In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO
40%PEG300
5%Tween80
50%ddH2O
Convalidato dai laboratori Selleck. Se sono necessarie modifiche a questa formulazione, contattare il nostro team di vendita per test personalizzati.
0.100mg/ml
(0.25mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 2 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution
5% DMSO
95% Corn oil
Convalidato dai laboratori Selleck. Se sono necessarie modifiche a questa formulazione, contattare il nostro team di vendita per test personalizzati.
0.100mg/ml
(0.25mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 2 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile. * Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto. * Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)
Preparazione delle soluzioni stock
Attività biologica
Descrizione
BAM 7 è un attivatore diretto e selettivo della proteina proapoptotica Bax con un EC50 di 3,3 μM.
Target
Bax
3.3 μM
In vitro
BAM7 si lega direttamente al solco di legame BH3 precedentemente non caratterizzato sulla faccia N-terminale di BAX. Questo composto è selettivo per il solco di legame BH3 sulla faccia N-terminale di BAX. Interagisce direttamente con BAX sulla stessa superficie utilizzata dall'elica BIM BH3 per innescare l'attivazione di BAX. Questa sostanza chimica porta a un'attivazione funzionale di BAX. Innesca la conversione di BAX da monomero a oligomero in modo dose- e tempo-dipendente, la cui cinetica si avvicina alla saturazione con un rapporto di dosaggio BAX:BAM7 di 1:8. Questo composto innesca in vitro l'oligomerizzazione di BAX, la formazione di pori mediata da BAX e la morte cellulare BAX-dipendente. Induce selettivamente l'Apoptosis mediata da BAX innescando le caratteristiche distintive dell'attivazione intracellulare di BAX. Questa sostanza chimica uccide solo la linea cellulare che contiene BAX, elicitando le caratteristiche biochimiche e morfologiche dell'Apoptosis mediata da BAX.
Caratteristiche
Non interagisce con la tasca di legame BH3 delle proteine antiapoptotiche o con BAK proapoptotico e induce la morte cellulare in modo BAX-dipendente.
Saggi di legame con polarizzazione di fluorescenza
Le curve di legame diretto vengono generate per la prima volta incubando FITC-BIM SAHB (50 nM) con diluizioni seriali di BAX a lunghezza intera, BCL-XLΔC, MCL-1ΔNΔC, BFL-1/A1ΔC o BAKΔC e la polarizzazione della fluorescenza misurata a 20 minuti su un lettore di micropiastre SpectraMax M5. Per i saggi di competizione, una diluizione seriale di questo composto o di BIM SAHB acetilato (Ac-BIM SAHB) viene combinata con FITC-BIM SAHB (50 nM), seguita dall'aggiunta di proteina ricombinante a una concentrazione di ~EC75, come determinato dal saggio di legame diretto (BAX, BAKΔC: 500 nM; BCL-XLΔC, MCL-1ΔNΔC, BFL-1/A1ΔC: 200 nM). La polarizzazione della fluorescenza viene misurata a 20 minuti e i valori di IC50 calcolati mediante analisi di regressione non lineare delle curve di legame competitivo utilizzando il software Prism.
MEFs (2.5 × 103 cells per well) are seeded in 96-well opaque plates for 18-24 h and then incubated with serial dilutions of BAM7, ANA-BAM16 or vehicle (0.15% (v/v) DMSO) in DMEM at 37 °C in a final volume of 100 μL. Cell viability is assayed at 24 h by addition of CellTiter-Glo reagent according to the manufacturer’s protocol, and luminescence is measured using a SpectraMax M5 microplate reader. Viability assays are performed in at least triplicate, and the data are normalized to vehicle-treated control wells.
Riferimenti
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22634637/
Sellecks BAM7 È stato citato da 3 Pubblicazioni
Small-molecule allosteric inhibitors of BAX.
[ Nat Chem Biol, 2019, 15(4):322-330]
Drug manipulation of pro-and anti-apoptotic Bcl-2 proteins in the regulation of Parkin-mediated mitophagy in human breast cancer cells
[ Baltimore, Maryland , 2018, ]
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