Semagacestat (LY450139)

N. catalogoS1594 Lotto:S159402

Stampa

Dati tecnici

Formula

C19H27N3O4
Peso molecolare 361.44 Numero CAS 425386-60-3
Solubilità (25°C)* In vitro DMSO 73 mg/mL (201.96 mM)
Ethanol 41 mg/mL (113.43 mM)
Water Insoluble
In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension
0.5% methylcellulose

Convalidato dai laboratori Selleck. Se sono necessarie modifiche a questa formulazione, contattare il nostro team di vendita per test personalizzati.

 10.000mg/ml (27.67mM) Taking the 1 mL working solution as an example, take 10 mg of this product, add it to 1 ml of 0.5% methylcellulose clear solution, and mix evenly to form a uniform suspension. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile.
* Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto.
* Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)

Preparazione delle soluzioni stock

Attività biologica

Descrizione Semagacestat (LY450139) è un bloccante della γ-secretasi per Aβ42, Aβ40 e Aβ38 con IC50 di 10,9 nM, 12,1 nM e 12,0 nM, rispettivamente. Inibisce anche la segnalazione Notch con IC50 di 14,1 nM nelle cellule di glioma umano H4. Questo composto ha raggiunto la fase 3 degli studi clinici.
Target
Aβ42
(H4 human glioma cells)		 Aβ38
(H4 human glioma cells)		 Aβ40
(H4 human glioma cells)		 Notch
(H4 human glioma cells)
10.9 nM 12.0 nM 12.1 nM 14.1 nM
In vitro Il Semagacestat (LY450139) riduce la secrezione di Aβ42, Aβ40 e Aβ38 dalle cellule di glioma umano H4 che sovraesprimono stabilmente l'APP umana wild-type nel mezzo di coltura, con IC50 di 10,9 nM, 12,1 nM e 12,0 nM, rispettivamente, senza influenzare la vitalità cellulare. Aumenta anche il β-CTF nei lisati cellulari con ECmax di 16,0 nM, e l'aumento può essere inaspettatamente attenuato a concentrazioni elevate. Questo composto inibisce la segnalazione Notch con IC50 di 14,1 nM, e mostra una selettività minima di risparmio di Notch con un rapporto IC50 Notch/IC50 Aβ42 di solo 1,3. Provoca una diminuzione dipendente dalla concentrazione di Aβ40 secreto nel mezzo con IC50 di 111 nM da CTX murino che esprime APP murina endogena, ma la formazione di Aβ42 murina nel CTX è circa 12 volte inferiore a quella di Aβ40 in accordo con i dati per i neuroni di topi wild-type.
In vivo La somministrazione orale di Semagacestat (LY450139) (1 mg/kg) a topi Tg2576 transgenici per APP di 5,5 mesi di età migliora significativamente i deficit di memoria nella memoria di lavoro spaziale utilizzando il compito del labirinto a Y, che scompare dopo 8 giorni di dosaggio subcronico. Diminuisce i livelli ippocampali di Aβ42 e Aβ40 a 10 mg/kg (riduzione del 22-23%) e 30 mg/kg (riduzione del 36-41%) e aumenta il β-CTF a 0,3-10 mg/kg in modo dose-dipendente senza inibizione della lavorazione di altri substrati della γ-secretasi, come Notch, N-caderina o EphA4, nel cervello, ma compromette la cognizione normale nei topi wild-type e nei topi Tg2576 di 3 mesi di età non riuscendo a ripristinare i deficit cognitivi nel test del labirinto a Y.
Caratteristiche Il migliore inibitore della γ-secretasi caratterizzato che ha raggiunto la clinica.

Protocollo (da riferimento)

Saggio della chinasi:[1]
  • Saggio di elaborazione di APP cellulare e saggio di segnalazione Notch

    Le cellule di glioma umano H4 che sovraesprimono stabilmente l'APP695 umana wild-type vengono trattate con Semagacestat (LY450139) a varie concentrazioni per 24 ore. I livelli di Aβ42, Aβ40 e Aβ38 nei mezzi vengono misurati utilizzando kit ELISA separati. Il vettore di espressione della forma costitutivamente attiva di Notch (NotchΔE), che codifica le basi 1-60 e 5193-6657 della regione codificante di Notch1 umano (NM_017617), viene costruito in un vettore pcDNA3.1 con una modifica della sequenza dal topo all'uomo. L'attività di segnalazione Notch viene valutata utilizzando il kit Cignal RBP-Jk Reporter Assay. La proteina RBP-Jk [CSL/CBF1/Su(H)/Lag1] è un fattore di trascrizione attivato con il dominio intracellulare di Notch prodotto dalla γ-secretasi. Le cellule H4 vengono trasfettate transitoriamente con il vettore di espressione di NotchΔE umano e il costrutto di luciferasi sensibile a RBP-Jk utilizzando Lipofectamine 2000, e quindi esposte a varie concentrazioni di questo composto per 16 ore. La segnalazione Notch viene misurata in base all'attività luciferasi nel lisato cellulare utilizzando il sistema Dual-Glo Luciferase Assay System.
Saggio cellulare:[2]
  • Linee cellulari

    Murine cortical neurons and cerebellar granule cells

  • Concentrazioni

    Dissolved in DMSO, final concentration ~10 μM

  • Tempo di incubazione

    24 hours

  • Metodo

    Cells are incubated with Semagacestat (LY450139) for 24 hours. For detection of cell viability, the percentage of viable cells is quantified by their capacity to reduce 3-(4,5-dimethylthiazole-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) following incubation with 0.5 mg/mL MTT for 60 minutes. For the detection of sAPP species, cells are lysed and analysed by western blotting.
Studio sugli animali:[1]
  • Modelli animali

    Female Tg2576 mice expressing human APP695 with the Swedish mutation (K670N/M671L)

  • Dosaggi

    ~30 mg/kg

  • Somministrazione

    Orally administered once daily

Riferimenti

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22323718/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19519664/

Convalida del prodotto da parte del cliente

<p>HEK/APPswe cells were either left non-treated (-) or exposed to the γ-secretase inhibitor (GSI) semagacestat (+) for 19 h prior to cell harvesting and membrane preparation (Substrate accumulation). Exposure of cells with GSI prior to membrane preparation results in higher Aβ1-42 and Aβx-42 signals as compared to membranes derived from non-GSI treated cells. Direct addition of semagacestat to the membranes in the novo Aβ production assay inhibited Aβ production (Semagacestat (1 µM)). The amount of Aβx-42 is higher than Aβ1-42 suggesting that C83 is the major substrate for the Aβ42 signal detected.</p>

Dati da [ J Biol Chem , 2014 , 289(3), 1540-50 ]

<p>None of the AZ GSMs (square, triangle, and ×) or E2012 (O) affect Notch processing, whereas the GSIs L685458, DBZ, MRK-560, and Semagacestat do, as measured by quantifying the amount of nuclearly trans- located NICD in HEK293 cells stably transfected with △ENotch using immunocytochemistry. % NICD translocation is set relative to 0.5% DMSO (100%) and 0.5 μM L685458(0%)controls(mean±S.E., n＝2).</p>

Dati da [ J Biol Chem , 2012 , 287(15), 11810-9 ]

Cultures were assessed in A for TRAP by enzyme histochemistry 5-8 days following exposure to Rankl. Values are means ± S.D.; n = 6 for all data sets except for Notch2Q2319X DMSO at day 5 where n = 5; the right upper panel shows representative culture fields of TRAP-stained multinucleated cells 8 days after the addition of Rankl.

Dati da [ , , J Biol Chem, 2016, 291(4):1538-51. ]

Sellecks Semagacestat (LY450139) È stato citato da 23 Pubblicazioni

A patient-derived T cell lymphoma biorepository uncovers pathogenetic mechanisms and host-related therapeutic vulnerabilities [ Cell Rep Med, 2025, S2666-3791(25)00102-8] PubMed: 40147445
Impaired ciliogenesis in small airway epithelial cells involves in the development of idiopathic pulmonary fibrosis [ Biochim Biophys Acta Mol Basis Dis, 2025, 1871(8):167992] PubMed: 40712987
Simultaneous Inhibition of Ceramide Hydrolysis and Glycosylation Synergizes to Corrupt Mitochondrial Respiration and Signal Caspase Driven Cell Death in Drug-Resistant Acute Myeloid Leukemia [ Cancers (Basel), 2023, 15(6)1883] PubMed: 36980769
Establishment and characterization of immortalized sweat gland myoepithelial cells [ Sci Rep, 2022, 12(1):7] PubMed: 34997030
LY450139 Inhibited Ti-Particle-Induced Bone Dissolution via Suppressing Notch and NF-κB Signaling Pathways [ Calcif Tissue Int, 2022, 111(2):211-223] PubMed: 35588014
TrkA-mediated endocytosis of p75-CTF prevents cholinergic neuron death upon γ-secretase inhibition [ Life Sci Alliance, 2021, 4(4)e202000844] PubMed: 33536237
Treatment-Induced Tumor Dormancy through YAP-Mediated Transcriptional Reprogramming of the Apoptotic Pathway. [ Cancer Cell, 2020, 13;37(1):104-122e12] PubMed: 31935369
Amyloidogenic Processing of Alzheimer's Disease β-amyloid Precursor Protein Induces Cellular Iron Retention [ Mol Psychiatry, 2020, 10.1038/s41380-020-0762-0] PubMed: 32444869
A novel human colon signet-ring cell carcinoma organoid line: establishment, characterization and application [ Carcinogenesis, 2020, 41(7):993-1004] PubMed: 31740922
In Vitro Evaluation of Clinical Candidates of γ-Secretase Inhibitors: Effects on Notch Inhibition and Promoting Beige Adipogenesis and Mitochondrial Biogenesis [ Pharm Res, 2020, 37(10):185] PubMed: 32888109

POLITICA DI RESO
La politica di reso incondizionato di Selleck Chemical garantisce ai nostri clienti unesperienza di acquisto online senza problemi. Se non sei in alcun modo soddisfatto del tuo acquisto, puoi restituire qualsiasi articolo entro 7 giorni dalla ricezione. In caso di problemi di qualità del prodotto, sia relativi al protocollo che al prodotto, puoi restituire qualsiasi articolo entro 365 giorni dalla data di acquisto originale. Si prega di seguire le istruzioni seguenti per la restituzione dei prodotti.

SPEDIZIONE E CONSERVAZIONE
I prodotti Selleck vengono trasportati a temperatura ambiente. Se ricevi il prodotto a temperatura ambiente, ti assicuriamo che il Dipartimento di Ispezione Qualità di Selleck ha condotto esperimenti per verificare che la conservazione a temperatura normale per un mese non influirà sullattività biologica dei prodotti in polvere. Dopo la raccolta, conservare il prodotto secondo le indicazioni descritte nella scheda tecnica. La maggior parte dei prodotti Selleck è stabile nelle condizioni raccomandate.

NON PER USO UMANO, DIAGNOSTICO VETERINARIO O TERAPEUTICO.