Dynasore

Dynasore agisce come un potente inibitore delle vie endocitiche note per dipendere dalla dynamin, bloccando rapidamente la formazione di vescicole rivestite entro pochi secondi dalla sua aggiunta. Durante il trattamento con questo composto, si accumulano due tipi di intermedi di fossette rivestite: fossette a forma di U, formate a metà, e fossette a forma di O, completamente formate, catturate durante il distacco. Questa sostanza chimica, a una concentrazione di 80 μM, inibisce anche l'attività enzimatica della dynamin mitocondriale Drp1. Blocca fortemente l'assorbimento, il traffico e l'accumulo intracellulare di transferrina nelle cellule HeLa con una IC50 di ~15 μM. Impedisce anche l'endocitosi delle lipoproteine a bassa densità e della tossina colerica. Questo composto (80 μM) interferisce fortemente con la diffusione delle cellule appena piastrate e inibisce la migrazione delle cellule BSC1 di circa il 50%. [1]

Blocca completamente e reversibilmente l'endocitosi nei neuroni ippocampali coltivati dopo stimoli di potenziali d'azione sostenuti o brevi con inibizione completa a 80 μM e inibizione semimassimale a ~30 μM. In presenza di questo inibitore, la stimolazione a bassa frequenza porta a un accumulo sostenuto di sinaptopHluorina e altre proteine vescicolari sulla membrana superficiale a un tasso previsto dall'esocitosi netta, nonché a una riduzione della densità delle vescicole sinaptiche e alla presenza di strutture endocitiche solo a livello delle sinapsi. [2]

Può bloccare l'infezione delle cellule epiteliali umane HEK 293 dal papillomavirus umano di tipo 16 e dai pseudovirioni del papillomavirus bovino di tipo 1 con un'IC50 uguale di ~80 μM, che è parzialmente reversibile. [3]

• saggio dell'attività GTPasica

  L'attività GTPasica viene misurata utilizzando un saggio radioattivo basato su carbone. Le proteine dynamin, Drp1 umana alle concentrazioni indicate vengono incubate in 10 mM Tris (pH 7,2), 2 mM MgCl₂ e 20 μM GTPγP³² (2000 dpm/pmol) da sole o, quando appropriato, con nanotubi lipidici per i tempi e le temperature indicate; la concentrazione finale di NaCl è 150 mM NaCl per la condizione ad alto sale e tra 10 e 20 mM per le condizioni a basso sale a seconda della concentrazione proteica nella soluzione madre. L'idrolisi del GTP viene terminata trasferendo aliquote di 10 μL della reazione in una sospensione di 500 μL contenente carbone lavato con acido, seguita da una centrifugazione di 10 min (20000 × g, 4 ℃) e il conteggio finale del P³²O₄ liberato contenuto in 250 μL di surnatante.

• Modelli animali

  Female Sprague–Dawley rats

• Dosaggi

  1, 10, or 30 mg/kg

• Somministrazione

  i.p.