JNK-IN-8

N. catalogoS4901 Lotto:S490103

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Dati tecnici

Formula

C29H29N7O2
Peso molecolare 507.59 Numero CAS 1410880-22-6
Solubilità (25°C)* In vitro DMSO 100 mg/mL (197.0 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO 40%PEG300 5%Tween80 50%ddH2O

Convalidato dai laboratori Selleck. Se sono necessarie modifiche a questa formulazione, contattare il nostro team di vendita per test personalizzati.

 2.000mg/ml (3.94mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 40 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile.
* Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto.
* Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)

Preparazione delle soluzioni stock

Attività biologica

Descrizione JNK-IN-8 (JNK Inhibitor XVI) è il primo inibitore irreversibile di JNK per JNK1, JNK2 e JNK3 con IC50 di 4,7 nM, 18,7 nM e 1 nM, una selettività >10 volte superiore contro MNK2, Fms e nessuna inibizione di c-Kit, Met, PDGFRβ nella linea cellulare A375.
Target
JNK3
(A375 cells)		 JNK1
(A375 cells)		 JNK2
(A375 cells)		 Kit (V559D,T670I)
(A375 cells)		 Kit (V559D)
(A375 cells)
1 nM 4.7 nM 18.7 nM 56 nM 92 nM
In vitro

JNK-IN-8 inibisce la fosforilazione di c-Jun nelle cellule HeLa e A375 con EC50 di 486 nM e 338 nM, rispettivamente. Questo composto mostra un drammatico miglioramento nella selettività ed ha eliminato il legame a IRAK1, PIK3C3, PIP4K2C e PIP5K3. Richiede Cys116 per l'inibizione di JNK2.

Questa sostanza chimica (10 mM) sopprime la fosforilazione di c-Jun stimolata da IL-1β nelle cellule IL-1R, un substrato consolidato delle JNK. Si lega covalentemente alle isoforme di JNK, causando un leggero ritardo nella mobilità elettroforetica delle isoforme di JNK.

È stato scoperto che inibisce la chinasi JNK mediante il profiling di selettività chinasica a largo spettro di una libreria di inibitori chinasici di acrilamide basati sulla struttura, utilizzando l'approccio KinomeScan. Questo composto possiede una regioselettività distinta delle sottostrutture 1,4-dianilina e 1,3-acido aminobenzoico. Adotta una conformazione di legame di tipo I a forma di L per accedere a Cys 154, situata verso il bordo del sito di legame dell'ATP.

In vivo

JNK-IN-8 è un potente inibitore di JNK che mira specificamente all'attivazione di JNK. Ha attività antifungina.
Caratteristiche JNK-IN-8 e JNK-IN-7 sono strutturalmente molto simili, ma mentre il primo è un inibitore covalente specifico delle JNKs.

Protocollo (da riferimento)

Saggio della chinasi:

[1]
  • Saggio di cinetica di legame

    Saggio di cinetica di legame Le cellule A375 vengono pretrattate con 1 μM di JNK-IN-8 per i tempi indicati. Rimuovere il mezzo e lavare tre volte con PBS. Risospendere il pellet cellulare con 1 mL di tampone di lisi (1% NP-40, 1% CHAPS, 25 mM Tris, 150 mM NaCl, cocktail di inibitori di fosfatasi e cocktail di inibitori di proteasi). Ruotare da un'estremità all'altra per 30 min a 4℃. I lisati vengono chiarificati mediante centrifugazione a 1,4×104 rpm per 15 min nell'Eppendorf. I lisati chiarificati vengono filtrati su gel in tampone di chinasi (0,1% NP-40, 20 mM HEPES, 150 mM NaCl, cocktail di inibitori di fosfatasi, cocktail di inibitori di proteasi) utilizzando colonne 10DG. La concentrazione proteica totale del lisato filtrato su gel dovrebbe essere di circa 5–15 mg/ml. Il lisato cellulare viene etichettato con la sonda di ActivX a 5 μM per 1 ora. I campioni vengono ridotti con DTT e le cisteine vengono bloccate con iodoacetammide e filtrate su gel per rimuovere i reagenti in eccesso e scambiare il tampone. Aggiungere 1 volume di tampone di legame 2× (2% Triton-100, 1% NP-40, 2 mM EDTA, 2× PBS) e 50 μL di sospensione di microsfere di streptavidina, e ruotare da un'estremità all'altra per 2 ore, centrifugare a 7.000 rpm per 2 min. Lavare tre volte con tampone di legame 1× e tre volte con PBS. Aggiungere 30 μL di tampone campione 1× alle microsfere; riscaldare i campioni a 95℃ per 10 min. Eseguire i campioni su un gel SDS-PAGE a 110V. Dopo il trasferimento, la membrana viene immunoblottata con anticorpo JNK.
Studio sugli animali:

[4]
  • Modelli animali

    C57BL/6 mice

  • Dosaggi

    10 mg/kg

  • Somministrazione

    i.p.

Riferimenti

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22284361/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22007846/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23438744/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28112734/

Convalida del prodotto da parte del cliente

<p>SCC-9 cells were pre-treated with JNK inhibitor SP 600125 (1 umol/L) or JNK-IN-8 (1 umol/L) for 1 h, cells were also stimulated with indicated AZD8055 and cultured for 72 h, cell survival was analyzed. Scramble RNAi or JNK1/2 RNAi (JNK RNAi-1 or JNK RNAi-2, see methods) transfected HEK-293 cells were stimulated with AZD8055, cells were further cultured for 72 h before cell survival was tested.</p>

Dati da [ Biochem Biophys Res Commun , 2013 , 440(4), 701-6 ]

The viability of DLBCL cell lines was assessed after 72 h of treatment with the indicated concentrations of the JNK inhibitor JNK-IN-8. Mean + SEM of at least three independent experiments is shown.

Dati da [ , , J Exp Med, 2015, 212(5): 775-92 ]

Striatal slices from 6-OHDA-lesion mice were incubated for 5 min with vehicle, SKF38393 (3 μM), or SKF38393 in the presence of SP600125 (20 μM) or JNK-IN-8 (10 μM). P-cJun and P-ERK 1/2 were determined by Western blotting (25 and 10 μg of protein were loaded, respectively). Note the reduction of SKF38393-induced P-cJun produced by the two JNK inhibitors (top panels). In contrast, SP600125 and JNK-IN-8 did not affect the increase in P-ERK 1/2 produced by SKF38393 (bottom panels). Summary of data were calculated as percentage of control and are represented as mean ± S.E.M. 1 W ANOVA indicated significant effect of the treatment for both P-cJun (F3,16 = 15.22, p < 0.0001, n = 5 slices from 5 mice) and P-ERK 1/2 (F3,16 =18.23, p < 0.0001, n= 5 slices from mice).

Dati da [ , , Neurobiol Dis, 2018, 110:37-46 ]

ICT induces JNK activation, mediating mPTP opening and CRC cell necrosis. JNK expression (p- and regular) in HT-29 or the primary CRC cells stimulated with applied ICT was tested by Western blots (a). HT-29 cells were pre-treated with JNK inhibitors SP600125 (SP), JNK inhibitor IX (JNK-IX), and JNK-IN-8 (JNKi-8) (5 μM each) for 1 h, followed by ICT (25 μM) stimulation, MMP decrease was tested by JC-10 dye assay (b, after 12 h), and cell necrosis was tested by LDH release assay (c, after 72 h).

Dati da [ , , Tumour Biol, 2016, 37(3):3135-44 ]

Sellecks JNK-IN-8 È stato citato da 102 Pubblicazioni

Macropinocytosis maintains CAF subtype identity under metabolic stress in pancreatic cancer [ Cancer Cell, 2025, S1535-6108(25)00271-5] PubMed: 40712568
Oncogenic RAS induces a distinctive form of non-canonical autophagy mediated by the P38-ULK1-PI4KB axis [ Cell Res, 2025, 10.1038/s41422-025-01085-9] PubMed: 40055523
Spike-in enhanced phosphoproteomics uncovers synergistic signaling responses to MEK inhibition in colon cancer cells [ Nat Commun, 2025, 16(1):4884] PubMed: 40419504
SLFN11-mediated ribosome biogenesis impairment induces TP53-independent apoptosis [ Mol Cell, 2025, S1097-2765(25)00042-5] PubMed: 39909041
Inhibiting JNK and PI3K-Akt signaling pathways altered spontaneous network bursts and developmental trajectories of neuronal networks [ J Neural Eng, 2025, 22(5)] PubMed: 40897198
L1CAM signaling through planar cell polarity generates SOX2 + metastatic progenitors in lung adenocarcinoma [ bioRxiv, 2025, 2025.08.22.671773] PubMed: 40894609
[C6TSEDRVAJZ, a combination of small-molecule compounds, induces differentiation of human placental fibroblasts into epithelioid cells in vitro] [ Nan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao, 2025, 45(2):322-330] PubMed: 40031976
The ribotoxic stress response drives UV-mediated cell death [ Cell, 2024, 187(14):3652-3670.e40] PubMed: 38843833
Pharmacogenomic profiling of intra-tumor heterogeneity using a large organoid biobank of liver cancer [ Cancer Cell, 2024, 42(4):535-551.e8] PubMed: 38593780
Reversible covalent c-Jun N-terminal kinase inhibitors targeting a specific cysteine by precision-guided Michael-acceptor warheads [ Nat Commun, 2024, 15(1):8606] PubMed: 39366946

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