Imatinib (STI571)

I saggi in vitro per l'inibizione di un panel di protein chinasi tirosiniche e serina/treoniniche mostrano che Imatinib inibisce potentemente la tirosina chinasi v-Abl e PDGFR con una IC50 rispettivamente di 0,6 e 0,1 μM. [1]

Questo composto inibisce l'attivazione dipendente da SLF dell'attività della chinasi c-Kit wild-type con una IC50 per questi effetti di circa 0,1 μM, che è simile alla concentrazione richiesta per l'inibizione di PDGFR. [2]

Esso mostra attività inibitoria della crescita sulla linea cellulare di carcinoide bronchiale umana NCI-H727 e sulla linea cellulare di carcinoide pancreatico umano BON-1 con una IC50 rispettivamente di 32,4 e 32,8 μM. [3]

Uno studio recente mostra che questa sostanza chimica ha il potenziale per esercitare i suoi effetti antileucemici nella leucemia mieloide cronica down-regolando i canali K(+) hERG1, che sono altamente espressi nelle cellule leucemiche e sembrano di eccezionale importanza nel favorire la leucemogenesi. [4]

Imatinib produce un diverso effetto antitumorale su tre tumori xenotrapiantati derivati da campioni chirurgici di tumori polmonari a piccole cellule umani freschi, con l'80%, 40% e 78% di inibizione della crescita dei tumori SCLC6, SCLC61 e SCLC108, rispettivamente, e nessuna inibizione significativa della crescita di SCLC74. [5]

Nei topi ApoE(-/-) alimentati con dieta ad alto contenuto di grassi, questo composto riduce significativamente l'area di colorazione lipidica indotta da dieta ad alto contenuto di grassi del 30%, 27% e 35% rispetto ai controlli non trattati con dieta ad alto contenuto di grassi quando dosato per gavage a 10, 20 e 40 mg/kg, rispettivamente, e sopprime l'accumulo di lipidi nell'arteria carotide. [6]

• attività chinasica del recettore PDGF

  Il recettore PDGF viene immunoprecipitato da estratti cellulari BALB/c 3T3 con antisiero di coniglio contro il recettore PDGF murino per 2 ore su ghiaccio. Vengono utilizzate sfere di Proteina A-Sepharose per raccogliere i complessi antigene-anticorpo. Gli immunoprecipitati vengono lavati due volte con TNET (50 mM Tris, pH 7,5, 140 mM NaCl, 5 mM EDTA, 1% Triton X-100), una volta con TNE (50 mM Tris, pH 7,5, 140 mM EDTA) e una volta con tampone chinasi (20 mM Tris, pH 7,5, 10 mM MgCl₂). Dopo stimolazione con PDGF (50 ng/mL) per 10 minuti a 4 °C, diverse concentrazioni di questo composto vengono aggiunte alla miscela di reazione. L'attività chinasica del recettore PDGF viene determinata mediante incubazione con 10 μCi [7-³³P]-ATP e 1 μM ATP per 10 minuti a 4 °C. I complessi immuni vengono separati mediante SDS-PAGE su gel al 7,5 %.

• Linee cellulari

  BON-1 cells and NCI-H727 cells

• Concentrazioni

  ~100 μM

• Tempo di incubazione

  48 hours

• Metodo

  BON-1 cells and NCI-H727 cells are seeded into flat-bottomed 96-well plates in triplicate and allowed to adhere overnight in 10% fetal bovine serum-supplemented DMEM or RPMI 1640 complete medium, respectively; the medium is then exchanged for serum-free medium (negative control) or serum-free medium containing serial dilutions of this compound. After 48 hours (control cultures do not reach confluence), the number of metabolically active cells is determined by the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay, and absorbance is measured in a Packard Spectra microplate reader at 540 nm. Growth inhibition is calculated using the following formula: inhibition rate = (1 − a / b) × 100%, where a and b are the absorbance values of the treated and control groups, respectively.