GW4064

GW 4064 è un agonista completo con valori di EC50 di 80 e 90 nM, rispettivamente, in cellule CV-1 trasfettate con vettori di espressione di FXR di topo e umano e un gene reporter stabilito. Non vi è attività di questo composto su altri recettori nucleari, incluso il recettore dell'acido retinoico, a concentrazioni fino a 1 μM. Pertanto, questa sostanza chimica è un potente e selettivo agonista non steroideo di FXR. [2]

L'analisi farmacocinetica nei ratti mostra che GW 4064 possiede una biodisponibilità orale del 10% con una t_1/2 = 3,5 h. Ratti Fisher vengono dosati con questo composto tramite gavage orale. Dopo 7 giorni, si osserva una diminuzione dose-dipendente dei trigliceridi sierici nei ratti che ricevono questa sostanza chimica, con una ED50 = 20 mg/kg. [2]

• Saggio di Transfezione Transiente di FXR

  Le cellule CV1 vengono mantenute in terreno DMEM ad alto glucosio. Le cellule CV1 vengono raccolte 72 ore prima della trasfezione e piastrate in terreno DMEM-F12 privo di rosso fenolo contenente 5% di siero bovino fetale trattato con carbone/destrano e 2 mM di glutammina. Il giorno della trasfezione, le cellule CV1 vengono raccolte in terreno DMEM-F12 privo di rosso fenolo contenente 5% di siero bovino fetale trattato con carbone/destrano e 2 mM di glutammina, contate e seminate in una fiasca da T-175 cm² ad una densità di 14 milioni di cellule per fiasca prima di aggiungere la miscela di trasfezione. La miscela di trasfezione FuGENE® 6 contenente 0,55 μg di plasmide di espressione pFA-CMV-GAL4-human FXR LBD, 10,92 μg del plasmide reporter (UAS)-tk-Luciferase, 20,75 μg di pBluescript II KS+, e 3,82 μg di un costrutto co-attivatore del recettore steroideo umano (SRC-1) viene incubata e quindi aggiunta alle cellule CV1 per incubazione notturna in incubatore. Le cellule CV1 trasfettate vengono raccolte in terreno DMEM-F12 privo di rosso fenolo contenente 5% di siero bovino fetale trattato con carbone/destrano e 2 mM di glutammina. Le cellule trasfettate vengono aggiunte ad una concentrazione di 3750 cellule/pozzetto a piastre a 384 pozzetti contenenti ligandi. L'espressione della luciferasi viene misurata utilizzando il sistema Steady-Glo™Luciferase Assay System 24 ore dopo l'incubazione con il ligando. Questo composto viene utilizzato come controllo e i dati vengono normalizzati a questo composto come % di controllo.

• Linee cellulari

  HepG2 cells

• Concentrazioni

  10 µM

• Tempo di incubazione

  2 h

• Metodo

  Cells were treated with indicated concentration of GW4064 for 2 h.

• Modelli animali

  Fisher rats

• Dosaggi

  0-100 mg/kg

• Somministrazione

  Orally, b.i.d.