H2DCFDA (DCFH-DA)

N. catalogoS9687 Lotto:S968701

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Dati tecnici

Formula

C24H16Cl2O7
Peso molecolare 487.29 Numero CAS 4091-99-0
Solubilità (25°C)* In vitro DMSO 97 mg/mL (199.06 mM)
Ethanol 7 mg/mL (14.36 mM)
Water Insoluble
In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile.
* Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto.
* Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)

Preparazione delle soluzioni stock

Attività biologica

Descrizione H2DCFDA (DCFH-DA) è una sonda permeabile alle cellule utilizzata per rilevare la produzione intracellulare di specie reattive dell'ossigeno (ROS). Viene de-esterificata intracellularemente e si trasforma in 2′,7′-diclorofluoresceina altamente fluorescente dopo l'ossidazione. Questo composto è utilizzato nella quantificazione sensibile e rapida delle specie reattive all'ossigeno in risposta al metabolismo ossidativo; saggio in micropiastre per il rilevamento di prodotti ossidativi nelle cellule fagocitiche e saggio quantitativo di differenziazione mieloide in multipozzetto (Ex/Em=488/525 nm).
Target
ROS
In vitro

1. H2DCFDA (DCFH-DA) viene disciolto in DMSO per ottenere soluzioni stock da 10 mM e ulteriormente diluito prima dell'uso.
2. Le cellule vengono incubate con 5 μM di questo composto in PBS al buio per 30 minuti a 37°C, quindi raccolte con una soluzione di tripsina-EDTA allo 0,05%, sospese in un terreno fresco e immediatamente analizzate con citofluorimetro.
3. Insieme ad esso, se indicato, utilizzare una modifica della fluoresceina DCFDA insensibile ai ROS come controllo positivo. La procedura di colorazione è la stessa per l'H2DCFDA.
Emissione (Em)=517 Eccitazione (Ex)=492 517

Protocollo (da riferimento)

Saggio cellulare:

[2]
  • Linee cellulari

    hCECs

  • Concentrazioni

    10 μM

  • Tempo di incubazione

    30 min

  • Metodo

    Intracellular ROS levels in hCECs are measured by incubating the cells with the redox-sensitive fluorescent dye H2DCFDA (DCFH-DA) (10 μM) at 37℃ for 30 minutes in the dark. The cells are then detached from the culture wells using 0.25% trypsin-EDTA and washed twice using ice-cold PBS. Flow cytometry measurements are performed three times for each treatment. Mean fluorescence intensity is quantified using software. Cells that had been incubated without this compound are used as negative control. The distribution of fluorescent dichlorofluorescein (DCF) on the cell monolayer is visualized and photographed using a fluorescence microscope.

Riferimenti

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26976009/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30372737/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26976009/

Sellecks H2DCFDA (DCFH-DA) È stato citato da 9 Pubblicazioni

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Erianin inhibits the growth and metastasis through autophagy-dependent ferroptosis in KRASG13D colorectal cancer [ Free Radic Biol Med, 2023, 204:301-312] PubMed: 37217090
FLRT2 suppresses bladder cancer progression through inducing ferroptosis [ J Cell Mol Med, 2023, 10.1111/jcmm.17855] PubMed: 37480224
Reactive sulfur species disaggregate the SQSTM1/p62-based aggresome-like induced structures via the HSP70 induction and prevent parthanatos [ J Biol Chem, 2023, 299(6):104710] PubMed: 37060999
[A Novel Chinese Medicine Formula Inhibits Non-small Cell Lung Cancer by Triggering Oxidative Stress Dependent on Pentose Phosphate Pathway] [ Zhongguo Fei Ai Za Zhi, 2023, 10.3779/j.issn.1009-3419.2023.101.27] PubMed: 37985150
Elevated neutrophil extracellular traps by HBV-mediated S100A9-TLR4/RAGE-ROS cascade facilitate the growth and metastasis of hepatocellular carcinoma [ Cancer Commun (Lond), 2022, 10.1002/cac2.12388] PubMed: 36346061
S100A8-Mediated NLRP3 Inflammasome-Dependent Pyroptosis in Macrophages Facilitates Liver Fibrosis Progression [ Cells, 2022, 11(22)3579] PubMed: 36429008
The potential efficacy and mechanism of bendamustine in entra-nodal NK/T cell lymphoma [ Hematol Oncol, 2022, 10.1002/hon.3007] PubMed: 35439335

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