Obinutuzumab (anti-CD20)

N. catalogoA2023        Batch: A202301

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Dati tecnici

Numero CAS 949142-50-1
Formula PBS buffer, pH 7.2
Isotipo Human IgG1 isotype control
Fonte Humanized (from mouse)
Conservazione
(Dalla data di ricevimento)		 Store the undiluted solution at 4°C in the dark to avoid freeze-thaw cycles
Purezza 99.65%
Concentrazione proteica: 5 mg/ml
Livello di endotossine ≤1 EU/mg

Attività biologica

Descrizione Obinutuzumab (anti-CD20) (Gazyva, GA101, Gazyvaro, Afutuzumab) è un nuovo anticorpo monoclonale anti-CD20 umanizzato, di tipo II, glicoingegnerizzato, che è stato sviluppato per la leucemia linfocitica e il linfoma di origine a cellule B. MW: 146,1 kD.
In vitro

GA101 è il primo anticorpo IgG1 umanizzato di tipo II, ingegnerizzato con Fc, contro il CD20. Rispetto al rituximab, GA101 ha una maggiore citotossicità diretta e mediata dalle cellule effettrici immunitarie e mostra un'attività superiore nei saggi cellulari e nei saggi di deplezione delle cellule B nel sangue intero.
In vivo

Nei modelli di xenotrapianto di linfoma umano, GA101 mostra un'attività antitumorale superiore, che si traduce nell'induzione di una remissione tumorale completa e in un aumento della sopravvivenza complessiva. Nei primati non umani, GA101 dimostra un'attività di deplezione delle cellule B superiore nel tessuto linfoide, inclusi i linfonodi e la milza.

Protocollo (solo per riferimento)

Saggio cellulare:

  • Obiettivo: Saggio FACS Annexina V/PI
    Cellule: Linee cellulari di NHL
    Concentrazioni: 10 μg/mL
    Tempo di incubazione: 36 ore
    Metodo: Per la stimolazione di CD40 delle cellule hCD20 da topi transgenici, i globuli rossi (GR) vengono rimossi mediante lisi ipotonica con ammonio-cloruro-potassio (ACK), e le cellule B spleniche intatte vengono purificate mediante deplezione di cellule non-B mediata da anti-CD43 (MACS). Le cellule B vengono incubate in terreno RPMI 1640 completo condizionato contenente 10% di siero fetale bovino per 2 ore (con o senza stimolazione mitogena di 10 μg/mL) e anticorpi anti-CD40 o anti-IgM Fab2. Segue un'incubazione di 36 ore con stimolazione anti-CD20 (GA101 o rituximab 10 μg/mL). Come controlli positivi per l'induzione della morte cellulare, vengono utilizzati i seguenti agenti: 100nM di staurosporina per l'apoptosi mediata dai mitocondri, o 1 μg/mL di anti-CD95 Fas per l'induzione estrinseca dell'apoptosi.
    Riferimento: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20194898/

    Obinutuzumab può essere applicato a topi umanizzati (es:topi SCID beige), sangue periferico e altri saggi correlati (Solo per riferimento)
Studio sugli animali:

  • Obiettivo: Rapporto di controllo tumorale (TCR) e inibizione della crescita tumorale (TGI)
    Modelli animali: Topi SCID beige femmina di 4-8 settimane
    Formulazione: --
    Dosaggi: 30 mg/kg
    Somministrazione: i.p.
    Riferimento: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24304419/

    Obiettivo: Studi di xenotrapianto di LNH in topi SCID beige
    Modelli animali: Topi SCID beige femmina di 4-5 settimane
    Formulazione: --
    Dosaggi: 10 mg/kg, 30 mg/kg
    Somministrazione: i.p.
    Riferimento: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20194898/

    Obinutuzumab può essere applicato a topi umanizzati (es: topi SCID beige), sangue periferico e altri saggi correlati (Solo per riferimento)
Riferimenti
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28004361/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24304419/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20194898/

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