WYE-354

N. catalogoS1266 Lotto:S126601

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Dati tecnici

Formula

C24H29N7O5
Peso molecolare 495.53 Numero CAS 1062169-56-5
Solubilità (25°C)* In vitro DMSO 99 mg/mL (199.78 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
4%DMSO 30%PEG300 5%Tween80 61%ddH2O

Convalidato dai laboratori Selleck. Se sono necessarie modifiche a questa formulazione, contattare il nostro team di vendita per test personalizzati.

 5.000mg/ml (10.09mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 40 μL of 125 mg/ml clarified DMSO stock solution to 300 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify it; then continue to add 610 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile.
* Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto.
* Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)

Preparazione delle soluzioni stock

Attività biologica

Descrizione WYE-354 è un inibitore potente, specifico e ATP-competitivo di mTOR con un IC50 di 5 nM, blocca mTORC1/P-S6K(T389) e mTORC2/P-AKT(S473) ma non P-AKT(T308), selettivo per mTOR rispetto a PI3Kα (>100 volte) e PI3Kγ (>500 volte).
Target
mTOR
5 nM
In vitro WYE-354 inibisce anche diverse PI3K a livelli micromolari. Nelle cellule HEK293, questo composto (0,2 μM–5 μM) inibisce efficacemente sia mTORC1 che mTORC2. Esso (0,3 μM–10 μM) blocca significativamente la segnalazione di mTOR e l'attivazione di Akt nelle cellule U87MG e MDA361. Inoltre, questa sostanza chimica inibisce potentemente la proliferazione in linee cellulari tumorali tra cui MDA-MB-361, MDA-MB-231, MDA-MB-468, LNCap, A498 e HCT116, con valori di IC50 che vanno da 0,28 μM a 2,3 μM. L'apoptosi indotta da questo composto è accompagnata da arresto del ciclo cellulare in fase G1 e attivazione delle caspasi. Nelle cellule endoteliali HUVEC, esso (10 nM–1 μM) inibisce anche la segnalazione di mTORC1 e mTORC2, come rivelato dalla defosforilazione della proteina ribosomiale S6 e di Akt, rispettivamente. Inoltre, questa sostanza chimica (10 nM–1 μM) attiva la segnalazione della proteina chinasi attivata dai mitogeni (MAPK), il che potrebbe essere dovuto alla sua inibizione di mTORC1.
In vivo In un modello di xenotrapianto di tumore PC3MM2 PTEN-nullo su topi, WYE-354 (50 mg/kg) inibisce efficacemente la segnalazione di mTOR e la crescita tumorale.

Protocollo (da riferimento)

Saggio della chinasi:[1]
  • Saggi di inibitori mTOR

    I saggi vengono eseguiti in piastre da 96 pozzetti per 2 ore a temperatura ambiente in 25 μL contenenti 6 nM di Flag-TOR(3.5), 1 μM di His6-S6K e 100 μM di ATP. I saggi vengono eseguiti e rilevati mediante DELFIA impiegando l'anticorpo Eu-phospho-p70S6K T389. Per la competizione matrice inibitore vs ATP, le reazioni della chinasi mTOR vengono eseguite con concentrazioni variabili di ATP (0, 25, 50, 100, 200, 400 e 800 μM) in combinazione con concentrazioni variabili di questo composto. I saggi contenevano 12 nM di Flag-TOR(3.5), 1 μM di His-S6K e vengono incubati per 30 min. I risultati del saggio vengono rilevati in modo simile da DELFIA ed elaborati per la generazione di grafici doppio-reciproci.
Saggio cellulare:[1]
  • Linee cellulari

    Tumor cell lines including MDA-MB-361, MDA-MB-231, MDA-MB-468, LNCap, DU145, A498, and HCT116

  • Concentrazioni

    0–50 μM, dissolved in DMSO

  • Tempo di incubazione

    72 hours

  • Metodo

    Cells are plated in 96-well plates at 1000 to 3000 cells per well for 24 hours, treated with DMSO or varying concentrations of WYE-354. Viable cell densities are determined 72 hours later by MTS assay employing a CellTiter 96 kit. The effect of each treatment is calculated as percent of control growth relative to the DMSO-treated cells grown in the same culture plate. Inhibitor dose response curves are plotted for determination of IC50 values.
Studio sugli animali:[1]
  • Modelli animali

    Nude mice (BALB/c, nu/nu, female) bearing PC3MM2 xenograft

  • Dosaggi

    50 mg/kg

  • Somministrazione

    Administered via intraperitoneal injection

Riferimenti

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19584280/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21439267/

Convalida del prodotto da parte del cliente

<p>After starved in serum-free medium for 24h,A549 cells incubated with the indicated concentrations of WYE-354 for 3h,followed by 20-minute stimolation of 100ng/ml EGF.</p>

, , Dr. Zhang of Tianjin Medical University

<p>For MTT assays, cells (2,000 ~ 5,000 cells/well) were subcultured into 96-well plates according to their growth properties. Cell proliferation was assayed at 72 hr after treatment of WYE-354 by adding 20 μl of 5 mg/ml 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) solution per 100 μl of growth medium. After incubating for 3-4 h at 37°C, the media were removed and 150 µl/well of MTT solvent (either absolute DMSO or isopropanol containing 4 μM HCl and 0.1% Nonidet-40) was added to dissolve the formazan.</p>

, , Dr. Yong-Weon Yi from Georgetown University Medical Center

<p>HCT116 were left untreated (C) or stimulated for 5 h with serum (FBS) and rapamycin or WYE-354 at the indicated concentrations.</p>

, , Dr. Pierre P. Roger from Free University of Brussels

MTOR Inhibitor WYE-354 Had Anti-tumor Activity Comparable to that of miR-199a-3p. The histological evaluation of liver lesions showed a similar reduction in number and size of tumor nodules in mice treated with both miR-199a-3p and the MTOR inhibitor. In the figure, miR-199a-3p is indicated as miR-199.

Dati da [ , , Mol Ther Nucleic Acids, 2018, 11:485-493 ]

Sellecks WYE-354 È stato citato da 11 Pubblicazioni

A Novel Pipeline for Drug Repurposing for Bladder Cancer Based on Patients' Omics Signatures [ Cancers (Basel), 2020, 12(12)E3519] PubMed: 33255925
WYE-354 restores Adriamycin sensitivity in multidrug-resistant acute myeloid leukemia cell lines. [ Oncol Rep, 2019, 41(6):3179-3188] PubMed: 30942458
miR-199a-3p Modulates MTOR and PAK4 Pathways and Inhibits Tumor Growth in a Hepatocellular Carcinoma Transgenic Mouse Model [Callegari E, et al. Mol Ther Nucleic Acids, 2018, 11:485-493] PubMed: 29858083
Inhibition of RPTOR overcomes resistance to EGFR inhibition in triple-negative breast cancer cells [ Int J Oncol, 2018, 52(3):828-840] PubMed: 29344641
The Toxmatrix: Chemo-Genomic Profiling Identifies Interactions That Reveal Mechanisms of Toxicity [ Chem Res Toxicol, 2018, 31(2):127-136] PubMed: 29156121
Autophagy inhibition sensitizes WYE-354-induced anti-colon cancer activity in vitro and in vivo. [Wang L, et al. Tumour Biol, 2016, 37(9):11743-11752] PubMed: 27020593
β-TrCP1 degradation is a novel action mechanism of PI3K/mTOR inhibitors in triple-negative breast cancer cells. [Yi YW, et al. Exp Mol Med, 2015, 47:e143] PubMed: 25721419
NFκB up-regulation of glucose transporter 3 is essential for hyperactive mammalian target of rapamycin-induced aerobic glycolysis and tumor growth. [ Cancer Lett, 2015, 359(1):97-106] PubMed: 25578782
NFκB up-regulation of glucose transporter 3 is essential for hyperactive mammalian target of rapamycin-induced aerobic glycolysis and tumor growth. [Zha X, et al. Cancer Lett, 2015, 359(1):97-106]
mTOR regulates phagosome and entotic vacuole fission. [Krajcovic M, et al. Mol Biol Cell, 2013, 24(23):3736-45] PubMed: 24088573

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