Cyclo(-RGDfK) TFA

La costante di affinità (K_D) di Cyclo (-RGDfK-) per l'integrina purificata è di 41,70 nM.[2] Questo composto reagisce moderatamente con le cellule HEK293(β3).[3] Queste micelle modificate con questo composto mostrano una forte affinità per le cellule T-24 e un forte effetto inibitorio sulla proliferazione delle cellule T-24.[4]

In topi atimici portatori di gliomi C6 positivi per l'integrina α(v)β(3), la modificazione con Cyclo (-RGDfK-) TFA induce una minore progressione tumorale, una minore attività metabolica tumorale e un minor numero di vasi intratumorali.[5]

• Saggi di legame all'Integrin isolata.

  L'integrina purificata (1 μg/mL; 4℃) viene utilizzata per rivestire piastre per microtitolazione a 96 pozzetti, che vengono poi bloccate con albumina di siero bovino (BSA) (3% in 1 mM CaCl₂, 1 mM MgCl₂, 10 pM MnCl2, 100 mM NaC1, 50 mM tris-idrossimetil-amminometano; pH 7.4), e incubate (3 h a 30 ℃) con ligandi biotinilati (1 pg/mL in tampone di legame: 0.1% BSA, 1 mM CaCl2, 1 mM MgCl2, 10 μM MnCl2, 100 mM NaCl, 50 mM tris-idrossimetil-amminometano; pH 7.4) in presenza o assenza di peptidi diluiti in serie. Dopo il lavaggio (3×5 min con tampone di legame), il ligando biotinilato legato viene rilevato con anticorpi anti-biotina di capra coniugati con fosfatasi alcalina (1 μg/mL; 1 h, 37℃), utilizzando p-nitrofenil fosfato come cromogeno. Il legame di questo composto in assenza di un competitore è definito come il 100% del segnale; il legame ai pozzetti bloccati in assenza di integrina è definito come 0%. Le concentrazioni di questa sostanza chimica richieste per il 50% di inibizione del segnale (valori IC50) vengono stimate graficamente.