CD163L1 Antibody [C10D1]

N. catalogo F3595

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Descrizione biologica

Specificità CD163L1 Antibody [C10D1] rileva i livelli endogeni della proteina CD163L1 totale.
Contesto CD163L1, noto anche come CD163 molecule-like 1 o M160, è una proteina di membrana di tipo I della superfamiglia dei recettori scavenger ricchi di cisteina (SRCR) del gruppo B che presenta più domini SRCR (tipicamente 9-12), un singolo segmento transmembrana e una coda citoplasmatica che media l'endocitosi tramite una via clatrina-dipendente indipendente dal cross-linking del ligando. Derivante da una tarda duplicazione evolutiva del gene CD163, CD163L1 è altamente espresso su specifici sottotipi di macrofagi tissutali (spesso colocalizzando con CD163), ma è minimamente presente o assente nei monociti, nei macrofagi alveolari, nella glia e nelle cellule di Kupffer; due varianti di splicing citoplasmatiche influenzano ulteriormente la sua localizzazione subcellulare. CD163L1 funge da recettore scavenger endocitico che probabilmente lega ligandi ancora non identificati per mediare la clearance e promuovere la risoluzione dell'infiammazione attraverso la segnalazione antinfiammatoria e il mantenimento dell'omeostasi tissutale, differenziandolo da CD163, che elimina specificamente i complessi emoglobina-aptoglobina. CD163L1 non mostra affinità per emoglobina-aptoglobina o batteri testati e non forma complessi proteici noti. La sua espressione regolata durante la differenziazione da monociti a macrofagi supporta la modulazione immunitaria innata, con rilevanza per malattie infiammatorie come l'aterosclerosi, potenzialmente attraverso la clearance degli ossidanti simile a CD163, e in contesti autoimmuni smorzando le risposte immunitarie eccessive.

Informazioni sullutilizzo

Applicazione IHC Diluizione
IHC
1:2000
Reattività Human
Fonte Rabbit Monoclonal Antibody MW
Tampone di conservazione PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
Conservazione
(Dalla data di ricevimento)		 -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years
IHC
Experimental Protocol：
 
Deparaffinization/Rehydration
1. Deparaffinize/hydrate sections:
2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each.
3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each.
4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each.
5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each.
6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min.
 
Staining
1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each.
2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min.
3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.
4. Wash sections in wash buffer for 5 min.
5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature.
6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C.
7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each.
8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature.
9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each.
10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use.
11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity.
12. Immerse slides in dH2O.
13. If desired, counterstain sections with hematoxylin.
14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.
15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each.
16. Mount sections with coverslips and mounting medium.
 

Riferimenti

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22900885/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22279103/

Dati di applicazione