CCT007093

N. catalogoS7485 Lotto:S748501

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Dati tecnici

Formula

C15H12OS2
Peso molecolare 272.39 Numero CAS 176957-55-4
Solubilità (25°C)* In vitro DMSO 2.5 mg/mL (9.17 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO Corn oil

Convalidato dai laboratori Selleck. Se sono necessarie modifiche a questa formulazione, contattare il nostro team di vendita per test personalizzati.

 1.000mg/ml (3.67mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 20 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile.
* Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto.
* Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)

Preparazione delle soluzioni stock

Attività biologica

Descrizione CCT007093 è un potente inibitore di PPM1D (WIP1) con IC50 di 8,4 μM.
Target
PPM1D
8.4 μM
In vitro CCT007093 inibisce selettivamente e potentemente le linee cellulari tumorali umane (MCF-7, KPL-1 e MCF-3B) che sovraesprimono PPM1D. Questo composto induce la morte cellulare tramite l'attivazione dell'attività della p38 chinasi. In combinazione con il paclitaxel, provoca un'inibizione sinergica delle quattro linee cellulari di cancro al seno triplo negativo (TNBC) resistenti al paclitaxel. Questa sostanza chimica promuove selettivamente l'apoptosi nelle cellule di cancro al seno e nei cheratinociti cutanei trasformati che esprimono ectopicamente Wip1, mentre attenua la risposta apoptotica mediata dai raggi UV sia nei cheratinociti cutanei che in un modello cellulare nullo per Wip1.

Protocollo (da riferimento)

Saggio della chinasi:[1]
  • Saggio di phosphatase in vitro

    PPM1D ricombinante (20-50 pmol) viene diluito in tampone Tris (50 mM, pH 8), NaCl (100 mM), β-mercaptoetanolo (1 mM) o DTT (1 mM) e trattato con MnCl2 (0, 1, 10 e 20 mM) o MgCl2 (0 e 40 mM). Se appropriato, vengono aggiunti inibitori di PPM1D (10-50 μM) e la miscela del saggio viene incubata per 30 minuti a temperatura ambiente. Viene quindi aggiunto fosfo-P38 ricombinante (200 pmol) e la miscela incubata a 37°C per 1 ora. La reazione viene bloccata mediante l'aggiunta di eccesso di acido etilendiamminotetraacetico (EDTA), tampone di caricamento del campione con sodio dodecil solfato e bollitura per 5 minuti a 95°C, seguita da elettroforesi su gel e Western blotting.
Saggio cellulare:[1]
  • Linee cellulari

    MCF-7, KPL-1, and MCF-3B cells

  • Concentrazioni

    ~50 μM

  • Tempo di incubazione

    14 days

  • Metodo

    Cells are transfected with a pSUPER plasmid and an additional plasmid expressing the blasticidin resistance gene (pEFBsd) in a molar ratio of 10:1. Cells are plated in 10 cm plates 24 h after transfection. Blasticidin selection (5 μg/ml) is initiated 48 h post-transfection and replenished every 3 days. Colonies are fixed in methanol and stained with crystal violet after 14 days. Colonies are quantified on a Colcount and the surviving fraction (SF) determined.

Riferimenti

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17700519/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20576088/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24126074/

Convalida del prodotto da parte del cliente

(A-B)Twenty-four hours after plating 1×105 shh-EGFP cells, media was changed to serum-free media containing vehicle (Vh), DMSO, CCT007093 (CCT, 5µM), and/or Shh (3µg/mL). Cells were also transduced with LentiORF-RFP-CTRL or LentiORF-YFP-WIP1 lentivirus. 48 hours later, cells were fixed in 4% paraformaldehyde, permeabilized, incubated with α-WIP1 or α-Ki-67 antibody, and mounted using media containing DAPI (left-hand panels). Quantification of cells, per high power field (HPF), that express green fluorescent protein (GFP) or Ki-67 (right-hand panels). Bars, mean of cell counts from 10 representative fields for each experimental condition.

Dati da [ , , Oncogene, 2016, 35(42):5552-5564. ]

Sellecks CCT007093 È stato citato da 1 Pubblicazione

WIP1 modulates responsiveness to Sonic Hedgehog signaling in neuronal precursor cells and medulloblastoma [Wen J, et al. Oncogene, 2016, 35(42):5552-5564] PubMed: 27086929

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