Neratinib (HKI-272)

N. catalogoS2150 Lotto:S215007

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Dati tecnici

Formula

C30H29ClN6O3
Peso molecolare 557.04 Numero CAS 698387-09-6
Solubilità (25°C)* In vitro DMSO 5 mg/mL (8.97 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
30%PEG400 0.5%Tween80 5%propylene glycol

Convalidato dai laboratori Selleck. Se sono necessarie modifiche a questa formulazione, contattare il nostro team di vendita per test personalizzati.

 5.000mg/ml (8.98mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 300 μL of 16.67 mg/ml clarified PEG400 stock solution to 5 μL of Tween80, mix evenly to clarify it; add 50 μL Propylene glycol to the above system, mix evenly to clarify it; then continue to add 645 μL ddH2O Dilute to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile.
* Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto.
* Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)

Preparazione delle soluzioni stock

Attività biologica

Descrizione Neratinib è un inibitore altamente selettivo di HER2 e EGFR con IC50 di 59 nM e 92 nM in saggi senza cellule; inibisce debolmente KDR e Src, senza inibizione significativa di Akt, CDK1/2/4, IKK-2, MK-2, PDK1, c-Raf e c-Met. Fase 3.
Target
HER2
(Cell-free assay)		 EGFR
(Cell-free assay)		 KDR
(Cell-free assay)		 Src
(Cell-free assay)
59 nM 92 nM 800 nM 1.4 μM
In vitro Neratinib inibisce debolmente le tirosina chinasi KDR e Src con IC50 di 0,8 μM e 1,4 μM, rispettivamente, risultando 14 e 24 volte meno attivo rispetto a HER2. Questo composto non mostra attività contro altre serina-treonina chinasi come Akt, ciclina D1/cdk4, ciclina E/cdk2, ciclina B1/cdk1, IKK-2, MK-2, PDK1, c-Raf e Tpl-2, così come la tirosina chinasi c-Met. Inibisce selettivamente la proliferazione delle cellule 3T3 trasfettate con HER2 (3T3/neu), così come altre due cellule SK-Br-3 e BT474 sovraesprimenti HER-2 con valori di IC50 di 2-3 nM, mostrando una potenza >230 volte superiore rispetto alle cellule 3T3 non trasfettate, nonché MDA-MB-435 e SW620 che sono EGFR- e HER2-negative. Questa sostanza chimica inibisce anche la proliferazione delle cellule A431 dipendenti da EGFR con una IC50 di 81 nM. Riduce l'autofosforilazione del recettore HER2 nelle cellule BT474 con una IC50 di 5 nM e la fosforilazione di EGFR dipendente da EGF nelle cellule A431 con una IC50 di 3 nM. Il blocco di HER-2 da parte di questo composto si traduce nell'inibizione delle vie MAPK e Akt a valle con una IC50 di 2 nM, in modo più potente del Trastuzumab. Inibisce l'espressione della ciclina D1 e la fosforilazione della produzione del gene di suscettibilità Rb nelle cellule BT474 con una IC50 di 9 nM, portando all'arresto in G1-S e, in ultima analisi, a una diminuzione della proliferazione cellulare.
In vivo La somministrazione orale di Neratinib inibisce significativamente la crescita degli xenotrapianti 3T3/neu, con un'inibizione del 34%, 53%, 98% e 98% a dosi di 10, 20, 40 e 80 mg/kg/giorno, rispettivamente. In accordo con l'inibizione della fosforilazione di HER-2 dell'84% entro 1 ora dalla somministrazione a 40 mg/kg/giorno, questo composto inibisce la crescita degli xenotrapianti BT474 del 70-82%, 67% e 93% a dosi di 5, 10 e 40 mg/kg/giorno, rispettivamente. È anche efficace contro gli xenotrapianti SK-OV-3 con un'inibizione del 31% e 85% a 5 e 60 mg/kg/giorno, rispettivamente. Questa sostanza chimica è meno potente contro gli xenotrapianti A431 dipendenti da EGFR rispetto ai tumori dipendenti da HER-2, con un'inibizione del 32% e 44% a 5 e 20 mg/kg/giorno, rispettivamente. Mostra poca attività contro gli xenotrapianti MCF-7 e MX-1 che esprimono bassi livelli di HER-2 e EGFR, con solo il 28% di inibizione a 80 mg/kg/giorno, suggerendo che ha un'attività selettiva per le cellule che esprimono HER-2 o EGFR.

Protocollo (da riferimento)

Saggio della chinasi:[1]
  • Saggio di autofosforilazione senza cellule utilizzando fluorometria risolta nel tempo

    Neratinib viene preparato come scorte da 10 mg/mL in DMSO e diluito in 25 mM HEPES (pH 7,5; 0,002 ng/mL-20 μg/mL). Frammenti ricombinanti purificati C-terminali di HER2 (amminoacidi 676-1255) o del recettore del fattore di crescita epidermico (EGFR) (amminoacidi 645-1186) [diluiti in 100 mM HEPES (pH 7,5) e 50% glicerolo] vengono incubati con concentrazioni crescenti di questo composto in 4 mM HEPES (pH 7,5), 0,4 mM MnCl2, 20 μM vanadato di sodio e 0,2 mM DTT per 15 minuti a temperatura ambiente in piastre ELISA a 96 pozzetti. La reazione chinasica viene avviata dall'aggiunta di 40 μM ATP e 20 mM MgCl2 e lasciata procedere per 1 ora a temperatura ambiente. Le piastre vengono lavate e la fosforilazione viene rilevata utilizzando anticorpi anti-fosfo-tirosina marcati con Europio (15 ng/pozzetto). Dopo i passaggi di lavaggio e di potenziamento, il segnale viene rilevato utilizzando un lettore di fluorescenza Victor2 (lunghezza d'onda di eccitazione 340 nm, lunghezza d'onda di emissione 615 nm). La concentrazione di questa sostanza chimica che inibisce la fosforilazione del recettore del 50% (IC50) viene calcolata dalle curve di inibizione.
Saggio cellulare:[1]
  • Linee cellulari

    3T3, 3T3/neu, A431, BT474, SK-Br-3, MDA-MB-435, and SW480

  • Concentrazioni

    Dissolved in DMSO, final concentrations 0.5 ng/mL-5 μg/mL

  • Tempo di incubazione

    2 or 6 days

  • Metodo

    Cells are exposed to various concentrations of Neratinib for 2, or 6 days. Cell proliferation is determined using sulforhodamine B, a protein binding dye. Briefly, cells are fixed with 10% trichloroacetic acid and washed extensively with water. Cells are then stained with 0.1% sulforhodamine B and washed in 5% acetic acid. Protein-associated dye is solubilized in 10 mM Tris, and absorbance is measured at 450 nM. The concentration of this compound that inhibits cell proliferation by 50% (IC50) is determined from inhibition curves.
Studio sugli animali:[1]
  • Modelli animali

    Female athymic (nude) mice implanted s.c. with 3T3/neu, BT474, MCF-7, or SK-OV-3 cells

  • Dosaggi

    ~80 mg/kg/day

  • Somministrazione

    Gavage

Riferimenti

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15173008/

Convalida del prodotto da parte del cliente

<p>HER2 mutations V777L, D769H, V842I, G309A induce gain-of-function over HER2 WT in MCF10A mammary epithelial cells. B, HER2 WT, L755S, and del.755–759 cells were grown in Matrigel in the presence of DMSO vehicle (0.5%), neratinib (0.5  μmol/L) or gefitinib (0.5  μmol/L). Phase contrast images were obtained as in A. C,  MCF10A-HER2 WT or mutants were seeded in soft agar. After 7 days of growth, they were treated with DMSO vehicle (0.5%), lapatinib (0.5 μmol/L) or neratinib (0.5 μmol/L) for an additional week. Error bars represent 95% highest posterior density intervals. *, Significant difference between the HER2 mutant and HER2 WT; #, the effect of inhibitor treatment was significant (95% highest posterior density interval did not contain 0 for both).  D, photomicrographs of the colonies in soft agar on day 12, magnification ×40. </p>

Dati da [ Cancer Discov , 2013 , 3, 224-37 ]

<p> </p><div>Differential sensitivity of EGFR-mutant glioma and lung cancer cell lines to the irreversible EGFR inhibitors HKI-272 and CI-1033. A, HKI-272 induces cell death in GBM cells with EGFR EC mutation (SKMG3, SF268) but not EGFR wild-type (WT EGFR) cancer cell lines or astrocytes (NHA). Cell death was assessed by trypan blue exclusion after 5 days of inhibitor treatment. Cells lines in black express wild-type EGFR, whereas those in red contain EGFR EC mutations.</div>

Dati da [ Cancer Discov , 2012 , 2, 458-471 ]

<p> </p><div>Differential sensitivity of EGFR-mutant glioma and lung cancer cell lines to the irreversible EGFR inhibitors HKI-272 and CI-1033. C, HKI-272 is more potent than CI-1033 in blocking EGFR phosphorylation in SKMG3 cells with EGFR EC mutation. SKMG3 cells were treated with the indicated doses of CI-1033 or HKI-272, and whole lysates were analyzed by immunoblot with the indicated antibodies.</div>

Dati da [ Cancer Discov , 2012 , 2, 458-471 ]

(C, D) Cells were treated as mentioned above for the indicated times and processed for immunofluorescence experiments with anti-ErbB2 antibody (green). Nuclei were stained with DAPI (blue). Examples of intracellular ErbB2 punctae are indicated with yellow triangles. Scale bar = 10 μm.

Dati da [ , , Cancer Lett, 2016, 382(2):176-185 ]

Sellecks Neratinib (HKI-272) È stato citato da 116 Pubblicazioni

APOBEC3 mutagenesis drives therapy resistance in breast cancer [ Nat Genet, 2025, 57(6):1452-1462] PubMed: 40379787
Sevabertinib, a Reversible HER2 Inhibitor with Activity in Lung Cancer [ Cancer Discov, 2025, 10.1158/2159-8290.CD-25-0605] PubMed: 41090369
Small molecule kinase inhibitor altiratinib inhibits brain cyst forming bradyzoites of Toxoplasma gondii [ J Microbiol, 2025, 63(2):e2409001] PubMed: 40044130
KinoViz: A User-Friendly Web Application for High-Throughput Kinome Profiling Analysis and Visualization in Cancer Research [ Res Sq, 2025, rs.3.rs-6431257] PubMed: 40630533
Hotspot mutations in HER2 interfaces destabilize structure, causing breast cancer treatment failure [ Res Sq, 2025, rs.3.rs-5931887] PubMed: 40166021
Proteogenomic analysis dissects early-onset breast cancer patients with prognostic relevance [ Exp Mol Med, 2024, 56(11):2382-2394] PubMed: 39482530
Peptidylarginine deiminase 3 modulates response to neratinib in HER2 positive breast cancer [ Oncogenesis, 2024, 13(1):30] PubMed: 39097594
Patient-derived rhabdomyosarcoma cells recapitulate the genetic and transcriptomic landscapes of primary tumors [ iScience, 2024, 27(10):110862] PubMed: 39319271
Synergistic Effects of Neratinib in Combination With Palbociclib or Miransertib in Brain Cancer Cells [ World J Oncol, 2024, 15(3):492-505] PubMed: 38751701
The Combination of Afatinib With Dasatinib or Miransertib Results in Synergistic Growth Inhibition of Stomach Cancer Cells [ World J Oncol, 2024, 15(2):192-208] PubMed: 38545471

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