Omipalisib (GSK2126458)

N. catalogoS2658 Lotto:S265807

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Dati tecnici

Formula

C25H17F2N5O3S
Peso molecolare 505.5 Numero CAS 1086062-66-9
Solubilità (25°C)* In vitro DMSO 100 mg/mL (197.82 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile.
* Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto.
* Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)

Preparazione delle soluzioni stock

Attività biologica

Descrizione Omipalisib (GSK2126458, GSK458) è un inibitore altamente selettivo e potente di p110α/β/δ/γ, mTORC1/2 con Ki di 0,019 nM/0,13 nM/0,024 nM/0,06 nM e 0,18 nM/0,3 nM in saggi acellulari, rispettivamente. Questo composto induce l'Autophagy. Fase 1.
Target
p110α
(Cell-free assay)		 p110δ
(Cell-free assay)		 p110γ
(Cell-free assay)		 p110β
(Cell-free assay)		 mTORC1
(Cell-free assay)		 Visualizza altro
0.019 nM(Ki) 0.024 nM(Ki) 0.06 nM(Ki) 0.13 nM(Ki) 0.18 nM(Ki)
In vitro Omipalisib (GSK2126458) inibisce potentemente l'attività dei comuni mutanti attivanti di p110α (E542K, E545K e H1047R) riscontrati nel cancro umano con Ki di 8 pM, 8 pM e 9 pM, rispettivamente. Questo composto provoca una significativa riduzione dei livelli di pAkt-S473 con notevole potenza nelle cellule T47D e BT474 con IC50 di 0,41 nM e 0,18 nM, rispettivamente. Inoltre, porta ad un arresto del ciclo cellulare in G1 e produce un effetto inibitorio sulla proliferazione cellulare in un ampio pannello di linee cellulari, comprese le linee di cancro al seno T47D e BT474 con IC50 di 3 nM e 2,4 nM, rispettivamente.
In vivo In un modello di xenotrapianto di tumore umano BT474, il trattamento con Omipalisib (GSK2126458) si traduce in una riduzione dose-dipendente dei livelli di pAkt-S473 e ha mostrato un'inibizione dose-dipendente della crescita tumorale a una bassa dose di 300 μg/kg. Inoltre, mostra una bassa clearance ematica e una buona biodisponibilità orale in quattro specie precliniche (topo, ratto, cane e scimmia).

Protocollo (da riferimento)

Saggio della chinasi:[1]
  • Saggi di profilazione in vitro HTRF per l'inibizione di PI3K

    I composti vengono diluiti in serie (3 volte in 100% DMSO) su una piastra madre di polipropilene a 384 pozzetti dalla colonna 1 alla colonna 12 e dalla colonna 13 alla colonna 24, per ottenere 11 concentrazioni per Omipalisib (GSK2126458). Le colonne 6 e 18 contengono solo DMSO. Una volta effettuate le titolazioni, 0,05 μL vengono trasferiti in una piastra di saggio a basso volume a 384 pozzetti. Questa piastra di saggio contiene tre controlli farmacologici (noti inibitori di PI3K) e 3 controlli di saggio: (1) Enzima senza inibitore; (2) Tampone meno enzima e (3) Tampone meno enzima più PIP3 nativo. Il DMSO viene stampato in tutti i pozzetti delle colonne 6 e 18. Il PIP3 viene aggiunto a 40 μM in 1X tampone di reazione (1 μL di 200 μM PIP3) a file alternate della colonna 18 (pozzetti 18 B, D, F, H, J, L, N, P). Le reazioni di controllo senza enzima vengono eseguite nei pozzetti 18 A, C, E, G, I, K, M, O (0,1 μL di 100% DMSO). Il saggio di profilazione della PI3-Kinasi è ottimizzato utilizzando il kit HTRF. Il kit di saggio contiene sette reagenti: 1) Tampone di reazione 4X; 2) PIP2 nativo (substrato); 3) Stop A (EDTA); 4) Stop B (Biotin-PIP3); 5) Miscela di rilevamento A (Streptavidina-APC); 6) Miscela di rilevamento B (Anti-GST marcato con Eu più dominio PH marcato con GST); 7) Miscela di rilevamento C (KF). Il tampone di reazione PI3Kinasi viene preparato diluendo il brodo 1:4 con acqua deionizzata. Il DTT appena preparato viene aggiunto a una concentrazione finale di 5 mM il giorno dell'uso. L'aggiunta di enzima e la pre-incubazione del composto vengono avviate con l'aggiunta di 2,5 μL di PI3K (al doppio della sua concentrazione finale) in 1X tampone di reazione a tutti i pozzetti utilizzando un Multidrop Combi. Le piastre vengono incubate a temperatura ambiente per 15 minuti. Le reazioni vengono avviate con l'aggiunta di 2,5 μL di soluzione di substrato 2X (PIP2 e ATP in 1X tampone di reazione) utilizzando un Multidrop Combi. Le piastre vengono incubate a temperatura ambiente per un'ora. Le reazioni vengono bloccate con l'aggiunta di 2,5 μL di soluzione di arresto (Stop A e Stop B premiscelati in un rapporto di 5:1, rispettivamente) a tutti i pozzetti utilizzando il Multidrop Combi. Le reazioni bloccate vengono quindi elaborate per rilevare la formazione del prodotto aggiungendo 2,5 μL di soluzione di rilevamento a tutti i pozzetti utilizzando il Multidrop Combi (miscela di rilevamento C, miscela di rilevamento A e miscela di rilevamento B combinate insieme in un rapporto di 18:1:1, cioè: per un volume totale di 6000 μL, mescolare 5400 μL di miscela di rilevamento C, 300 μL di miscela di rilevamento A e 300 μL di miscela di rilevamento B. Nota: questa soluzione deve essere preparata 2 ore prima dell'uso). Dopo un'ora di incubazione al buio, il segnale HTRF viene misurato sul lettore di piastre Envision impostato per eccitazione a 330 nm e rilevamento a doppia emissione a 620 nm (Eu) e 665 nm (APC).
Saggio cellulare:[1]
  • Linee cellulari

    BT474, HCC1954 and T-47D cells

  • Concentrazioni

    0-1 μM

  • Tempo di incubazione

    72 hours

  • Metodo

    BT474, HCC1954 and T-47D (human breast) are cultured in RPMI-1640 containing 10% fetal bovine serum at 37 °C in 5% CO2 incubator. Cells are split into T75 flask two to three days prior to assay set up at density which yields approximately 70-80% confluence at time of harvest for assay. Cells are harvested using 0.25% trypsin-EDTA. Cell counts are performed on cell suspension using Trypan Blue exclusion staining. Cells are then plated in 384 well black flat bottom polystyrene in 48 μL of culture media per well at 1,000 cells/well. All plates are placed at 5% CO2, 37 °C overnight and Omipalisib (GSK2126458) is added the following day. One plate is treated with CellTiter-Glo for a day 0 (t=0) measurement and read as described below. This compound is prepared in clear bottom polypropylene 384 well plates with consecutive two fold dilutions. 4 μL of these dilutions are added to 105 μL culture media, after mixing the solution, 2 μL of these dilutions are added into each well of the cell plates. The final concentration of DMSO in all wells is 0.15%. Cells are incubated at 37 °C, 5% CO2 for 72 hours. Following 72 hours of incubation with it each plate is developed and read. CellTiter-Glo reagent is added to assay plates using a volume equivalent to the cell culture volume in the wells. Plates are shaken for approximately two minutes and incubated at room temperature for approximately 30 minutes and chemiluminescent signal is read on the Analyst GT reader. Results are expressed as a percent of the t=0 and plotted against the compound concentration. Cell growth inhibition is determined for this compound by fitting the dose response with a 4 or 6 parameter curve fit using XLfit software and determining the concentration that inhibits 50% of the cell growth (gIC50) with the Y min as the t=0 and Y max as the DMSO control. Value from wells with no cells is subtracted from all samples for background correction.
Studio sugli animali:[1]
  • Modelli animali

    Human BT474 tumors implanted in mice.

  • Dosaggi

    ≤300 μg /kg

  • Somministrazione

    Administered via p.o.

Riferimenti

  • http://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/ml900028r
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22389471/

Convalida del prodotto da parte del cliente

Dr.Wang Wei from NanFang Hospital,

<p>Dose response curve of compound on melanoma cell lines.  Compound was dissolved in DMSO, added in a 5-fold dilution series, starting with 10 μM, and incubated for 72 hours.  Fluorescence was measured after 8 hours incubation in resazurin.  Data was normalized to DMSO (maximal viability) and Doxorubicin (minimum viability).</p>

, , One customer

<p>After starved in serum-free medium for 24 h, A549 cells incubated with the indicated concentrations of GSK2126458 for 3 h,followed by 20-minute stimolation of 100ng/ml EGF.</p>

, , Dr. Zhang of Tianjin Medical University

A, Effects of AUY922 and GSK458 alone on pathways downstream of KRAS. Western blotting of EGFR, pEGFR, pMEK, MEK, pAKT, AKT, pERK, ERK, HSP70, cleaved (c)PARP, and pRSK levels in two PI3K inhibitor-resistant NSCLC cell lines following treatment with each drug. β-Actin was included as a loading control.

Dati da [ , , Cancer Lett, 2017, 406:47-53 ]

Sellecks Omipalisib (GSK2126458) È stato citato da 61 Pubblicazioni

Depleting the action of EZH2 through PI3K-mTOR inhibition to overcome metastasis and immunotherapy resistance in triple-negative breast cancer [ Mol Cancer Ther, 2025, 10.1158/1535-7163.MCT-24-0693] PubMed: 40497697
Changes in Melanoma Cell Morphology Following Inhibition of Cell Invasion by Third-Generation mTOR Kinase Inhibitors [ Int J Mol Sci, 2025, 26(16)7770] PubMed: 40869090
Combined Omipalisib and MAPK Inhibition Suppress PDAC Growth [ Cancers (Basel), 2025, 17(7)1152] PubMed: 40227649
Trametinib sensitizes KRAS-mutant lung adenocarcinoma tumors to PD-1/PD-L1 axis blockade via Id1 downregulation [ Mol Cancer, 2024, 23(1):78] PubMed: 38643157
NKX2-5 regulates vessel remodeling in scleroderma-associated pulmonary arterial hypertension [ JCI Insight, 2024, 9(10)e164191] PubMed: 38652537
Characterizing heterogeneous single-cell dose responses computationally and experimentally using threshold inhibition surfaces and dose-titration assays [ NPJ Syst Biol Appl, 2024, 10(1):42] PubMed: 38637530
Analysis of hsa_circ_0136256 as a biomarker for fibrosis in systemic sclerosis [ BMC Biotechnol, 2024, 24(1):91] PubMed: 39538329
"Proteotranscriptomic analysis of advanced colorectal cancer patient derived organoids for drug sensitivity prediction" [ J Exp Clin Cancer Res, 2023, 42(1):8] PubMed: 36604765
PI3K/mTOR inhibitors promote G6PD autophagic degradation and exacerbate oxidative stress damage to radiosensitize small cell lung cancer [ Cell Death Dis, 2023, 14(10):652] PubMed: 37802999
Integrin-mediated electric axon guidance underlying optic nerve formation in the embryonic chick retina [ Commun Biol, 2023, 6(1):680] PubMed: 37391492

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