GW4064

GW 4064 is a full agonist with EC50 values of 80 and 90 nM, respectively, in CV-1 cells transfected with mouse and human FXR expression vectors and an established reporter gene. There is no activity of this compound on other nuclear receptors, including the retinoic acid receptor, at concentrations up to 1 μM. Thus, this chemical is a potent and selective nonsteroidal FXR agonist. [2]

Pharmacokinetic analysis in rats shows that GW 4064 possesses an oral bioavailability of 10% with a t_1/2 = 3.5 h. Fisher rats are dosed with this compound by oral gavage. After 7 days, a dose-dependent lowering of serum triglycerides is observed in the rats receiving this chemical, with an ED50 = 20 mg/kg. [2]

• Saggio di Transfezione Transiente di FXR

  Le cellule CV1 vengono mantenute in terreno DMEM ad alto glucosio. Le cellule CV1 vengono raccolte 72 ore prima della trasfezione e piastrate in terreno DMEM-F12 privo di rosso fenolo contenente 5% di siero bovino fetale trattato con carbone/destrano e 2 mM di glutammina. Il giorno della trasfezione, le cellule CV1 vengono raccolte in terreno DMEM-F12 privo di rosso fenolo contenente 5% di siero bovino fetale trattato con carbone/destrano e 2 mM di glutammina, contate e seminate in una fiasca da T-175 cm² ad una densità di 14 milioni di cellule per fiasca prima di aggiungere la miscela di trasfezione. La miscela di trasfezione FuGENE® 6 contenente 0,55 μg di plasmide di espressione pFA-CMV-GAL4-human FXR LBD, 10,92 μg del plasmide reporter (UAS)-tk-Luciferase, 20,75 μg di pBluescript II KS+, e 3,82 μg di un costrutto co-attivatore del recettore steroideo umano (SRC-1) viene incubata e quindi aggiunta alle cellule CV1 per incubazione notturna in incubatore. Le cellule CV1 trasfettate vengono raccolte in terreno DMEM-F12 privo di rosso fenolo contenente 5% di siero bovino fetale trattato con carbone/destrano e 2 mM di glutammina. Le cellule trasfettate vengono aggiunte ad una concentrazione di 3750 cellule/pozzetto a piastre a 384 pozzetti contenenti ligandi. L'espressione della luciferasi viene misurata utilizzando il sistema Steady-Glo™Luciferase Assay System 24 ore dopo l'incubazione con il ligando. Questo composto viene utilizzato come controllo e i dati vengono normalizzati a questo composto come % di controllo.

• Linee cellulari

  HepG2 cells

• Concentrazioni

  10 µM

• Tempo di incubazione

  2 h

• Metodo

  Cells were treated with indicated concentration of GW4064 for 2 h.

• Modelli animali

  Fisher rats

• Dosaggi

  0-100 mg/kg

• Somministrazione

  Orally, b.i.d.