Anisomycin (Flagecidin)

N. catalogoS7409 Lotto:S740907

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Dati tecnici

Formula

C14H19NO4
Peso molecolare 265.3 Numero CAS 22862-76-6
Solubilità (25°C)* In vitro DMSO 53 mg/mL (199.77 mM)
Ethanol 53 mg/mL (199.77 mM)
Water Insoluble
In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile.
* Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto.
* Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)

Preparazione delle soluzioni stock

Attività biologica

Descrizione L'anisomicina (Flagecidin, Wuningmeisu C) è un antibiotico batterico isolato da Streptomyces griseolus, che inibisce la sintesi proteica e agisce anche come attivatore di JNK. L'anisomicina sovraregola l'autophagy e aumenta l'apoptosis.
Target
JNK
In vitro L'anisomicina (3 μM) diminuisce la sintesi proteica nelle cellule MDA16 e MDA-MB-468 e riduce la formazione di colonie da parte delle cellule MDA-MB-468. Questo composto provoca un aumento del numero di cellule apoptotiche nelle colture MDA-MB-468, ma non nelle colture MDA16. Attiva la fosforilazione di JNK nelle cellule MDA-MB-468. Nelle cellule U251 e U87, questa sostanza chimica (0,01-8 μM) inibisce la crescita cellulare in modo dipendente dal tempo e dalla concentrazione con valori IC50 (48 h) di 0,233 e 0,192 μmol/L, rispettivamente. Essa (4 μM) causa il 21,5% e il 25,3% di apoptosi nelle cellule U251 e U87, rispettivamente, e attiva p38 MAPK e JNK, mentre inattiva ERK1/2. Questo composto (4 μM) riduce il livello della subunità PP2A/C in modo tempo-dipendente nelle cellule U251 e U87. Inibisce la proliferazione delle cellule EAC in modo dipendente dalla concentrazione.
In vivo La somministrazione peritumorale di anisomicina (5 mg/kg) sopprime significativamente la crescita del carcinoma ascite di Ehrlich (EAC) con una sopravvivenza di circa il 60% dei topi 90 giorni dopo l'inoculazione dell'EAC.

Protocollo (da riferimento)

Saggio della chinasi:[2]
  • Fosforilazione di JNK

    500.000 cellule/pozzetto vengono seminate in piastre a 6 pozzetti e incubate per una notte. Le cellule vengono quindi incubate per 1 ora con i composti testati o DMSO come controllo veicolo (concentrazione finale 1% v/v). Viene aggiunta puromicina (concentrazione finale di 18 μM) e le cellule vengono incubate per altri 10 minuti per etichettare le catene polipeptidiche nascenti. L'etichettatura di fondo viene determinata incubando le cellule senza puromicina. Le cellule vengono quindi lavate in HBSS, raccolte per raschiatura e centrifugate (300 g, 5 min). Le cellule vengono risospese in 0,5 mL di DTT 50 mM contenente inibitori della fosfatasi e incubate a 95°C per 10 min. I campioni vengono quindi congelati rapidamente in azoto liquido e conservati a -20°C fino al blot. I campioni (20-30 μg di proteina/campione) vengono trasferiti su una membrana PVDF. La membrana viene bloccata e incubata con l'anticorpo anti-fosfo-Thr183/Tyr185-JNK per una notte a 4°C. Gli anticorpi secondari vengono utilizzati per etichettare l'anticorpo primario e rilevati utilizzando uno scanner a infrarossi. L'intensità del segnale di fluorescenza dell'anticorpo anti-fosfo-JNK viene corretta per il fondo e normalizzata per il caricamento.
Saggio cellulare:[4]
  • Linee cellulari

    Ehrlich ascites carcinoma (EAC) cells

  • Concentrazioni

    500 ng/mL

  • Tempo di incubazione

    48 h

  • Metodo

    For the assay, EAC cells are plated in 96-well plates at a density of 10,000 cells/well/200 µL of medium. The cells are treated with the different concentrations of this compound for 48 h. Adriamycin (500 ng/mL) is used as a positive control. 0.5 mg/mL of MTT is added to each well. 4 h later, the formazan product of MTT reduction is dissolved in DMSO, and absorbance is measured at 570 nm using a Model 680 microplate reader.
Studio sugli animali:[4]
  • Modelli animali

    Male BALB/c mice

  • Dosaggi

    5 mg/kg

  • Somministrazione

    peritumorally

Riferimenti

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9154836/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24333448/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22684030/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23525555/

Convalida del prodotto da parte del cliente

<p>Effect of TMZ (100 μmol/l for U87 cells, 50 μmol/l for U251 cells), anisomycin (4 μmol/l), SB203580 (10 μmol/l), TMZ+SB203580 (10 μmol/l) treatment on thephosphorylation of p38 and AQP4 for 24 h in U87 cells and U251 cells, detected by Western blotting. (A) Protein expression of p-p38, p38 and AQP4 in U87 cells with differenttreatments. (B) The ration of p-p38/p38 in U87 cells. (C) The proportion of AQP4 in GAPDH in U87 cells. (D) Protein expression of p-p38, p38 and AQP4 in U251 cells withdifferent treatments. (E) The ration of p-p38/p38 in U251 cells. (F) The proportion of AQP4 in GAPDH in U251 cells. *P< 0.05 versus the control group</p>

, , J Cell Biochem, 2017, 118(12):4905-4913

Inhibition of JNK also alleviated the mitophagy activity via mitochondria and lysosome co-staining. Anisomycin (Ani)

Dati da [ , , Redox Biol, 2018, 14:59-71 ]

The co-immunofluorescence of mitochondria and lysosomes. DUSP1 alleviated the overlap of mitochondria and lysosomes. Anisomycin (Ani) is the activator of JNK, which was used to reactivate the JNK activity in DUSP1-overepxressed cells.

Dati da [ , , Redox Biol, 2018, 14:576-587 ]

Immunofluorescence assay for Fis1 and p-CaMKII in response to MKP1 overexpression and JNK activation in the presence of hyperglycaemia.

Dati da [ , , Cell Physiol Biochem, 2018, 51(4):1778-1798 ]

Sellecks Anisomycin (Flagecidin) È stato citato da 86 Pubblicazioni

Dominant interfering CARD11 variants disrupt JNK signaling to promote GATA3 expression in T cells [ J Exp Med, 2025, 222(6)e20240272] PubMed: 40111223
Disrupting AGR2/IGF1 paracrine and reciprocal signaling for pancreatic cancer therapy [ Cell Rep Med, 2025, 6(2):101927] PubMed: 39914384
AMBP protects against aortic valve calcification by inhibiting ERK1/2 and JNK pathways mediated by FHL3 [ Theranostics, 2025, 15(10):4398-4415] PubMed: 40225558
Portimine A toxin causes skin inflammation through ZAKα-dependent NLRP1 inflammasome activation [ EMBO Mol Med, 2025, 10.1038/s44321-025-00197-4] PubMed: 39948420
UFMylation safeguards human hepatocyte differentiation and liver homeostasis by regulating ribosome dissociation [ Cell Rep, 2025, 44(5):115686] PubMed: 40347470
sFRP5 ameliorates atherosclerosis by suppressing the JNK/TLR9 pathway in macrophages [ Transl Res, 2025, 281:1-13] PubMed: 40409587
GRASPs link Reelin to the Golgi during neocortical development to control neuronal migration and dendritogenesis [ Commun Biol, 2025, 8(1):572] PubMed: 40188221
PRDX1 knockdown promotes erastin-induced ferroptosis and impedes diffuse large B-cell lymphoma development by inhibiting the MAPK/ERK pathway [ BMC Cancer, 2025, 25(1):806] PubMed: 40307771
Promoter Methylation of WIF1 is Involved in IL-17-Induced Chondrocyte Inflammatory Injury and Matrix Degradation via Promoting Wnt5a/MAPK-JNK Signaling [ Mol Biotechnol, 2025, none] PubMed: 40072748
Transcriptional landscape and predictive potential of long noncoding RNAs in peritoneal recurrence of gastric cancer [ Mol Cancer, 2024, 23(1):284] PubMed: 39736670

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