Fludarabine

Fludarabine inibisce efficacemente la proliferazione delle cellule RPMI 8226 con un IC50 di 1,54 μg/mL. L'IC50 di questo composto contro le cellule MM.1S e MM.1R è rispettivamente di 13,48 μg/mL e 33,79 μg/mL. Al contrario, le cellule U266 sono resistenti a questo agente chimico con un IC50 di 222,2 μg/mL. Il trattamento con questo composto provoca un aumento del numero di cellule nella fase G1 del ciclo cellulare, accompagnato da una concomitante riduzione delle cellule nella fase S del ciclo cellulare in modo tempo-dipendente. Induce un blocco del ciclo cellulare e innesca l'apoptosi nelle cellule MM. Innesca la scissione tempo-dipendente di caspasi-8, -9, e -3, -7, seguita dalla scissione di PARP. Aumenta l'espressione di Bax in modo tempo-dipendente, mentre l'espressione di Bak non cambia. Dopo l'esposizione a questo agente chimico per 12 ore, le cellule RPMI 8226 mostrano una perdita del potenziale di membrana con il 61,05% delle cellule che esprimono una bassa fluorescenza di rodamina 123 rispetto all'8,62% delle cellule nel controllo non trattato. [1] Per migliorare la solubilità, è formulato come monofosfato (F-ara-AMP, fudarabina), che viene istantaneamente e quantitativamente defosforilato nel nucleoside genitore dopo infusione endovenosa. All'interno delle cellule si verifica una rifosforilazione che porta al trifosfato di arabinoside di fluoroadenina (F-ara-ATP), il principale metabolita citotossico di F-ara-A. [2] Può anche indurre una stimolazione pro-infiammatoria delle cellule monocitiche, come valutato dall'aumento dell'espressione di ICAM-1 e del rilascio di IL-8. [3] Questo composto non influenza la crescita delle linee cellulari del cancro ovarico, mentre induce una marcata e dose-dipendente inibizione della proliferazione nelle linee cellulari del melanoma. [4] È un inibitore di STAT1 che riduce specificamente STAT1 senza influenzare altri membri della famiglia STAT[5]. Oltre all'accumulo citoplasmatico, il cisplatino a basse dosi ripetute (RLDC) induce l'espressione di HMGB1, che è marcatamente soppressa dal knockdown di STAT1. Coerentemente, questo composto sopprime l'espressione di HMGB1 durante il trattamento con RLDC in modo dose-dipendente nelle cellule tubulari renali trattate con RLDC[5].

I tumori trattati con PBS crescono rapidamente fino a circa 10 volte il loro volume iniziale in 25 giorni, mentre i tumori con Fludarabine a 40 mg/kg aumentano meno di 5 volte. Viene dimostrato un significativo effetto antitumorale di 40 mg/kg di questo composto sulla crescita tumorale di RPMI8226. I tumori RPMI8226 trattati con 40 mg/kg di questo agente chimico al giorno 10 aumentano i nuclei apoptotici. Questo composto è efficace nel sopprimere gli xenotrapianti di mieloma RPMI8226 nei topi SCID. [1]

• Linee cellulari

  Dexamethasone-sensitive (MM.1S) and -resistant (MM.1R) human MM cell lines, RPMI8226 and U266 cell lines

• Concentrazioni

  2 μg/mL

• Tempo di incubazione

  24 hours

• Metodo

  After treated with Fludarabine or control, dexamethasone-sensitive (MM.1S) and -resistant (MM.1R) human MM cell lines, RPMI8226 and U266 cell lines (5 × 10⁵ cells) are washed twice in phosphate-buffered saline (PBS) and fixed with 70% ice-cold ethanol, then centrifuged and suspended in PBS containing 100 μg/mL RNase A. After incubated for 30 minutes at 37 ºC, samples are resuspended in 25 μg/mL propidium iodide. Flow cytometry is performed on a FACSCalibur automated system. Apoptosis is determined by Annexin V-FITC apoptosis detection kit, according to the manufacturer's instructions. For TUNEL (terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated deoxyuridine triphosphate nick end labeling) assay, cells are analyzed by flow cytometry using the in situ cell death detection kit.

• Modelli animali

  Severe combined immunodeficient (SCID) mice bearing RPMI 8226 cells

• Dosaggi

  40 mg/kg

• Somministrazione

  Administered via i.p.