CC-5013 (Lenalidomide)

Lenalidomide induce fortemente la produzione di IL-2 e sIL-2R. Questa fosforilazione della tirosina di CD28 sulle cellule T indotta dal composto è seguita da un'attivazione a valle di NF-κB. [2]

Questo composto e la pomalidomide inibiscono l'autoubiquitinazione di CRBN nelle cellule HEK293 T che esprimono CRBN di tipo selvatico competente per il legame con la talidomide, ma non CRBN(YW/AA) difettoso nel legame con la talidomide. La sovraespressione della proteina CRBN di tipo selvatico, ma non della proteina mutante CRBN(YW/AA), nelle cellule di mieloma KMS12, amplifica le riduzioni mediate dalla pomalidomide nell'espressione di c-myc e IRF4 e gli aumenti nell'espressione di p21(WAF-1). La selezione a lungo termine per la resistenza a questo composto nelle linee cellulari di mieloma H929 è accompagnata da una riduzione di CRBN, mentre nelle cellule di mieloma DF15R resistenti sia alla pomalidomide che a questa sostanza chimica, la proteina CRBN è non rilevabile. [3]

Questa sostanza chimica previene l'induzione di difetti regolando al ribasso l'espressione di molecole inibitorie delle cellule tumorali. Previene l'induzione di disfunzioni sinaptiche litiche delle cellule T indotte dal tumore. Il trattamento con questo composto blocca la disfunzione sinaptica dell'actina delle cellule T indotta dalle cellule CLL, imita il blocco anticorpale e regola al ribasso l'espressione dei ligandi inibitori CLL e dei loro recettori sulle cellule T. Questo trattamento previene l'immunosoppressione indotta dal tumore in FL, DLBCL, HL, MM, SCC e OC e regola al ribasso l'espressione del ligando immunosoppressivo su tutte le cellule tumorali esaminate. La funzione di uccisione delle CTL aumenta significativamente dopo il blocco anticorpale dei ligandi inibitori CLL o il trattamento con questa sostanza chimica rispetto ai trattamenti di controllo. Il trattamento di co-colture di cellule T-CLL autologhe con questo agente inverte la compromissione della formazione della sinapsi litica delle cellule T CD8⁺ e del traffico della granzima B. [4]

L'induzione dell'angiogenesi da parte di bFGF è significativamente inibita dal trattamento orale di Lenalidomide in modo dose-dipendente. Questo composto diminuisce significativamente la percentuale di area vascolarizzata dal 5,16% (gruppo di controllo) al 2,58% (50 mg/kg). Riduce significativamente il MVL totale calcolato da 21,07 (controllo) a 8,11 (50 mg/kg). Questa sostanza chimica inibisce significativamente la migrazione delle HUVEC attraverso le membrane rivestite di fibronectina verso 0,1 ng/mL di bFGF a 100 μM, 1 ng/mL di VEGF a concentrazioni di 10 μM e 100 μM. [5]

• Saggio per l'inibizione della sintesi di TNF da parte di PBMC umane

  Le PBMC umane da donatori normali sono ottenute mediante centrifugazione a gradiente di densità di Ficoll-Hypaque. Le cellule (10⁶ cellule/mL) vengono coltivate in RPMI supplementato con 10 siero AB+, 2 mM di l-glutammina, 100 U/mL di penicillina e 100 μg/mL di streptomicina. La lenalidomide viene disciolta in DMSO a 20 mg/mL; un'ulteriore diluizione viene effettuata con terreno di coltura. La concentrazione finale di DMSO in tutti i saggi, inclusi i controlli, è dello 0,25%. Questo composto viene aggiunto alle cellule 1 ora prima dell'aggiunta di LPS. Le PBMC (10⁶ cellule/mL) vengono stimolate con 1 μg/mL di LPS da Salmonella minnesota R595. Le cellule, in triplicato, vengono incubate con LPS per 18-20 ore a 37 °C in 5% di CO₂. I surnatanti vengono quindi raccolti e analizzati per i livelli di citochine. In alcuni esperimenti, i surnatanti vengono mantenuti congelati a -70 °C fino all'uso. La vitalità cellulare viene analizzata mediante il metodo di esclusione del colorante blu Trypan. La concentrazione di TNFα nei surnatanti di coltura viene determinata mediante ELISA. Questa sostanza chimica viene analizzata in un minimo di tre esperimenti separati. La percentuale di inibizione viene determinata come 100 × [1 - (citochina(sperimentale)/citochina(controllo))].

• Modelli animali

  Adult male Sprague-Dawley rats bearing HUVECs cells

• Dosaggi

  50 mg/kg and 250 mg/kg

• Somministrazione

  Administered via i.p.