KW-2449

N. catalogoS2158 Lotto:S215802

Stampa

Dati tecnici

Formula

C20H20N4O
Peso molecolare 332.4 Numero CAS 1000669-72-6
Solubilità (25°C)* In vitro DMSO 67 mg/mL (201.56 mM)
Ethanol 67 mg/mL (201.56 mM)
Water Insoluble
In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension
0.5% methylcellulose

Convalidato dai laboratori Selleck. Se sono necessarie modifiche a questa formulazione, contattare il nostro team di vendita per test personalizzati.

 10.000mg/ml (30.08mM) Taking the 1 mL working solution as an example, take 10 mg of this product, add it to 1 ml of 0.5% methylcellulose clear solution, and mix evenly to form a uniform suspension. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile.
* Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto.
* Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)

Preparazione delle soluzioni stock

Attività biologica

Descrizione KW-2449 è un inibitore multi-target, principalmente per Flt3 con un IC50 di 6,6 nM, moderatamente potente per FGFR1, Bcr-Abl e Aurora A; scarso effetto su PDGFRβ, IGF-1R, EGFR. Fase 1.
Target
FLT3 (D835Y)
(Cell-free assay)		 Abl (T315I)
(Cell-free assay)		 FLT3
(Cell-free assay)		 Abl
(Cell-free assay)		 FGFR1
(Cell-free assay)		 Visualizza altro
1 nM 4 nM 6.6 nM 14 nM 36 nM
In vitro KW-2449, un inibitore multichinasico di FLT3, ABL, ABL-T315I e Aurora kinase, è sotto indagine per il trattamento di pazienti affetti da leucemia. Questo composto mostra potenti effetti inibitori della crescita sulle cellule leucemiche con mutazioni FLT3 mediante l'inibizione della FLT3 chinasi, con conseguente down-regulation di FLT3/STAT5 fosforilato, arresto in G1 e apoptosi. La somministrazione orale di questa sostanza chimica mostra un'inibizione dose-dipendente e significativa della crescita tumorale nel modello di xenotrapianto con mutazione FLT3 con minima soppressione del midollo osseo. Nella leucemia umana con FLT3 wild-type, induce la riduzione dell'istone H3 fosforilato, l'arresto in G2/M e l'apoptosi. Nella leucemia resistente all'Imatinib, questo agente contribuisce a superare la resistenza mediante la simultanea down-regulation di BCR/ABL e Aurora kinases. L'attività inibitoria di questo composto non è influenzata dalla presenza di proteine plasmatiche umane, come l'α1-glicoproteina acida. Possiede una potente attività inibitoria della crescita contro vari tipi di leucemia tramite diversi meccanismi d'azione. Questo inibitore ha un'attività significativa e giustifica uno studio clinico in pazienti affetti da leucemia con mutazioni FLT3 e mutazioni resistenti all'Imatinib. I livelli di fosforilazione di FLT3 e STAT5 sono diminuiti da questa sostanza chimica in modo dose-dipendente. Inoltre, inibisce potentemente ABL-T315I, che è associato alla resistenza all'IM, con un IC50 di 4 nM. D'altra parte, questo composto ha scarso effetto su PDGFRβ, IGF-1R, EGFR e varie serina/treonina chinasi anche a una concentrazione di 1 μM. Ha potenti attività inibitorie della crescita non solo contro le cellule leucemiche che esprimono FLT3/ITD, ma anche contro le cellule leucemiche attivate da FLT3/KDM e le cellule leucemiche che sovraesprimono FLT3 wild-type. In accordo con l'effetto inibitorio della crescita, questo agente sopprime le fosforilazioni di FLT3 (P-FLT3) e della sua molecola a valle fosfo-STAT5 (P-STAT5) nelle cellule MOLM-13 in modo dose-dipendente. Inoltre, aumenta la percentuale di cellule in fase G1 del ciclo cellulare e riduce reciprocamente la percentuale di cellule in fase S, con conseguente aumento della popolazione di cellule apoptotiche. Questo composto può defosforilare la chinasi WT-FLT3 costitutivamente attiva, ma non inibisce la proliferazione delle cellule leucemiche se non sono principalmente dipendenti dalla chinasi FLT3. Viene rapidamente assorbito e convertito in un metabolita principale M1. Studi preclinici rivelano che questa sostanza chimica viene convertita dalla monoaminossidasi-B (MAO-B) e dall'aldeide ossidasi nel suo metabolita principale M1. Questo agente media la citotossicità tramite l'inibizione di FLT3/ITD. È un inibitore diretto di FLT3 e induce l'inibizione del suo bersaglio a valle STAT5. Questo composto interagisce sinergicamente con gli HDACI per indurre apoptosi nelle cellule CML Ph+ in modo tempo- e concentrazione-dipendente. Migliora sinergicamente la letalità di vorinostat/SNDX275 nelle cellule CML. Questi regimi di inibitori sono attivi contro ulteriori cellule leucemiche Bcr/Abl+ resistenti all'IM. Riduce moderatamente la fosforilazione dell'istone H3, un indicatore dell'attività di Aurora B, nelle cellule K562 trattate con nocodazolo.
In vivo Nel modello di xenotrapianto tumorale MOLM-13, la somministrazione orale di KW-2449 per 14 giorni mostra un potente e significativo effetto antitumorale in modo dose-dipendente.
Caratteristiche Studiato come FLT3 inhibitor in studi clinici, con altri in fase di sviluppo precoce.

Protocollo (da riferimento)

Saggio della chinasi:[2]
  • Fosforilazione di FLT3

    Le cellule leucemiche vengono lavate in soluzione salina tamponata con fosfato (PBS), quindi lisate risospendendo le cellule in tampone di lisi (20 mM Tris pH 7.4, 100 mM NaCl, 1% Igepal, 1 mM EDTA, 2 mM NaVO4, più inibitore completo delle proteasi KW-2449 per 30 minuti sotto agitazione. L'estratto viene chiarificato mediante centrifugazione a 1.6 × 104 g e il surnatante viene analizzato per le proteine (Bio-Rad). Un'aliquota di 50 μg viene rimossa come lisato cellulare intero per l'analisi di STAT5, e il rimanente viene utilizzato per l'immunoprecipitazione con anti-FLT3. L'anticorpo anti-FLT3 viene aggiunto all'estratto per un'incubazione notturna, quindi la sefarosio proteina A viene aggiunta per altre 2 ore. Gel di elettroforesi su gel di poliacrilammide-dodecil solfato di sodio (SDS-PAGE) separati per il lisato cellulare intero e gli immunoprecipitati vengono eseguiti in parallelo. Dopo il trasferimento su membrane Immobilon, l'immunoblotting viene eseguito con anticorpo anti-fosfotirosina (4G10) per rilevare FLT3 fosforilato o, per i gel di lisato cellulare intero, con un anticorpo monoclonale di ratto contro STAT5 fosforilato (residuo Y694) quindi strippato e riprobato con anticorpo anti-FLT3 per misurare il FLT3 totale. Le proteine vengono visualizzate utilizzando la chemiluminescenza, esposte su film Kodak BioMax XAR, sviluppate e scansionate utilizzando un densitometro Bio-Rad GS800. La concentrazione di questo composto per la quale la fosforilazione di FLT3 o STAT5 è inibita al 50% della sua linea di base (IC50) viene determinata utilizzando l'analisi di regressione lineare delle curve dose-risposta. Per l'analisi diretta di FLT3 e STAT5 in blasti circolanti, il sangue periferico viene raccolto in provette eparinate e prontamente raffreddato su ghiaccio. I campioni vengono centrifugati per 10 minuti a 900 g, a 4 °C. Il plasma viene rimosso e conservato congelato a –80 °C. Il buffy coat viene accuratamente trasferito in PBS ghiacciato, stratificato su Ficoll-Hypaque refrigerato e centrifugato per 5 minuti a 600 g, a 4 °C. Tutte le fasi successive vengono eseguite a 4 °C. Le cellule mononucleate vengono raccolte e lavate rapidamente una volta in tampone di lisi dei globuli rossi (0.155 M NH4Cl, 0.01 M KHCO3, 0.1 mM EDTA), quindi lavate una volta in PBS. Le cellule vengono quindi lisate come descritto per l'analisi di FLT3 e STAT5.
Saggio cellulare: [1]
  • Linee cellulari

    MOLM-13 and RS4;11 cells

  • Concentrazioni

    33nM, 75nM, 0.1μM, 0.3μM and 0.15μM

  • Tempo di incubazione

    24, 48, and 72 hours

  • Metodo

    Cell viability is determined by the sodium 3′-[1-(phenylaminocarbonyl)-3, 4-tetrazolium]-bis (4-methoxy-6-nitro) benzene sulfonic acid hydrate assay after incubation with or without KW-2449 for 72 hours at 37 °C. The number of viable cells is determined using the Cell Proliferation Kit II. For cell-cycle analysis, MOLM-13 and RS4;11 cells are treated with this compound. After 24, 48, and 72 hours of incubation at 37 °C, DNA contents are analyzed. Cell cycle distribution of K562, TCC-Y, and TCC/Ysr is analyzed 24 hours after treatment with this chemical or imatinib.
Studio sugli animali:[3]
  • Modelli animali

    CBySmn.CB17-Prkdsscid/J (BALB/C) mice are injected with BV173/E255K/Luc cl4 cells.

  • Dosaggi

    32 mg/kg/day, 5 days/week

  • Somministrazione

    Orally (p.o.) administered

Riferimenti

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19541823/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19029442/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21474579/

Convalida del prodotto da parte del cliente

<p>Western blot analysis of p-histone and histone. 0-10μM KW2449 was added.</p><div><div> </div></div><p> </p>

, , Dr. Zhang of Tianjin Medical University

Sellecks KW-2449 È stato citato da 12 Pubblicazioni

Integrative analysis of drug response and clinical outcome in acute myeloid leukemia [ Cancer Cell, 2022, S1535-6108(22)00312-9] PubMed: 35868306
A community challenge for a pancancer drug mechanism of action inference from perturbational profile data [ Cell Rep Med, 2022, 3(1):100492] PubMed: 35106508
Phosphorylation of SHP2 at Tyr62 Enables Acquired Resistance to SHP2 Allosteric Inhibitors in FLT3-ITD-Driven AML [ Cancer Res, 2022, 82(11):2141-2155] PubMed: 35311954
KW-2449 and VPA exert therapeutic effects on human neurons and cerebral organoids derived from MECP2-null hESCs [ Stem Cell Res Ther, 2022, 13(1):534] PubMed: 36575558
Evaluation of CML TKI Induced Cardiovascular Toxicity and Development of Potential Rescue Strategies in a Zebrafish Model [ Front Pharmacol, 2021, 12:740529] PubMed: 34733159
Mechanisms of Oncogenesis in the Primary Liver Cell Cancer [ DTIC, 2021, 53] PubMed: None
The Global Phosphorylation Landscape of SARS-CoV-2 Infection [ Cell, 2020, 182(3):685-712.e19] PubMed: 32645325
Synergistic Anti Leukemia Effect of a Novel Hsp90 and a Pan Cyclin Dependent Kinase Inhibitors. [ Molecules, 2020, 8;25(9) pii: E2220] PubMed: 32397330
Small-Molecule and CRISPR Screening Converge to Reveal Receptor Tyrosine Kinase Dependencies in Pediatric Rhabdoid Tumors. [ Cell Rep, 2019, 28(9):2331-2344] PubMed: 31461650
Drug Target Commons: A Community Effort to Build a Consensus Knowledge Base for Drug-Target Interactions [Tang J Cell Chem Biol, 2018, 25(2):224-229] PubMed: 29276046

POLITICA DI RESO
La politica di reso incondizionato di Selleck Chemical garantisce ai nostri clienti unesperienza di acquisto online senza problemi. Se non sei in alcun modo soddisfatto del tuo acquisto, puoi restituire qualsiasi articolo entro 7 giorni dalla ricezione. In caso di problemi di qualità del prodotto, sia relativi al protocollo che al prodotto, puoi restituire qualsiasi articolo entro 365 giorni dalla data di acquisto originale. Si prega di seguire le istruzioni seguenti per la restituzione dei prodotti.

SPEDIZIONE E CONSERVAZIONE
I prodotti Selleck vengono trasportati a temperatura ambiente. Se ricevi il prodotto a temperatura ambiente, ti assicuriamo che il Dipartimento di Ispezione Qualità di Selleck ha condotto esperimenti per verificare che la conservazione a temperatura normale per un mese non influirà sullattività biologica dei prodotti in polvere. Dopo la raccolta, conservare il prodotto secondo le indicazioni descritte nella scheda tecnica. La maggior parte dei prodotti Selleck è stabile nelle condizioni raccomandate.

NON PER USO UMANO, DIAGNOSTICO VETERINARIO O TERAPEUTICO.