GSK-3 Inhibitor IX (BIO)

N. catalogoS7198 Lotto:S719802

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Dati tecnici

Formula

C16H10BrN3O2
Peso molecolare 356.17 Numero CAS 667463-62-9
Solubilità (25°C)* In vitro DMSO 71 mg/mL (199.34 mM)
Ethanol 7 mg/mL (19.65 mM)
Water Insoluble
In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile.
* Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto.
* Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)

Preparazione delle soluzioni stock

Attività biologica

Descrizione BIO (GSK-3 Inhibitor IX, 6-bromoindirubin-3-oxime, 6-Bromoindirubin-3'-oxime, MLS 2052) è un inibitore specifico di GSK-3 con un IC50 di 5 nM per GSK-3α/β in un saggio privo di cellule, mostra una selettività >16 volte superiore a CDK5, ed è anche un inibitore pan-JAK con un IC50 di 30 nM per Tyk2. BIO induce l'apoptosi nelle cellule di melanoma umano.
Target
GSK-3
(Cell-free assay)		 TYK2
(Cell-free assay)		 CDK5/p35
(Cell-free assay)		 CDK2/CyclinA
(Cell-free assay)		 CDK1/CyclinB
(Cell-free assay)		 Visualizza altro
5 nM 30 nM 0.08 μM 0.30 μM 0.32 μM
In vitro BIO (6-bromoindirubin-3'-oxime) è un inibitore specifico della glicogeno sintasi chinasi-3 (GSK-3), con IC50 di 5 nM per GSK-3α/β, e mostra una selettività >16 volte superiore rispetto a CDK5. Questo composto interagisce all'interno della tasca di legame dell'ATP di queste chinasi, riduce la fosforilazione della β-catenina su un sito specifico di GSK-3 in modelli cellulari, imita strettamente la segnalazione Wnt negli embrioni di Xenopus. Nelle cellule staminali embrionali umane e di topo, questa sostanza chimica mantiene il fenotipo indifferenziato e sostiene l'espressione dei fattori di trascrizione specifici dello stato pluripotente Oct-3/4, Rex-1 e Nanog. Questa attivazione di Wnt mediata dal composto è funzionalmente reversibile, poiché la sospensione del composto porta a normali programmi di multidifferenziazione sia nelle cellule staminali embrionali umane che di topo. Promuove la proliferazione nei cardiomiociti di mammiferi. 6BIO è anche un inibitore pan-JAK, con valori di IC50 di 0,03, 1,5, 8,0, 0,5 μM per TYK2, JAK1, JAK2 e JAK3. Questo composto inibisce selettivamente la fosforilazione di STAT3 e induce l'apoptosi delle cellule di melanoma umano.
In vivo BIO sopprime la crescita del tumore del melanoma in un modello di xenotrapianto murino.
Caratteristiche Il primo agente farmacologico dimostrato in grado di mantenere l'auto-rinnovamento nelle cellule staminali embrionali umane e di topo.

Protocollo (da riferimento)

Saggio della chinasi:[1]
  • Saggio chinasi

    Le attività chinasiche vengono saggiate in tampone A o C a 30°C, a una concentrazione finale di ATP di 15 μM. I valori del bianco vengono sottratti e le attività calcolate come pmoli di fosfato incorporato durante un'incubazione di 10 min. I controlli vengono eseguiti con diluizioni appropriate di dimetilsolfossido. In alcuni casi la fosforilazione del substrato viene valutata mediante autoradiografia dopo SDS-PAGE. La GSK-3α/β viene purificata da cervello suino mediante cromatografia di affinità su assina immobilizzata. Viene saggiata, dopo una diluizione 1/100 in 1 mg BSA/ml 10 mM DTT, con 5 μl di 40 μM di peptide GS-1, un substrato specifico di GSK-3, (YRRAAVPPSPSLSRHSSPHQSpEDEEE), in tampone A, in presenza di 15 μM [γ-32P] ATP (3.000 Ci/mmol; 1 mCi/ml) in un volume finale di 30 μl. Dopo 30 min di incubazione a 30°C, aliquote da 25 μl di surnatante vengono applicate su pezzi di carta fosfocellulosa Whatman P81 di 2,5 × 3 cm, e 20 secondi dopo, i filtri vengono lavati cinque volte (per almeno 5 min ogni volta) in una soluzione di 10 ml di acido fosforico/litro di acqua. I filtri umidi vengono contati in presenza di 1 ml di liquido scintillatore ACS.
Saggio cellulare:[1]
  • Linee cellulari

    COS1, Hepa or SH-SY5Y cells

  • Concentrazioni

    ~10 μM

  • Tempo di incubazione

    12 or 24 h

  • Metodo

    COS1, Hepa (wild-type, CEM/LM AhR deficient and ELB1 ARNT deficient), or SH-SY5Y cells are grown in 6 cm culture dishes in Dulbecco's Modified Medium (DMEM) containing 10% fetal bovine serum. For treatment, IO (5 μM), BIO (5 or 10 μM), MeBIO (5 or 50 μM), LiCl (20 or 40 mM), or mock solution (DMSO, 0.5% final concentration) is added to medium when cell density reaches ∼70% confluence. After 12 (SH-SY5Y) or 24 hours, the cells, while still in plate, are lysed with lysis buffer (1% SDS, 1 mM sodium orthovanadate, 10 mM Tris [pH 7.4]). The lysate is passed several times through a 26G needle, centrifuged at 10,000 × g for 5 min, and adjusted to equal protein concentration. About 8 μg of each sample is loaded for immunoblotting. Enhanced chemiluminescence is used for detection. The following primary antibodies are used: mouse anti-β-catenin CT (Upstate Biotechnolgies, Clone 7D8, recognizes total β-catenin), mouse anti-phospho-β-catenin (Upstate Biotechnologies, Clone 8E7, recognizes dephosphorylated β-catenin), mouse anti-GSK-3 β, mouse anti-GSK-3 phosphoTyr216, rabbit anti-AhR (Aryl hydrocarbon receptor), and rabbit anti-actin.
Studio sugli animali:[4]
  • Modelli animali

    mouse

  • Dosaggi

    50 mg/kg

  • Somministrazione

    Oral gavage

Riferimenti

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14700633/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14702635/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16984885/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21610112/

Convalida del prodotto da parte del cliente

Lysates of HCT116p53KO cells were harvested 24 hs after treatment with different GSK3 inhibitors and GSK3A/B activation/inactivation checked by western blot: a mix of pSer21-GSK3A and pSer9-GSK3B antibodies and antibody cross-reacting with both pTyr279-GSK3A and pTyr216-GSK3B were used to assess the specificity of the inhibitor for GSK3A. BIO: 6-bromoindirubin-3

Dati da [ PLoS One , 2014 , 9(7), e100947 ]

(e and f) Confocal immunofluorescence staining. U87 GSLCs and U251 GSLCs were seeded in suspension and treated with control, Tet, BIO or ICG-001 for 48 h. Blue fluorescence represents DAPI, red fluorescence represents β-catenin, and green fluorescence represents TUNEL. Scale bars, 40 μm

Dati da [ , , Int J Oncol, 2017, 50(1):101-110 ]

Sellecks GSK-3 Inhibitor IX (BIO) È stato citato da 40 Pubblicazioni

ARHGAP12 and ARHGAP29 exert distinct regulatory effects on switching between two cell morphological states through GSK-3 activity [ Cell Rep, 2025, 44(3):115361] PubMed: 40053455
Interplay of SHH, WNT and BMP4 signaling regulates the development of the lamina propria in the murine ureter [ Development, 2025, 152(3)DEV204214] PubMed: 39817691
Matrix Stiffness Regulates Mechanotransduction and Vascular Network Formation of hiPSC-Derived Endothelial Progenitors Encapsulated in 3D Hydrogels [ bioRxiv, 2025, 2025.04.11.648340] PubMed: 40291699
Donor Age Impairs Vasculogenic Potential of hiPSC-Derived Endothelial Progenitors [ bioRxiv, 2025, 2025.06.24.661422] PubMed: 40667338
Extraembryonic mesoderm cells derived from human embryonic stem cells rely on Wnt pathway activation [ Cell Prolif, 2024, 10.1111/cpr.13761] PubMed: 39385268
CDKAL1 Drives the Maintenance of Cancer Stem-Like Cells by Assembling the eIF4F Translation Initiation Complex [ Adv Sci (Weinh), 2023, 10(12):e2206542] PubMed: 36786012
Upregulation of β-catenin signaling represents a single common pathway leading to the various phenotypes of spinal degeneration and pain [ Bone Res, 2023, 11(1):18] PubMed: 37059724
Epithelial cell adhesion molecule (EpCAM) regulates HGFR signaling to promote colon cancer progression and metastasis [ J Transl Med, 2023, 21(1):530] PubMed: 37543570
MEK inhibition overcomes chemoimmunotherapy resistance by inducing CXCL10 in cancer cells [ Cancer Cell, 2022, S1535-6108(21)00662-0] PubMed: 35051357
Neddylation is essential for β-catenin degradation in Wnt signaling pathway [ Cell Rep, 2022, 38(12):110538] PubMed: 35320710

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