Letrozole

Il Letrozole inibisce potentemente l'aromatase derivata da una varietà di fonti diverse, inclusi microsomi placentari umani, frazioni particolate di carcinoma mammario umano, microsomi ovarici di ratto, cellule MCF-7 trasfettate con aromatase (MCF-7Ca), cellule di coriocarcinoma umano JEG-3, cellule CHO, tessuto ovarico di criceto e frazioni particolate di carcinoma mammario umano con IC50 di 11, 2, 7, 0,07, 0,07, 1,4, 20 e 0,8 nM. Nei sistemi non cellulari, l'IC50 di questo composto è calcolata essere 1-13 nM. [1] Inibisce massimamente la produzione di estradiolo in vitro nel tessuto ovarico di criceto stimolato da LH a 0,1 μM con una IC50 di 0,02 μM e non influenza significativamente la produzione di progesterone fino a 350 μM. Nel tessuto surrenale di ratto stimolato da ACTH in vitro, la produzione di aldosterone è inibita con una IC50 di 210 μM. [2] Questa sostanza chimica inibisce la crescita delle cellule epiteliali di carcinoma mammario MCF-7 in modo dose-dipendente con una IC50 di 1 nM. L'inibizione può essere osservata anche a concentrazioni molto basse (0,1 nM). Il trattamento di cellule epiteliali normali MCF-12A con questo composto non ha influenzato la loro crescita anche a elevate concentrazioni di letrozole (100 nM) o tempi di coltura prolungati. La somministrazione concomitante di 17-β-estradiolo con esso (10 nM) ha diminuito l'effetto stimolatorio dell'attività enzimatica di MMP-2 e -9 rilasciate dall'estradiolo. [3]

Il Letrozole inibisce l'aromatase in vivo con una ED50 di 1-3 μg/kg p.o. [2] Questo composto mostra effetti anti-endocrini. Inibisce l'ipertrofia uterina indotta da androstenedione in ratti immaturi con una ED50 di 1-3 μg/kg. Nel ratto femmina adulto, questo composto (0,3-1 mg/kg al giorno p.o., 14 giorni) interrompe completamente la ciclicità ovarica e riduce il peso uterino e le concentrazioni sieriche di estradiolo (E2) in misura simile a quanto osservato dopo ovariectomia. [1] Questa sostanza chimica induce la regressione dose-dipendente di tumori mammari estrogeno-dipendenti, indotti da 9,10-dimetilbenz-a-antracene in ratti femmine adulte. L'ED50 per esso è determinata essere 10 - 30 µg/kg/giorno, con inibizione completa a una dose giornaliera di 10 µg/giorno. [4] Produce un'inibizione dose-dipendente della crescita tumorale delle cellule MCF-7 trasfettate con il gene dell'aromatase umana (MCF-7Ca) impiantate in topi nudi atimici, con inibizione completa a 20 mg/kg al giorno p.o. [5]

• Attività dell'aromatasi placentare umana

  Il saggio viene eseguito in un volume totale di 1 mL a 37 ℃. Se non diversamente specificato, la miscela di incubazione contiene 11 nM di [4- ¹⁴C] androstene-3, 17-dione ([4- ¹⁴C]A), 24 mM di NADPH (sale tetrasodico Tipo III), le concentrazioni appropriate dell'inibitore desiderato e 120 μg di proteina microsomiale. Il (4- ¹⁴C)A viene aggiunto come soluzione in 1,7% di etanolo in tampone fosfato di potassio 0,05 M (pH 7,4), in modo che la concentrazione finale di etanolo non superi lo 0,02% (v/v). La reazione viene avviata con l'aggiunta dell'enzima e interrotta dopo 20 min con l'aggiunta di 7 volumi di acetato di etile. La miscela viene agitata su un vortex e centrifugata a 600 g per 5 min. La fase acquosa viene ri-estratta con 7 volumi di acetato di etile, e gli estratti combinati vengono evaporati a secco utilizzando un Evapo-Mix. Oltre il 99% della radioattività del [4- ¹⁴C] aggiunto viene recuperato utilizzando questo sistema di estrazione. Il residuo ottenuto viene disciolto in 150 μL di acetone, e aliquote da 100 μL vengono cromatografate per 65 min su piastre a strato sottile pre-rivestite con gel di silice 60 utilizzando etil acetato: isooctano (140:60, v/v; sistema A) o toluene: cloroformio: metanolo (70:140:20; sistema B). Le zone radioattive della piastra vengono localizzate con uno scanner a strato sottile Berthold LB 2760. I picchi radioattivi di estradiolo (E2) ed estrone (E1) vengono identificati per confronto con standard autentici. La corrispondente banda di legame del gel di silice viene trasferita in fiale contenenti 10 mL di liquido di scintillazione e contata con un sistema di scintillazione liquida 6880.

• Linee cellulari

  Human breast cancer cells MCF-7

• Concentrazioni

  ~100 nM

• Tempo di incubazione

  1 days

• Metodo

  Cells are seeded in duplicate at 5,000 to 10,000 cells per well in 24-well plates. The day after plating, different concentrations of Letrozole are added. At the end of incubation, cells are trypsinizated and placed in Isotone solution and counted immediately using a Coulter particle-counter.

• Modelli animali

  Human breast carcinoma xenografts MCF-7 with human aromatase gene (MCF-7Ca)

• Dosaggi

  20 mg/kg/day

• Somministrazione

  orally administered by gavage once every 2 days