D-Luciferin Potassium Salt

N. catalogoS6580 Lotto:S658004

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Dati tecnici

Formula

C₁₁H₇KN₂O₃S₂

Peso molecolare

318.41

Numero CAS

115144-35-9

Solubilità (25°C)*

In vitro

Water

16 mg/mL (50.24 mM)

DMSO

8 mg/mL (25.12 mM)

Ethanol

Insoluble

In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)

Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Convalidato dai laboratori Selleck. Se sono necessarie modifiche a questa formulazione, contattare il nostro team di vendita per test personalizzati.	0.400mg/ml (1.26mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 8 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5% DMSO 1 95% Corn oil Convalidato dai laboratori Selleck. Se sono necessarie modifiche a questa formulazione, contattare il nostro team di vendita per test personalizzati.	0.400mg/ml (1.26mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 8 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile.
* Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto.
* Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)

Preparazione delle soluzioni stock

Attività biologica

Descrizione	La D-luciferina è il substrato naturale dell'enzima luciferasi (Luc) che catalizza la produzione della tipica luce giallo-verde delle lucciole. La chemioluminescenza a 560 nm di questa reazione raggiunge il picco entro pochi secondi, con una produzione di luce proporzionale alla concentrazione di luciferasi quando il substrato luciferina è presente in eccesso. Il gene della luciferasi (luc) è un popolare gene reporter per la ricerca e lo screening di agenti. Le tecniche chemioluminescenti sono praticamente prive di sfondo, rendendo il gene reporter luc ideale per rilevare l'espressione genica di basso livello. Oltre al suo ruolo di reporter dell'espressione genica, la luciferasi è comunemente usata in un saggio estremamente sensibile per l'ATP.
In vitro	1.Esempio di protocollo per saggi di imaging bioluminescente in vitro a) Preparare una soluzione madre di Luciferina 100 mM (100-200X) in acqua sterile. Mescolare bene. Utilizzare immediatamente, o preparare aliquote monouso, e conservare a -20℃, evitare cicli di congelamento-scongelamento, evitare l'esposizione alla luce. b) Preparare una soluzione di lavoro di D-Luciferin 0,5-1 mM in terreno di coltura tissutale preriscaldato. c) Aspirare il terreno dalle cellule coltivate. d) Aggiungere la soluzione di lavoro di Luciferina alle cellule e incubare le cellule per 5-10 minuti a 37℃ appena prima dell'imaging. 2.Esempio di protocollo per saggi di imaging bioluminescente in vivo a) Preparare una soluzione madre di Luciferina 15 mg/mL in DPBS, senza Mg2+ e Ca2+. Mescolare bene. b) Sterilizzare la soluzione per filtrazione attraverso un filtro da 0,2 μm. Utilizzare immediatamente, o preparare aliquote monouso, e conservare a -20℃, evitare cicli di congelamento-scongelamento, evitare l'esposizione alla luce. c) Iniettare la luciferina per via intra-peritoneale (i.p.) 10-15 minuti prima dell'imaging a 150 mg/kg (o 10 μL/g di soluzione madre di luciferina) del peso corporeo dell'animale. Nota: Per ogni modello animale dovrebbe essere condotto uno studio cinetico della luciferina per determinare il tempo del picco del segnale. 3.Esempio di protocollo per saggi reporter con luciferina a) Preparare una soluzione madre di Luciferina 100 mM in acqua sterile. Utilizzare immediatamente, o preparare aliquote monouso, e conservare a -20℃, evitare cicli di congelamento-scongelamento, evitare l'esposizione alla luce. b) Preparare una soluzione di lavoro di D-Luciferin 1 mM con 3 mM ATP, 1 mM DTT e 15 mM MgSO4 in tampone tricina 25 mM pH 7.8. c) Pipettare 5-10 μL di lisato cellulare in una micropiastra. Utilizzare reagente di lisi o tampone senza lisato come bianco. d) Innescare il luminometro con la soluzione di lavoro di luciferina. e) Iniettare 200 μL di soluzione di lavoro di luciferina senza ritardo e con un tempo di integrazione di 10 secondi.

Descrizione

La D-luciferina è il substrato naturale dell'enzima luciferasi (Luc) che catalizza la produzione della tipica luce giallo-verde delle lucciole. La chemioluminescenza a 560 nm di questa reazione raggiunge il picco entro pochi secondi, con una produzione di luce proporzionale alla concentrazione di luciferasi quando il substrato luciferina è presente in eccesso. Il gene della luciferasi (luc) è un popolare gene reporter per la ricerca e lo screening di agenti. Le tecniche chemioluminescenti sono praticamente prive di sfondo, rendendo il gene reporter luc ideale per rilevare l'espressione genica di basso livello. Oltre al suo ruolo di reporter dell'espressione genica, la luciferasi è comunemente usata in un saggio estremamente sensibile per l'ATP.

In vitro

1.Esempio di protocollo per saggi di imaging bioluminescente in vitro
a) Preparare una soluzione madre di Luciferina 100 mM (100-200X) in acqua sterile. Mescolare bene. Utilizzare immediatamente, o preparare aliquote monouso, e conservare a -20℃, evitare cicli di congelamento-scongelamento, evitare l'esposizione alla luce.
b) Preparare una soluzione di lavoro di D-Luciferin 0,5-1 mM in terreno di coltura tissutale preriscaldato.
c) Aspirare il terreno dalle cellule coltivate.
d) Aggiungere la soluzione di lavoro di Luciferina alle cellule e incubare le cellule per 5-10 minuti a 37℃ appena prima dell'imaging.
2.Esempio di protocollo per saggi di imaging bioluminescente in vivo
a) Preparare una soluzione madre di Luciferina 15 mg/mL in DPBS, senza Mg2+ e Ca2+. Mescolare bene.
b) Sterilizzare la soluzione per filtrazione attraverso un filtro da 0,2 μm. Utilizzare immediatamente, o preparare aliquote monouso, e conservare a -20℃, evitare cicli di congelamento-scongelamento, evitare l'esposizione alla luce.
c) Iniettare la luciferina per via intra-peritoneale (i.p.) 10-15 minuti prima dell'imaging a 150 mg/kg (o 10 μL/g di soluzione madre di luciferina) del peso corporeo dell'animale.
Nota: Per ogni modello animale dovrebbe essere condotto uno studio cinetico della luciferina per determinare il tempo del picco del segnale.
3.Esempio di protocollo per saggi reporter con luciferina
a) Preparare una soluzione madre di Luciferina 100 mM in acqua sterile. Utilizzare immediatamente, o preparare aliquote monouso, e conservare a -20℃, evitare cicli di congelamento-scongelamento, evitare l'esposizione alla luce.
b) Preparare una soluzione di lavoro di D-Luciferin 1 mM con 3 mM ATP, 1 mM DTT e 15 mM MgSO4 in tampone tricina 25 mM pH 7.8.
c) Pipettare 5-10 μL di lisato cellulare in una micropiastra. Utilizzare reagente di lisi o tampone senza lisato come bianco.
d) Innescare il luminometro con la soluzione di lavoro di luciferina.
e) Iniettare 200 μL di soluzione di lavoro di luciferina senza ritardo e con un tempo di integrazione di 10 secondi.

Protocollo (da riferimento)

Studio sugli animali:^{^[2]}	Modelli animali Female NCI Athymic nu/nu nude mice Dosaggi 3 mg/100 μL Somministrazione i.p.

Riferimenti

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25992288/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33485378/

Sellecks D-Luciferin Potassium Salt È stato citato da 4 Pubblicazioni

Carbenoxolone disodium suppresses the migration of gastric cancer by targeting HDAC6 [ Future Med Chem, 2023, 15(4):333-344]	PubMed: 36946221
A magneto-controlled biocatalytic cascade with a fluorescent output [ Org Biomol Chem, 2022, 20(9):1869-1873]	PubMed: 35156979
Leronlimab, a humanized monoclonal antibody to CCR5, blocks breast cancer cellular metastasis and enhances cell death induced by DNA damaging chemotherapy [ Breast Cancer Res, 2021, 23(1):11]	PubMed: 33485378
KDM4A-mediated histone demethylation of SLC7A11 inhibits cell ferroptosis in osteosarcoma [ Biochem Biophys Res Commun, 2021, 550:77-83]	PubMed: 33689883

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