Prexasertib (LY2606368) Dihydrochloride

In studi non clinici, Prexasertib HCl (LY2606368) ha indotto danni al DNA misurati dalla catastrofe di replicazione e dagli aumenti di pH2A.X, un marcatore di rotture del DNA a doppio filamento[1]. Il trattamento delle cellule con questo composto determina la rapida comparsa di rotture del DNA a doppio filamento positive al TUNEL e a pH2AX nella popolazione cellulare in fase S. In un saggio funzionale, ha potentemente abrogato il checkpoint G2-M attivato dalla doxorubicina in cellule HeLa p53-deficienti con un EC50 di 9 nmol/L. Era ampiamente antiproliferativo con valori IC50 tipicamente <50 nmol/L nelle linee cellulari più sensibili, con una minoranza di linee cellulari che mostravano una notevole resistenza con IC50's >1.000 nmol/L. Questo composto richiede CDC25A e CDK2 per causare danni al DNA[2].

Prexasertib HCl (LY2606368) ha inibito la crescita tumorale negli xenotrapianti di cancro come monoterapia e in combinazione con altri agenti[1]. In un modello di cancro ovarico ortotopico SKOV3, ha dimostrato di inibire la crescita dei tumori primari e di ridurre significativamente l'incidenza di metastasi e l'accumulo di ascite. Questo composto ha anche dimostrato efficacia in un modello ortotopico di cancro pancreatico SW1990, con un'inibizione del 92% della crescita del tumore primario e l'eliminazione delle metastasi ai linfonodi, alla milza e all'intestino[3].

• Linee cellulari

  HeLa cells

• Concentrazioni

  33 or 100 nmol/L

• Tempo di incubazione

  12 h

• Metodo

  HeLa cells were plated onto T25 flasks and allowed to recover for 24 hours. Prexasertib HCl (LY2606368) was then added to give final concentrations of 33 or 100 nmol/L. In some experiments, 20μmol/L Z-VAD-FMK was included during the drug treatment. Cells were treated for 12 hours, and during the last 2 hours, Colchisol was added to 1 μg/mL. Fixation of nuclei for metaphase spreads was done following the method of Bayani and Squire. Chromosome spreads were done. A 12-μL volume of cell suspension in 3:1 methanol/acetic acid fixative was dropped from a height of 3 cm onto dry glass slides or coverslips. The slides were then heated for 45 seconds on a 43°C metal block, before being removed to allow drying to complete at room temperature. Coverslips were mounted on slides with Vectashield Hard Set mounting medium with DAPI. Slides were examined with a Leica DMR fluorescence microscope and images were captured using a SPOT RT3 Slider camera.

• Modelli animali

  Female CD-1 nu-/nu- mice

• Dosaggi

  15 mg/kg

• Somministrazione

  s.c.