CHIR-98014

N. catalogoS2745 Lotto:S274501

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Dati tecnici

Formula

C20H17Cl2N9O2
Peso molecolare 486.31 Numero CAS 252935-94-7
Solubilità (25°C)* In vitro DMSO 32 mg/mL (65.8 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile.
* Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto.
* Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)

Preparazione delle soluzioni stock

Attività biologica

Descrizione CHIR-98014 (CT98014) è un potente inibitore di GSK-3α/β con IC50 di 0,65 nM/0,58 nM in saggi senza cellule, con la capacità di distinguere GSK-3 dai suoi omologhi più stretti Cdc2 ed ERK2.
Target
GSK-3β
(Cell-free assay)		 GSK-3α
(Cell-free assay)
0.58 nM 0.65 nM
In vitro CHIR-98014 inibisce la GSK-3β umana con Ki di 0,87 nM. Questo composto è molto efficace nel prevenire la GSK-3 murina e del ratto. Sebbene agisca come un semplice inibitore competitivo del legame dell'ATP, mostra una selettività da 500 a >1000 volte maggiore per la GSK-3 rispetto ad altre 20 proteine chinasi, inclusi Cdc2, ERK2, Tie-2 e KDR. Questo inibitore previene Cdc2 con IC50 di 3,7 μM. Tuttavia, rivela una potenza simile contro le isoforme ɑ e β altamente omologhe di GSK-3, è degno di nota che discrimina fortemente tra GSK-3 e i suoi omologhi più stretti CDC2 ed ERK2. L'esposizione di cellule CHO-IR che esprimono il recettore dell'insulina o di epatociti primari di ratto a concentrazioni crescenti di questa sostanza chimica si traduce in una stimolazione da due a tre volte del rapporto di attività GS rispetto al basale. Le concentrazioni che danno luogo a una stimolazione GS semi-massimale (EC50) sono 106 nM e 107 nM rispettivamente per CHO-IR ed epatociti di ratto.
In vivo L'inibitore di GSK-3 CHIR-98014 attiva il rapporto di attività GS nel muscolo scheletrico di tipo I isolato da ratti Zucker magri sensibili all'insulina e da ratti ZDF insulino-resistenti. Il muscolo soleo isolato da ratti ZDF mostra una resistenza significativa all'insulina per l'attivazione della GS ma ha risposto a 500 nM di questo composto nella stessa misura (aumento del 40%) del muscolo di ratti Zucker magri. In particolare, l'attivazione della GS da parte dell'insulina più questa sostanza chimica è additiva nel muscolo di ratti Zucker magri e maggiore di additiva nel muscolo dei ratti ZDF. L'attività totale della GS non è alterata né da questo inibitore né dall'insulina in queste cellule e muscoli. Nel frattempo, questo composto non influenza la risposta dose-dipendente dell'insulina nel muscolo di animali magri. La riduzione dell'iperglicemia e il miglioramento dello smaltimento del glucosio non sono limitati ai topi db/db e ai ratti ZDF, poiché risultati simili sono osservati con topi ob/ob, topi C57BL/6 diabetici indotti dalla dieta e ratti SHHF intolleranti al glucosio trattati con questa sostanza chimica. Inoltre, questo composto diminuisce la fosforilazione (Ser396) della proteina tau nella corteccia e nell'ippocampo di ratti postnatali.

Protocollo (da riferimento)

Saggio della chinasi:

[1]
  • Saggi chinasici

    Le piastre a 96 pozzetti in polipropilene sono riempite con 300 μL/pozzetto di tampone (50 mM Tris HCl, 10 mM MgCl2, 1 mM EGTA, 1 mM ditiotreitolo, 25 mM β-glicerofosfato, 1 mM NaF, 0,01% BSA, pH 7,5) contenente chinasi, substrato peptidico e qualsiasi attivatore. CHIR-98014 o i controlli vengono aggiunti in 3,5 μL di DMSO, seguiti da 50 μL di ATP stock per ottenere una concentrazione finale di 1 μM di ATP in tutti i saggi senza cellule. Dopo l'incubazione, aliquote triplicate da 100 μL vengono trasferite in piastre Combiplate otto contenenti 100 μL/pozzetto di 50 μM di ATP e 20 mM di EDTA. Dopo 1 ora, i pozzetti vengono risciacquati cinque volte con PBS, riempiti con 200 μL di liquido di scintillazione, sigillati, lasciati per 30 minuti e contati in un contatore a scintillazione. Tutti i passaggi vengono eseguiti a temperatura ambiente.
Saggio cellulare:

[1]
  • Linee cellulari

    CHO-IR cells

  • Concentrazioni

    0.01-10 μM

  • Tempo di incubazione

    30 min

  • Metodo

    CHO-IR cells expressing human insulin receptor are grown to 80% confluence in Hamm’s F12 medium with 10% fetal bovine serum and without hypoxanthine. Trypsinized cells are seeded in 6-well plates at 1 × 106 cells/well in 2 mL of medium without fetal bovine serum. After 24 hours, medium is replaced with 1 mL of serum-free medium containing GSK-3 inhibitor CHIR 98014 or control (final DMSO concentration 0.1%) for 30 min at 37 °C. Cells are lysed by freeze/thaw in 50 mM tris (pH 7.8) containing 1 mM EDTA, 1 mM DTT, 100 mM NaF, 1 mM phenylmethylsulfonyl fluoride, and 25 μg/mL leupeptin (buffer A) and centrifuged 15 min at 4 °C/14000 g. The activity ratio of GS is calculated as the GS activity in the absence of glucose-6-phosphate divided by the activity in the presence of 5 mM glucose-6-phosphate.
Studio sugli animali:

[1]
  • Modelli animali

    db/db mice with 8-9 weeks

  • Dosaggi

    30 mg/kg

  • Somministrazione

    Subcutaneously

Riferimenti

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12606497/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17906685/

Convalida del prodotto da parte del cliente

<p>Differentiation of hESCs along the vascular. (B) FACS analysis showing the percentage of cells expressing CD34, PDGFRa, and KDR after 4 days of differentiation using our differentiation protocol in H9 hESC line. Similarly, an analysis was provided for the H1 hESC line using the same protocol but with CHIR98014 as the GSKi.</p>

Dati da [ Stem Cells Dev , 2013 , 22, 1893-90 ]

<p> </p><div>T (Brachyury) and b-catenin expression in hESCs after GSKi treatment. (C) Immunofluorescence analysis of OCT4 and brachyury in hESCs after 24 h of GSKi treatment. Top row: H1-hESCs treated with basal media alone without any GSKi, middle row: H9 hESCs treated with CHIR99021, bottom row: H1-hESCs treated with 2 mM CHIR98014. (D) 20 · magnification of bcatenin expression in H1-hESCs after 24 h of GSKi treatment. Top row: hESCs treated with basal media alone without any</div><div>GSKi, middle row: hESCs treated with CHIR99021, bottom row: hESCs treated with CHIR98014. All scale bars represent 200 mm.</div>

Dati da [ Stem Cells Dev , 2013 , 22, 1893-90 ]

<p>T (Brachyury) and b-catenin expression in hESCs after GSKi treatment. (B) Comparison of transcription profiles for T and CXCR4 in hESCs treated using CHIR99021 at 5mM and a different GSKi, CHIR98014 at 2mM. Although gene expression levels were different, the transcription profiles for both genes were approximately similar for both GSKis with T upregulating and peaking at day 1, while CXCR4 begins up-regulating at day 2.</p>

Dati da [ Stem Cells Dev , 2013 , 22, 1893-90 ]

<p>Western blotting (D) in U937 cells following 16-hour exposure to BEZ235/ABT-737 (0.5 μmol/L each) in the presence or absence of BIO, MeBIO, or CHIR-98014 (2 μmol/L each).</p>

, , Cancer Res, 2013, 73(4):1340-51.

Sellecks CHIR-98014 È stato citato da 58 Pubblicazioni

Sulforaphane-cysteine inhibits α-tubulin/PD-L1/PFKFB4 axis leading to apoptosis in human glioblastoma [ Med Oncol, 2025, 42(8):333] PubMed: 40659958
Generation of an induced pluripotent stem cell line from a malignant melanoma patient who developed the immune checkpoint inhibitor-related myasthenia gravis, myositis, and myocarditis overlap syndrome [ Stem Cell Res, 2025, 87:103797] PubMed: 40795579
Pantethine ameliorates dilated cardiomyopathy features in PPCS deficiency disorder in patients and cell line models [ Commun Med (Lond), 2025, 5(1):323] PubMed: 40745475
Nociceptor-immune interactomes reveal insult-specific immune signatures of pain [ Nat Immunol, 2024, 25(7):1296-1305] PubMed: 38806708
RNA m6A modification regulates L1 retrotransposons in human spermatogonial stem cell differentiation in vitro and in vivo [ Cell Mol Life Sci, 2024, 81(1):92] PubMed: 38363375
Identification of novel neuroprotectants against vincristine-induced neurotoxicity in iPSC-derived neurons [ Cell Mol Life Sci, 2024, 81(1):315] PubMed: 39066803
PIM1 drives lipid droplet accumulation to promote proliferation and survival in prostate cancer [ Oncogene, 2024, 43(6):406-419] PubMed: 38097734
Enhancing Maturation and Translatability of Human Pluripotent Stem Cell-Derived Cardiomyocytes through a Novel Medium Containing Acetyl-CoA Carboxylase 2 Inhibitor [ Cells, 2024, 13(16)1339] PubMed: 39195229
Inhibition of DNMT3B expression in activated hepatic stellate cells overcomes chemoresistance in the tumor microenvironment of hepatocellular carcinoma [ Sci Rep, 2024, 14(1):115] PubMed: 38168140
Characterization of the BH1406 non-small cell lung cancer (NSCLC) cell line carrying an activating SOS1 mutation [ Transl Lung Cancer Res, 2024, 13(11):2987-2997] PubMed: 39670010

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