ENMD-2076 L-(+)-Tartaric acid

N. catalogoS2018 Lotto:S201801

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Dati tecnici

Formula

C25H31N7O6
Peso molecolare 525.56 Numero CAS 1291074-87-7
Solubilità (25°C)* In vitro DMSO 100 mg/mL (190.27 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
30%PEG400 0.5%Tween80 5%propylene glycol

Convalidato dai laboratori Selleck. Se sono necessarie modifiche a questa formulazione, contattare il nostro team di vendita per test personalizzati.

 30.000mg/ml (57.08mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 300 μL of 100 mg/ml clarified PEG400 stock solution to 5 μL of Tween80, mix evenly to clarify it; add 50 μL Propylene glycol to the above system, mix evenly to clarify it; then continue to add 645 μL ddH2O to adjust the volume. to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile.
* Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto.
* Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)

Preparazione delle soluzioni stock

Attività biologica

Descrizione ENMD-2076 L-(+)-Tartaric acid è l'acido tartarico di ENMD-2076, con attività selettiva contro Aurora A e Flt3 con IC50 di 14 nM e 1,86 nM, 25 volte più selettivo per Aurora A rispetto ad Aurora B e meno potente per VEGFR2/KDR e VEGFR3, FGFR1 e FGFR2 e PDGFRα. Fase 2.
Target
FLT3 RET Aurora A VEGFR3/FLT4 Src Visualizza altro
1.86 nM 10.4 nM 14 nM 15.9 nM 20.2 nM
In vitro ENMD-2076 indica attività contro multiple chinasi coinvolte nell'Angiogenesis, inclusi FLT3, RET, FLT4/VEGFR3, SRC, NTRK1, CSF1R/FMS, LCK, VEGFR2/KDR, FGFR1/2 e PDGFRα con IC50 da 1,86-120 nM. ENMD-2076 inibisce la crescita di un'ampia gamma di linee cellulari di tumori solidi umani e di tumori ematopoietici con IC50 da 0,025-0,7 μM, che induce apoptosi e arresto in fase G2/M. ENMD-2076 induce regressione o inibizione completa della crescita tumorale in modelli di xenotrapianto tumorale derivati da linee cellulari di carcinoma mammario, colon, melanoma, leucemia e mieloma multiplo. ENMD-2076 è il sale tartrato L (+) di ENMD-981693. ENMD-2076 mostra una significativa citotossicità contro le linee cellulari di mieloma (IM9, ARH-77, U266, RPMI 8226, MM.1S, MM.1R, NCI-H929) e le cellule primarie con IC50 da 2,99 a 7,06 μM, che induce apoptosi. ENMD-2076 indica una bassa citotossicità per i progenitori ematopoietici. ENMD-2076 inibisce la via della fosfoinositide 3-chinasi/Akt e regola negativamente la survivina e l'inibitore dell'apoptosi legato all'X. ENMD-2076 inibisce anche le chinasi Aurora A e B e induce l'arresto del ciclo cellulare in fase G2/M.
In vivo ENMD-2076 ha effetti inibitori sostenuti sull'attivazione di Flt3 così come di VEGFR2/KDR e FGFR1/2 nel modello di xenotrapianto HT29. ENMD-2076 potrebbe prevenire la formazione di nuovi vasi sanguigni e far regredire i vasi formati nel modello di xenotrapianto MDA-MB-231. Il trattamento orale con ENMD-2076 (50, 100, 200 mg/kg al giorno) inibisce la crescita tumorale negli xenotrapianti di plasmocitoma umano H929, con una significativa riduzione di fosfo-istone 3 (pH3), Ki-67 e Angiogenesis, e anche un significativo aumento della caspasi-3 clivata.
Caratteristiche Molecola multifunzionale: multi-bersaglio, attività antiproliferativa, pro-apoptotica e anti-angiogenica.

Protocollo (da riferimento)

Saggio della chinasi:[1]
  • Saggi chinasici

    Gli enzimi chinasici ricombinanti Aurora A e B e i kit per saggi chinasici PanVera Z'-Lyte appropriati vengono acquistati. I saggi vengono eseguiti in tampone per saggio chinasico (50 mM di HEPES, pH 7,5, 10 mM di MgCl2, 5 mM di EGTA, 0,05% Brij-35) supplementato con 2 mM di DTT. Le attività sono determinate a una concentrazione di ATP equivalente al Km apparente per ciascun enzima, e una concentrazione enzimatica che si traduce in circa il 30% di fosforilazione del substrato peptidico dopo 1 ora. Le curve dose-risposta dell'attività enzimatica relativa versus la concentrazione di ENMD-2076 vengono tracciate con Grafit e utilizzate per calcolare i valori di IC50. La potenza della base libera di ENMD-2076 contro un pannello selezionato di 100 enzimi chinasici è determinata utilizzando il servizio di profilazione chinasica SelectScreen. Le concentrazioni di ATP sono al Km apparente per ciascun enzima o 100 μM se il Km apparente non poteva essere raggiunto. La percentuale di inibizione è determinata a una concentrazione di base libera di ENMD-2076 di 1 μM; per le chinasi in cui si nota un'inibizione significativa, i valori di IC50 sono determinati generando curve dose-risposta complete a 10 punti.
Saggio cellulare:[1]
  • Linee cellulari

    Human leukemia cell lines including MV4;11, U937, Kasumi, MO7e, HL-60, TF-1, Jurkat, K562, THP-1, Hel 92.1.7; Solid tumor cell lines and HUVEC including PANC-1, HCT116, A549, HT-29, MCF7, PC-3, BXPC-3 and HUVEC

  • Concentrazioni

    ~125 μM

  • Tempo di incubazione

    48 or 96 hours

  • Metodo

    The antiproliferative effect of ENMD-2076 on adherent tumor cell lines is measured by plating 500 cells per well in a 96-well plate and incubating with ENMD-2076 for 96 hours. Cellular proliferation is measured using the sulforhodamine B assay. The leukemia-derived, nonadherent cell lines are assayed by plating 5 × 103 cells per well in a 96-well plate. The cells are incubated with ENMD-2076 for 48 hours and then survival is assayed using the Alamar Blue reagent. To measure the effect of ENMD-2076 on VEGF- and fibroblast growth factor (FGF)-induced proliferation of human umbilical vein endothelial cell (HUVEC), cells are serum starved for 6 hours, then treated with ENMD-2076 free base, and stimulated with 5 ng/mL bFGF or 25 ng/mL VEGF (R and D Systems) for 72 hours. Cell proliferation is measured using WST-
Studio sugli animali:[1]
  • Modelli animali

    Tumor models including HCT-116, HT29, CT-26, A375, MDA-MB-231, H929, OPM-2, MV4;11 and HL60 are established in CB.17 SCID or NCr nude mice.

  • Dosaggi

    ~300 mg/kg

  • Somministrazione

    Administered orally

Riferimenti

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20560971/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21177375/

Convalida del prodotto da parte del cliente

<p>Breast cancer cells line MDA-MB-231 were treated with the indicated concentrations of ENMD-2076.</p> <div> <div> </div> </div> <p> </p>

, , Dr. Zhang of Tianjin Medical University

<p>ENMD-2076 has benn tested it on two different neurobiastoma cell lines(SK-N-BE(2) and CHP-134),being calculated the IC50 by a WST-1(Roche) proliferation assay, as shown in the table below. Its in vitro activity is in the micromolar range and has a comparable effect on both lines.VX-680 was used as standard, and it proved more potent on CHP-134 cells.</p> <div> <div> </div> </div> <p> </p>

, , Dr. Antonino Maria Sparta ,University of Trento

<p>Neurospheres were obtained growing CHP-134 cells in a selective medium (DMEMF12, B27, EGF, bFGF, L-Glut). The cells were grown in 96-well plates to confluence and treated with ENMD-2076 for 24 h. The toxic effect was measured by a WST-1 chromogenic assay. It appears that the bulk cell line is more sensitive to treatment that the neurospheres.</p> <div> <div> </div> </div> <p> </p>

, , Dr. Antonino Maria Sparta ,University of Trento

<p>SDS-PAGE of CHP-134 cells extracts after 24 h exposure to the indicated drug and concentration. N-myc levels were evaluated and compared to beta actin used as house-keeping protein. Aurora A blockade seems to diminish N-myc expression or stability.</p>

, , Dr. Antonino Maria Sparta, University of Trento

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