In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile. * Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto. * Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)
Preparazione delle soluzioni stock
Attività biologica
Descrizione
G-749 è un nuovo e potente inibitore di FLT3 con una IC50 di 0,4 nM, 0,6 nM e 1 nM per FLT3 (WT), FLT3 (D835Y) e Mer, rispettivamente, mostrando una potenza inferiore contro altre tirosin chinasi.
Nelle cellule RS4-11 portanti FLT3-WT e nelle cellule MV4-11 e Molm-14 che ospitano FLT3-ITD, G-749 inibisce potentemente l'autofosforilazione di FLT3 con IC50 di ≤8 nM. Nelle cellule leucemiche, questo composto mostra attività antiproliferativa inducendo apoptosi. Nelle linee cellulari BaF3 che esprimono stabilmente FLT3-ITD/N676D, FLT3-ITD/F691L, FLT3-D835Y o FLT3-D835Y/N676D, mostra una forte attività inibitoria con IC50 <10 nM, e quindi supera la resistenza ai farmaci. Nei blasti di pazienti affetti da AML, questa sostanza chimica mostra anche una potente attività antileucemica.
In vivo
In topi con xenotrapianto MV4-11, G-749 (30 mg/kg p.o.) inibisce efficacemente la via FLT3 e inibisce significativamente la crescita tumorale. In un modello ortogonale di attecchimento del midollo osseo utilizzando cellule Molm-14, questo composto (20 mg/kg p.o.) inibisce anche la crescita tumorale e aumenta la sopravvivenza.
I saggi di attività sono condotti utilizzando la tecnologia di trasferimento di energia di risonanza a fluorescenza risolta nel tempo (TR-FRET) Lance Ultra di Perkin-Elmer. Brevemente, 10 ng/mL di enzima FLT3, una soluzione di G-749 diluita in serie, 80 nM di substrato del peptide ULight-poly-GT e quantità variabili di ATP (da 8,5 µM a 1088 μM) vengono miscelati in un tampone per il saggio della chinasi (50 mM HEPES pH 7,5, 10 mM MgCl2, 1 mM EGTA, 2 mM DTT e 0,01% Tween-20) e aggiunti a una piastra OptiPlate-384 a 384 pozzetti in un volume di 10 μL. Le reazioni della chinasi vengono incubate a temperatura ambiente per un massimo di 1 ora e quindi interrotte con l'aggiunta di 5 μL di EDTA 10 mM. Un volume di 5 μL dell'anticorpo anti-fosfopeptidico specifico marcato con Eu diluito in LANCE Detection Buffer viene quindi aggiunto a una concentrazione finale di 2 nM. Dopo 30 minuti di incubazione, le piastre del saggio vengono incubate a 23°C e il segnale LANCE viene misurato su un lettore multietichetta EnVision. La lunghezza d'onda di eccitazione è impostata a 320 nm e l'emissione è monitorata a 615 nm (donatore) e 665 nm (accettore). L'IC50 è calcolata utilizzando l'analisi di regressione non lineare con GradPad Prism 5.
Cells are seeded at a density of 2 ×104 cells per well and treated with the indicated concentrations of this compound for 72 hours at 37℃. The conditioned medium (CM) is prepared from HS-5 cell culture for 5 days under routine culture conditions, clarified by centrifugation, and used immediately. The CM is added to complete medium at a final concentration of 35%. In coculture experiments, 5 ×104 AML blast cells are plated in 24-well plates containing 1 ×104 HS-5 monolayers and then cultured for at least 48 hours before the exposure of inhibitors. Cell viability is determined by an ATPLite assay.
MV4-11 xenograft mouse model and Molm-14 orthogonal mouse model
Dosaggi
~30 mg/kg
Somministrazione
p.o.
Riferimenti
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24532805/
Sellecks G-749 È stato citato da 1 Pubblicazione
G-749 Promotes Receptor Tyrosine Kinase TYRO3 Degradation and Induces Apoptosis in Both Colon Cancer Cell Lines and Xenograft Mouse Models
[ Front Pharmacol, 2021, 12:730241]
POLITICA DI RESO
La politica di reso incondizionato di Selleck Chemical garantisce ai nostri clienti unesperienza di acquisto online senza problemi. Se non sei in alcun modo soddisfatto del tuo acquisto, puoi restituire qualsiasi articolo entro 7 giorni dalla ricezione. In caso di problemi di qualità del prodotto, sia relativi al protocollo che al prodotto, puoi restituire qualsiasi articolo entro 365 giorni dalla data di acquisto originale. Si prega di seguire le istruzioni seguenti per la restituzione dei prodotti.
SPEDIZIONE E CONSERVAZIONE
I prodotti Selleck vengono trasportati a temperatura ambiente. Se ricevi il prodotto a temperatura ambiente, ti assicuriamo che il Dipartimento di Ispezione Qualità di Selleck ha condotto esperimenti per verificare che la conservazione a temperatura normale per un mese non influirà sullattività biologica dei prodotti in polvere. Dopo la raccolta, conservare il prodotto secondo le indicazioni descritte nella scheda tecnica. La maggior parte dei prodotti Selleck è stabile nelle condizioni raccomandate.
NON PER USO UMANO, DIAGNOSTICO VETERINARIO O TERAPEUTICO.
