GNF-2

N. catalogoS2899 Lotto:S289902

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Dati tecnici

Formula

C18H13F3N4O2
Peso molecolare 374.32 Numero CAS 778270-11-4
Solubilità (25°C)* In vitro DMSO 74 mg/mL (197.69 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile.
* Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto.
* Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)

Preparazione delle soluzioni stock

Attività biologica

Descrizione GNF-2 è un inibitore non competitivo dell'ATP altamente selettivo di Bcr-Abl, non mostra attività verso le cellule tumorali trasformate da Flt3-ITD, Tel-PDGFR, TPR-MET e Tel-JAK1.
Target
Bcr-Abl (SUP-B15 cell line) Bcr-Abl (K562 cell line)
268 nM 273 nM
In vitro GNF-2 provoca un'inibizione dose-dipendente della crescita delle linee cellulari positive per Bcr-abl con valori di IC50 di 273 nM (K562) e 268 nM (SUP-B15). Questo composto inibisce la crescita delle cellule Ba/F3.p210E255V e Ba/F3.p185Y253H con valori di IC50 rispettivamente di 268 nM e 194 nM. Questa sostanza chimica (1 μM) induce l'apoptosi delle cellule Ba/F3.p210 così come delle cellule Ba/F3.p210E255V. Inibisce la fosforilazione cellulare della tirosina di Bcr-abl in modo dose-dipendente con un'IC50 di 267 nM. Questo composto (1 μM) induce una diminuzione significativa dei livelli di fosfo-Stat5 nelle cellule Ba/F3.p210. Si lega alla tasca di legame miristica di Bcr-abl. Questo inibitore inibisce l'attività chinasica del c-Abl non miristoyilato più potentemente di quella del c-Abl miristoyilato legandosi alla tasca di legame al miristato nel lobo C del dominio chinasico. Questo agente (10 μM) richiede BCR e/o i domini SH3 e/o SH2 di c-Abl per inibire la proliferazione cellulare dipendente da BCR-Abl. Esso, ma non un analogo GNF-2 metilato, si lega al c-Abl in estratti cellulari derivati da fibroblasti 3T3. Questo composto (10 μM), in modo dose-dipendente, inibisce chiaramente la fosforilazione della tirosina di CrkII. Inibisce la fosforilazione di CrkII nelle cellule che esprimono c-AblG2A con un'IC50 di 0,051 μM. Questa sostanza chimica si lega in una conformazione estesa nella tasca del miristato con il gruppo CF3 sepolto alla stessa profondità degli ultimi due carboni del ligando miristato. Questo composto (10 µM) combinato con imatinib (1 µM) riduce il numero di cloni resistenti a 1 µM di imatinib di almeno il 90 %. Inibisce l'autofosforilazione e la proliferazione delle cellule BafF3 che esprimono p210Bcr–Abl e mutanti p210Bcr–Abl. Questo agente (8 nM) in combinazione con GNF-5 (20 nM) produce effetti additivi per quanto riguarda l'inibizione dell'attività chinasica di Abl64–515.

Protocollo (da riferimento)

Saggio della chinasi:[2]
  • Saggio di legame

    Le proteine ricombinanti (100 nM per ogni costruzione) o le proteine immunoprecipitate vengono diluite in tampone chinasico (20 mM HEPES (pH 7.4), 50 mM KCl, 0.1% CHAPS, 30 mM MgCl2, 2 mM MnCl2, 1 mM DTT e 1% glicerolo). Aliquote delle proteine diluite vengono preincubate con DMSO o questo composto per 30 min a temperatura ambiente e quindi aggiunte alle piastre di reazione K-LISA PTK EAY. La reazione chinasica viene avviata aggiungendo 0.1 mM ATP e lasciata procedere per 30 min a temperatura ambiente. La fosforilazione della GST-Abltide viene monitorata mediante SDS-PAGE e analisi di phosphorimaging o autoradiografia.
Saggio cellulare:[1]
  • Linee cellulari

    Ba/F3.p210, Ba/F3.p210E255V and Ba/F3.p185Y253H cells

  • Concentrazioni

    ~10 μM

  • Tempo di incubazione

    48 hours

  • Metodo

    Cells (0.3-0.6 × 106 per mL) are plated in duplicate or triplicate in 96-well plates containing increasing GNF-2 concentrations (5 nM–10 μM). After incubation at 37 ℃ in 5% CO2 for 48 hours, the effect of this compound on cell viability is determined by the MTT colorimetric dye reduction method. Inhibition of cell proliferation is calculated as a percentage of growth of DMSO-treated cells, and IC50 values are determined with Microsoft Excel XLfit3.

Riferimenti

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16415863/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19679652/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20072125/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20152788/

Convalida del prodotto da parte del cliente

Cell viability of K562/IR cells and their parental cell lines after exposure to different concentrations of GNF-2 for 72 h.

Dati da [ , , Oncotarget, 2017, 8(24):38717-38730 ]

Sellecks GNF-2 È stato citato da 8 Pubblicazioni

A multiplexed siRNA screen identifies key kinase signaling networks of brain glia [ Life Sci Alliance, 2023, 6(5)e202201605] PubMed: 36878638
Imatinib protects against human beta-cell death via inhibition of mitochondrial respiration and activation of AMPK [ Clin Sci (Lond), 2021, 135(19):2243-2263] PubMed: 34569605
Quantitative, Wide-Spectrum Kinase Profiling in Live Cells for Assessing the Effect of Cellular ATP on Target Engagement [Vasta JD Cell Chem Biol, 2018, 25(2):206-214] PubMed: 29174542
Abl and Arg mediate cysteine cathepsin secretion to facilitate melanoma invasion and metastasis [ Sci Signal, 2018, 11(518)eaao0422] PubMed: 29463776
Coronavirus S protein-induced fusion is blocked prior to hemifusion by Abl kinase inhibitors. [ J Gen Virol, 2018, 99(5):619-630] PubMed: 29557770
Comparative Characterization of Osteoclasts Derived From Murine Bone Marrow Macrophages and RAW 264.7 Cells Using Quantitative Proteomics. [ JBMR Plus, 2018, 2(6):328-340] PubMed: 30460336
Abl kinase regulation by BRAF/ERK and cooperation with Akt in melanoma. [ Oncogene, 2017, 36(32):4585-4596] PubMed: 28368422
Contributions of MET activation to BCR-ABL1 tyrosine kinase inhibitor resistance in chronic myeloid leukemia cells. [Tsubaki M, et al. Oncotarget, 2017, 8(24):38717-38730] PubMed: 28418880

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