Pracinostat (SB939)

Pracinostat (SB939) ha una selettività 100 volte maggiore per gli HDAC rispetto agli enzimi non-HDAC, ai recettori e ai canali ionici che legano lo Zn. Questo composto è un potente inibitore delle isoenzime HDAC di classe I, HDAC1, HDAC2, HDAC3 e HDAC8 con valori di IC50 che vanno da 43 nM a 140 nM. Inibisce significativamente le isoenzime HDAC di classe II, HDAC4, HDAC5, HDAC7, HDAC9 e HDAC10 con valori di IC50 che vanno da 40 nM a 137 nM, con l'eccezione di HDAC6 che mostra un IC50 di 1008 nM. Inibisce marcatamente HDAC11 delle isoenzime HDAC di classe IV con un IC50 di 93 nM, ma non mostra attività inibitoria contro SIRT 1 delle HDAC di classe III. Questa sostanza chimica mostra una significativa attività antiproliferativa contro un'ampia varietà di linee cellulari tumorali, in particolare cellule di leucemia e cellule di linfoma cutaneo a cellule T con valori di IC50 che vanno da 50 nM (cellule H9) a 170 nM (cellule HEL92.1.7). [1]

La somministrazione di questo composto (da 25 mg/kg a 100 mg/kg) mostra un'efficacia antitumorale dose-dipendente in un modello murino di xenotrapianto di cancro colorettale umano (HCT-116). Questo è circa il doppio più efficace del SAHA: questa sostanza chimica causa un'inibizione della crescita tumorale del 94% contro il 48% del SAHA, entrambi alla dose massima tollerata. La somministrazione orale di questo agente a una dose di 50 mg/kg o 75 mg/kg nel modello murino genetico APC^min di cancro al colon in fase iniziale riduce notevolmente il numero di tumori, diminuisce i punteggi cumulativi di emocoltura e aumenta più efficacemente i valori di ematocrito. [1]

• Saggio enzimatico HDAC

  Tutti gli enzimi HDAC ricombinanti, ad eccezione di SIRT1, vengono clonati ed espressi in S*BIO. La miscela di reazione contenente 2,5 o 5 μL dell'isoenzima HDAC, tampone di saggio (25 mM Tris-HCl, pH 7,5; 137 mM NaCl; 2,7 mM KCl, 1 mM MgCl₂ e 1 mg/mL BSA), diverse concentrazioni di questo composto e il substrato fluorogenico deacetilasico Flour de LysTM in un volume di reazione totale di 33 μL viene incubata a temperatura ambiente per 2 ore. Vengono aggiunti 16 μL di sviluppatore Flour de LysTM e incubati per altri 10 minuti. La luce emessa viene misurata a 460 nm in un lettore di micropiastre. I valori di IC50 vengono generati utilizzando il software XLfit.

• Linee cellulari

  HCT116, A2780, ACHN, MCF7, HL-60, et al.

• Concentrazioni

  Dissolved in DMSO (stock concentration, 10 mM), final concentrations 1.5 nM to 100 μM

• Tempo di incubazione

  96 hours

• Metodo

  Cells are seeded in 96-well plates in the log growth phase at a predetermined optimal density, and rested for 24 hours (adherent cells) or 2 hours (suspension cells), respectively. They are exposed to different concentrations of this compound for 96 hours. Cell proliferation assays are done using either the CyQUANT cell proliferation assay kit for adherent cells or the CellTiter96 Aqueous One solution cell proliferation kit for suspension cells.

• Modelli animali

  BALB/c nude mice bearing HCT-116 human colon cancer xenografts, Male and APC^min mice

• Dosaggi

  25, 50, 75, or 100 mg/kg

• Somministrazione

  Oral gavage once daily