NVP-ADW742

NVP-ADW742 exhibits a 6-fold greater selectivity for IGF-1R versus InsR with IC50 of 2.8 μM; minimal inhibitory activity against c-Kit, HER1, PDGFR, VEGFR2, or Bcr-Abl p210 with IC50 greater than 5 μM. This compound significantly inhibits the serum-stimulated cell proliferation in a variety of tumor cell lines in dose-dependent manner, with IC50 values of 0.1-0.5 μM for the multiple myeloma (MM) cell lines, and the antitumor effects on MM cells can not be overcome by the co-culture with BMSCs. It also abrogates the responsiveness of tumor cells to IL-6 in the presence of serum. In addition, this chemical is active against MM cell lines with resistance to conventional (cytotoxic chemotherapy) or investigational (CC-5013, TRAIL/Apo2L, PS-341) anticancer agents, as well as primary tumor cells from MM patients with multi-drug-resistant disease. This compound decreases the production of VEGF by tumor cells and bone marrow stromal cells, and suppresses the IGF-1-induced secretion of VEGF by various tumor types such as thyroid cancer cells or MM cells. IGF-1R inhibition by this compound (0.75 μM) sensitizes MM cells or prostate cancer cells to other anticancer agents such as doxorubicin, TRAIL/Apo2L, or PS-341. [1]

Administration of NVP-ADW742 at 10 mg/kg twice daily significantly inhibits tumor growth, prolongs survival, and enhances the antitumor effect of cytotoxic chemotherapy in the mice model of diffuse MM. [1]

• Saggio di attività chinasica cellulare

  Il valore IC50 per l'effetto di NVP-ADW742 sull'autofosforilazione di IGF-1R è determinato a livello cellulare in presenza di concentrazioni crescenti di questo composto, utilizzando saggi “Capture ELISAs” a 96 pozzetti. Brevemente, le cellule NWT-21 vengono seminate in piastre di coltura tissutale a 96 pozzetti in terreno di crescita completo e coltivate fino a una confluenza del 70-80%, e quindi private di siero per 24 ore in terreno con 0,5% di FCS. Successivamente, le cellule vengono incubate per 90 minuti in presenza di questo inibitore, seguite dalla stimolazione con IGF-I (10 ng/mL) per 10 minuti a 37 °C. Successivamente, le cellule vengono lavate due volte con PBS ghiacciato e lisate a 4 °C con 50 μL/pozzetto di tampone RIPA (50 mM Tris-HCl, pH 7.2, 120 mM NaCl, 1 mM EDTA, 6 mM EGTA, 1% NP-40, 20 mM NaF, 1 mM benzamidina, 15 mM pirofosfato di sodio, 1 mM PMSF e 0,5 mM Na₃VO₄). I lisati di ogni esperimento vengono quindi trasferiti in piastre ELISA nere pre-rivestite con anticorpi di cattura specifici per IGF-1R. Dopo la cattura da parte degli anticorpi, i lisati vengono miscelati con 40 μL di un Ab anti-fosfotirosina marcato con fosfatasi alcalina (AP) (PY20(AP) diluito a 0,2 μg/mL in tampone RIPA, e incubati durante la notte a 4 °C. Dopo il lavaggio (PBST) e l'incubazione per 45 minuti a temperatura ambiente con il substrato AP luminescente CDPStar RTU con Emerald II (90 μL/pozzetto), la luminescenza viene misurata utilizzando un contatore a scintillazione Packard Top Count.

• Linee cellulari

  MM-1S, MM-1R, RPMI-8226/S, OPM-1, OCI-My5, SKMM2, KMS-12-BM, XG-1, L363, S6B45 cells and et al.

• Concentrazioni

  Dissolved in DMSO, final concentrations ~ 10 μM

• Tempo di incubazione

  48 hours

• Metodo

  Cells are exposed to various concentrations of NVP-ADW742 for 48 hours in the presence or absence of serum. Cell survival is examined using MTT assay.

• Modelli animali

  Male SCID/NOD mice injected i.v. with MM-1S-Luc⁺ human MM cells

• Dosaggi

  10 mg/kg twice daily

• Somministrazione

  Injection i.p. or oral gavage