in grado di inibire l'espressione delle citochine indotta dalle catene leggere con grande potenza e ha prevenuto il danno cellulare risultante in vivo. Tuttavia, questo composto è anche considerato un fattore autoregolatorio per alcuni tumori, stimolandone la crescita in modo autocrino[2].

• Linee cellulari

  human renal proximal tubule cell line

• Concentrazioni

  0.0001-100 nM

• Tempo di incubazione

  3 days

• Metodo

  Human renal proximal tubule cells plated onto 6-well tissue culture plates are grown at 37°C in DRM-23E medium supplemented with 0.5% (vol/vol) FBS in an incubator for 24 hours. After prewashing with serum-free medium, the cells are incubated with κ-LC (1.5 mg/ml, ∼ 50 μM) for 3 days in the presence and absence of various concentrations of PACAP38 as well as kinase and transcription factor inhibitors. Cell viability is determined by trypan blue exclusion assays; in all experiments, at least 85% of cells remain viable. After exposure to test substances, culture supernatants are harvested and stored at –70°C for cytokine assays. After the medium is removed, the cells are washed with ice-cold PBS, and proteins are extracted by lysing cells with Sigma Mammalian Cell Lysis Reagents. Lysates are scraped and passed through a 21-gauge needle to shear DNA, and centrifuged at 12 000g for 10 minutes at 4°C. Finally, supernatants are harvested and used for kinase studies.

• Modelli animali

  Male Sprague-Dawley rats

• Dosaggi

  2 nmol/10 mL

• Somministrazione

  i.v.