In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO
40%PEG300
5%Tween80
50%ddH2O
Convalidato dai laboratori Selleck. Se sono necessarie modifiche a questa formulazione, contattare il nostro team di vendita per test personalizzati.
2.15mg/ml
(10.08mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 43 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution
5% DMSO
95% Corn oil
Convalidato dai laboratori Selleck. Se sono necessarie modifiche a questa formulazione, contattare il nostro team di vendita per test personalizzati.
0.31mg/ml
(1.45mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 6.2 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile. * Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto. * Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)
Preparazione delle soluzioni stock
Attività biologica
Descrizione
PluriSIn #1 (NSC 14613) è un inibitore della stearoyl-coA desaturase 1 (SCD1) ed è in grado di eliminare selettivamente le hPSC.
Target
SCD1
In vitro
PluriSIn #1 (NSC 14613) ha un effetto citotossico robusto, rapido e selettivo verso le hPSC, con l'apoptosi come meccanismo centrale di morte cellulare che attiva. Questo composto porta a stress del RE nelle hPSC, inducendo una diminuzione di circa il 30% nella sintesi proteica a 20 μM. Causa anche una diminuzione di circa il 65% nell'attività della stearoyl-coA desaturase (SCD1) e previene la formazione di teratomi da hPSC indifferenziate. I PluriSIn inibiscono anche le mPSC e ostacolano lo sviluppo embrionale del topo.
Le cellule vengono piastrate in piastre a 6 pozzetti a una densità da 50k a 100k cellule per pozzetto. 24 ore dopo, 20 μM di PluriSIn #1 (NSC 14613) o 0.2% di DMSO-controllo vengono aggiunti alle cellule. Dopo 12 ore di incubazione a 37 ℃, 5% CO2, il vecchio terreno viene rimosso, le cellule vengono lavate con PBS e viene aggiunto un nuovo terreno contenente 2.3 μM di 0.75 UCi [1-14C] Acido Stearico. Le cellule vengono incubate per un massimo di 4 ore a 37 ℃, 5% CO2. Dopo il periodo di incubazione, il terreno viene scartato e le cellule vengono lavate 3 volte con 2 mL di PBS. Vengono aggiunti 2 mL della miscela n-esano: isopropanolo (3:2 v:v) e le cellule vengono incubate per 30 min a 37 ℃, 5% CO2. Successivamente vengono aggiunti 2 mL di soluzione di Folch (cloroformio: metanolo, 2:1, v:v). Il liquido viene trasferito in provette per la separazione di fase aggiungendo 1 mL di acqua. La fase organica inferiore viene evaporata e utilizzata per la saponificazione lipidica e la separazione TLC dell'acido stearico [1-14C] libero (substrato) e dell'acido oleico [1-14C] (prodotto formato). I lipidi estratti dalle cellule vengono applicati su piastre TLC precedentemente immerse in 10% NO3 Ag e attivate a 120℃x60 min. Acido stearico e oleico non marcati vengono aggiunti a ogni punto di applicazione come vettori e come standard interni per l'identificazione. Le piastre vengono sviluppate con una miscela solvente di Cloroformio:MeOH:AcH:DDW (90:8:1:0.8). Gli acidi grassi liberi vengono rilevati tramite U.V. dopo aver spruzzato la TLC con una soluzione di 2',7',diclorofluoresceina. I punti corrispondenti all'acido stearico e oleico vengono raschiati e la radioattività contata in uno scintillatore. L'attività della desaturase SCD1 viene calcolata dalla percentuale di conversione del substrato in prodotto e dalla conversione in pmol/min/106 cellule.
Relative cell numbers for PluriSIn #1 (NSC 14613) are determined by fixating the cells with 0.5% glutardialdehyde and staining with methylene blue dissolved in 0.1 M boric acid (pH 8.5). Color extraction is performed using 0.1 M hydrochloric acid, and the staining (which is proportional to cell number) is quantitated by measuring absorbance at 650 nM.
Riferimenti
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23318055/
Sellecks PluriSIn #1 (NSC 14613) È stato citato da 3 Pubblicazioni
CTC-derived pancreatic cancer models serve as research tools and are suitable for precision medicine approaches
[ Cell Rep Med, 2024, 5(9):101692]
Targeting a Lipid Desaturation Enzyme, SCD1, Selectively Eliminates Colon Cancer Stem Cells through the Suppression of Wnt and NOTCH Signaling
[ Cells, 2021, 10(1)E106]
Clinical and biochemical relevance of monounsaturated fatty acid metabolism targeting strategy for cancer stem cell elimination in colon cancer.
[ Biochem Biophys Res Commun, 2019, 519(1):100-105]
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