Tamoxifen Citrate

Tamoxifen Citrate mostra un effetto antitumorale grazie alla sua attività antiestrogenica (ER). I valori per l'affinità apparente di questo composto per l'ER variano tra il 30 e lo 0,01% di quelli ottenuti per l'estradiolo, a seconda della diversa fonte di ER (specie), della concentrazione proteica e delle condizioni utilizzate per il saggio. Il legame di questa sostanza chimica all'ER porta inoltre all'inibizione dell'espressione dei geni regolati dagli estrogeni, inclusi i fattori di crescita e i fattori angiogenici secreti dal tumore che possono stimolare la crescita tramite meccanismi autocrini o paracrini. Induce anche direttamente la morte cellulare programmata. [1] Questo composto produce un effetto inibitorio sull'incorporazione di [³H]timidina e sull'attività della DNA polimerasi nelle cellule MCF-7, oltre a causare una riduzione del contenuto di DNA delle colture e del numero di cellule. Questo effetto inibitorio di questa sostanza chimica sulla crescita delle cellule MCF-7 può essere facilmente invertito mediante l'aggiunta di estradiolo al mezzo di coltura. 2 e 6 μM di questo agente riducono la proporzione di cellule in fase S e aumentano il numero di cellule in G1. A 10 μM, causa la morte cellulare entro 48 ore. [2] Questo composto inibisce la crescita di MCF-7 con una IC50 di ~10 nM dopo 10 giorni di trattamento. Inibisce l'attività dell'attivatore del plasminogeno di MCF-7 e sopprime la stimolazione dell'attività dell'attivatore del plasminogeno da parte dell'estradiolo. Questa sostanza chimica provoca anche aumenti minimi nei livelli cellulari del recettore del progesterone. [3] È in grado di inibire la crescita delle cellule di cancro alla prostata PC3, PC3-M e DU145 con una IC50 compresa tra 5,5 e 10 μM, il che è correlato alla sua inibizione della protein chinasi C e all'induzione di p21(waf1/cip1). [4]

La somministrazione di Tamoxifen Citrate a xenotrapianti MCF-7 in rapida crescita, stimolati dall'estradiolo, si traduce in un ritardo o nella cessazione della crescita tumorale dose-dipendente, diminuendo significativamente la proliferazione delle cellule tumorali nel tumore. Il trattamento con questo composto si traduce in un rallentamento della crescita tumorale (tempo di raddoppio del tumore, 12 giorni), un aumento significativo del tempo di raddoppio potenziale del tumore (T_pot) (6,6 giorni) e una diminuzione dell'indice di marcatura (%LI) (all'8%) entro 23 giorni post-trattamento, rispetto ai topi non trattati che mostrano un tempo di raddoppio del volume di 5 giorni, un T_pot di 2,3 giorni e un %LI del 23%. [5] Ha proprietà non solo antiestrogeniche ma anche estrogeniche a seconda della specie, del tessuto e del gene. Questa sostanza chimica mostra effetti favorevoli sulle concentrazioni ossee e lipidiche sieriche e stimolazione dell'endometrio. [1]

• Saggi di legame competitivi

  Le cellule vengono raccolte da flaconi a T da 150 cm² e il citosol viene preparato a una concentrazione proteica di circa 2 mg/mL in tampone fosfato. Aliquote di questo surnatante di 180.000 ×g vengono quindi incubate con varie concentrazioni di questo composto e 2,5 nM di [³H]estradiolo per 16 ore a 0-4 ℃. Gli steroidi liberi vengono assorbiti da destrano-carbone [10 μL di 0,5% Dextran C-5% Norite A in tampone TE] per 1 ora a 0 ℃, e le aliquote vengono contate dopo centrifugazione a 800 ×g per 30 min. La capacità di legame relativa di ciascun competitore è considerata come il rapporto della concentrazione di estradiolo radioinattivo/competitore richiesta per inibire la metà del legame specifico di [³H]estradiolo, con l'affinità dell'estradiolo impostata al 100%.

• Linee cellulari

  Human breast cancer cells MCF-7

• Concentrazioni

  ~1 μM

• Tempo di incubazione

  10 days

• Metodo

  MCF-7 cells are seeded into T-25 flasks (1.5×10⁵ cells/flask) and grown for 2 days in the MEM supplemented with 10 mM HEPES buffer, gentamicin (50 μg/mL), penicillin (100 units/mL), streptomycin (0.1 mg/mL), bovine insulin (6 ng/mL), hydrocortisone (3.75 ng/mL), and 5% calf serum that has been treated with dextran-coated charcoal for 45 min at 55 ℃ to remove endogenous hormones. The medium is then changed to MEM supplemented as described above, except that it contains 2% charcoal dextran-treated calf serum and various concentrations of this compound. At the end of incubation, cell numbers are counted.

• Modelli animali

  Human breast carcinoma xenografts MCF-7

• Dosaggi

  2 cm Tamoxifen capsules

• Somministrazione

  Subcutaneous implantation