Apoptosis Activator 2

N. catalogoS2927 Lotto:S292701

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Dati tecnici

Formula

C15H9Cl2NO2

Peso molecolare 306.14 Numero CAS 79183-19-0
Solubilità (25°C)* In vitro DMSO 61 mg/mL (199.25 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile.
* Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto.
* Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)

Preparazione delle soluzioni stock

Attività biologica

Descrizione Apoptosis Activator 2 induce fortemente l'attivazione della caspase-3, la scissione di PARP e la frammentazione del DNA, portando alla distruzione delle cellule (Apaf-1 dipendente) con un IC50 di ~4 μM, inattivo per le cellule HMEC, PREC o MCF-10A.
Target
Caspase-3
In vitro Apoptosis Activator 2 (20 μM) a concentrazione ridotta di citocromo c aumenta la frazione di Apaf-1 nell'apoptosoma di 1,5 volte, raggiungendo il 33%. Questo composto aumenta l'entità dell'attivazione della caspase-3 a un livello ridotto di citocromo c e l'attivazione della caspase-3 di 4 volte. Induce fortemente l'attivazione della caspase-3, la scissione di PARP e la frammentazione del DNA, uccidendo infine le cellule con un IC50 di 4 μM. Questo attivatore induce Apoptosis di PBL, HUVEC, Jurkat, Molt-4, CCRF-CEM, BT-549, MDA-MB-468 e NCI-H23 con un IC50 di 50 μM, 43 μM, 4 μM, 6 μM, 9 μM, 20 μM, 44 μM e 35 μM. Esercita un effetto citostatico sulla maggior parte delle linee cellulari tumorali testate, inibendo la crescita cellulare del 50-100% a 10 μM in 40 delle 48 linee cellulari testate. Questa sostanza chimica induce la morte cellulare innescando la formazione di apoptosomi. Il livello di espressione di En1 non ha un'influenza significativa sui tassi di sopravvivenza delle colture di mesencefalo ventrale per questo composto (-8,1 ± 6,0%). Il tasso di sopravvivenza non è significativamente alterato se gli altri tre reagenti sono impiegati (-10,7 ± 4,7%) per questo attivatore. Questo composto (10 μM) induce Apoptosis nelle cellule AGS come valutato tramite scala di DNA apoptotico e test di Tunel. Esso (10 μM) aumenta l'induzione di Apoptosis da parte di liposomi coniugati anti-TROP2. Cicloesamide (10 μg/mL) o zVAD (50 μM) protegge significativamente contro la tossicità di questa sostanza chimica nelle colture neuronali. Questo attivatore (3 μM) provoca numerosi neuroni con nuclei picnotici suggestivi di morte cellulare che coinvolge Apoptosis. DHT (10 nM) o E2 (10 nM) protegge significativamente contro la tossicità di questo composto nelle colture neuronali.

Protocollo (da riferimento)

Saggio della chinasi:[1]
  • Saggio di Apoptosis senza cellule

    Gli estratti citoplasmatici di cellule HeLa vengono preparati secondo report precedentemente pubblicati. Apoptosis Activator 2 in DMSO viene distribuito in piastre per microtitolazione a 96 pozzetti a una concentrazione finale di 1 mM (la concentrazione finale di DMSO è dell'1% v/v). A ciascun pozzetto vengono aggiunti 250 μg di proteine totali da estratti citoplasmatici in tampone HEB (50 mM Hepes, pH 7,4/50 mM KCl/5 mM EGTA/2 mM MgCl), con 2 mM DTT, 2 μM citocromo c e 0,5 μM di substrato DEVD-AFC (Asp-Glu-Val-Asp-7-amino-4-trifluorometilcumarina) per un totale di 150 μL. Le piastre vengono incubate a 37 ℃ e la fluorescenza viene letta con un lettore di piastre LJL Biosystems a intervalli di 10 minuti.

Saggio cellulare:[4]
  • Linee cellulari

    Neurones

  • Concentrazioni

    ~3 μM

  • Tempo di incubazione

    2 hours

  • Metodo

    All viable cells within the defined field of a microscope reticle grid are counted using a manual mechanical counter by an experimenter blinded to condition. Cells are scored viable on the basis of both positive staining with the vital dye calcein acetoxymethyl ester and the morphological criterion of a smooth, spherical soma. Counts of viable cells are made in four non-overlapping fields per culture well with each condition represented by 3 separate wells. The number of viable cells counts per well for vehicle-treated control conditions ranged from 100-200. All experiments are repeated in at least 3 independent culture preparations. Raw cell count data are statistically analyzed with one-way ANOVA, followed by between group comparisons using the Fisher LSD test (significance indicated by P < 0.05). Cell viability is presented graphically as a percentage of live cells in the vehicle-treated control condition.

Riferimenti

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12808146/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19291307/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23181231/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20561156/

Sellecks Apoptosis Activator 2 È stato citato da 5 Pubblicazioni

ARNTL2 upregulation of ACOT7 promotes NSCLC cell proliferation through inhibition of apoptosis and ferroptosis [ BMC Mol Cell Biol, 2023, 24(1):14] PubMed: 37003979
Melatonin Alleviates Hypoxia-Induced Apoptosis of Granulosa Cells by Reducing ROS and Activating MTNR1B-PKA-Caspase8/9 Pathway [ Antioxidants (Basel), 2021, 10(2)184] PubMed: 33525391
The Crosstalk between Autophagy and Apoptosis Is Necessary for Myogenic Differentiation [ J Agric Food Chem, 2021, 69(13):3942-3951] PubMed: 33755473
Berberine-induced TFEB deacetylation by SIRT1 promotes autophagy in peritoneal macrophages [ Aging (Albany NY), 2021, 13(5):7096-7119] PubMed: 33639613
Upregulation of caspase-3 by High Glucose in Chondrocyte Involves the Cytoskeleton Aggregation [ Eur Rev Med Pharmacol Sci, 2020, 24(11):5925-5932] PubMed: 32572905

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