Idarubicin HCl

Idarubicin ha una significativa attività citotossica contro sferoidi multicellulari, comparabile agli effetti antiproliferativi sulle cellule monostrato. [1] Idarubicin inibisce il CYP450 2D6.[2] Idarubicin è circa 57,5 volte e 25 volte più attiva della doxorubicina e dell'epirubicina, rispettivamente. Idarubicin è in grado di superare la resistenza ai farmaci multipli mediata dalla P-glicoproteina. [3] Idarubicin inibisce la formazione di radicali superossido dei PMN. [4] Idarubicin potrebbe essere accoppiata agli anticorpi monoclonali (anti-Ly-2.1, anti-L3T4 o anti-Thy-1) con mantenimento della solubilità proteica e dell'attività anticorpale. [5] Idarubicin inibisce la proliferazione delle cellule NALM-6 con un IC50 di 12 nM. [6]

La riduzione di Idarubicin dipende dalle chetone reduttasi e procede in modo più stereoselettivo rispetto alla maggior parte dei chetoni, dando origine quasi esclusivamente all'epimero (13S). L'elevata stereospecificità nella riduzione di Idarubicin potrebbe derivare dall'induzione chirale dovuta alla presenza di centri asimmetrici vicino al gruppo carbonilico in Idarubicin. [7]

• Esperimenti di metabolismo del CYP450

  La valutazione del metabolismo di Idarubicin da parte degli isoenzimi CYP450 3A4, 2D6, 2C8, 2C9 e 1A2 viene completata utilizzando proteine CYP450 umane isolate per ciascuna isoforma. Per queste valutazioni viene utilizzato il metodo di test di inibizione del P450 ad alto rendimento. Gli esperimenti di metabolismo sono progettati per indagare le seguenti proprietà di ciascun farmaco: (1) se Idarubicin è un substrato degli isoenzimi CYP450 3A4, 2C8, 2C9, 1A2 o 2D6; (2) se il metabolismo è influenzato da inibitori noti di ciascun isoenzima; (3) se Idarubicin è inibitore degli isoenzimi CYP450; e (4) se la caspofungina o l'itraconazolo inibiscono il metabolismo del CYP450 di Idarubicin. Dibenzilfluoresceina (DBF) (CYP3A4, CYP2C8, CYP2C9), 3-ciano-7-etossicumarina (Cyp1A2) e 7-metossi-4-(aminometil)-cumarina (MAMC) (CYP2D6) sono i substrati noti utilizzati come controlli per confermare l'attività dell'isoenzima rispettiva e valutare gli effetti di Idarubicin sull'attività dell'isoenzima. Inoltre, ketoconazolo, quercetina, suflaphenazolo, furafillina e chinidina sono utilizzati come inibitori di controllo del CYP450 per gli isoenzimi 3A4, 2C8, 2C9, 1A2 o 2D6, rispettivamente. Il substrato, l'inibitore più Idarubicin come indicato vengono aggiunti a ciascun campione proteico e incubati per 20-60 minuti, come raccomandato dal produttore, a 37 °C. Le reazioni vengono interrotte con una soluzione di solvente organico e quindi i campioni vengono analizzati mediante lettore di piastre a fluorescenza, se appropriato. Per ogni esperimento, vengono preparati campioni di controllo con una quantità nota di substrato e metabolita sintetizzato, in assenza dell'isoenzima, per confronti qualitativi. Tutti gli esperimenti vengono eseguiti in triplicato.

• Linee cellulari

  NALM-6 cells

• Concentrazioni

  0.1 nM-10 μM

• Tempo di incubazione

  24 hours

• Metodo

  The anti-proliferative activity of the Idarubicin in the conjugate is compared to that of free drug by measuring the inhibition of [³H]thymidine uptake. Briefly, NALM-6 cells (1.5 × 10⁶/mL) are added to a flat-bottomed microtitre plate (100 μL/well) and incubated for 1 hours at 37ºC. Free Idarubicin and Idarubicin-mAb conjugates are sterilised by filtration and diluted in sterile PBS; various concentrations are added to the wells (100 μL/well) in duplicate and the plates are incubated at 37ºC, 7% CO₂ for 24 hours. Following incubation, 50 μL medium containing 1 μCi [³H]thymidine is added to each well and the plates are incubated for a further 4 hours. Cells are harvested onto glass-fibre filter-paper, dried and counted in a scintillation counter. Specificity studies are performed using the same technique where the ability of Idarubicin-anti-CD19 conjugates to kill CD19 + cells is compared to the cytotoxicity of irrelevant Idarubicin-JGT conjugates. NALM-6 cells (1.5× 10⁶/mL, 300 μL tube) are incubated for 30 rain on ice with various concentrations of Idarubicin-anti-CD 19 or Idarubicin-JGT conjugates. Following three washes in ice-cold RPMI-1640 medium (4 mL/wash), the cells are resuspended in fresh medium and transferred to 96-well plates (100 μL/well). Each tube is set up in duplicate and two wells are plated out per tube (a total of 4 wells per drug concentration). Cells are pulsed with [³H]thymidine 24 hours later and harvested.

• Modelli animali

  Rat, rabbit, mouse, dog

• Dosaggi

  2 mg/kg, 0 mg/kg -75 mg/kg, 3 mg/kg and 0 mg/kg -75 mg/kg

• Somministrazione

  Administered via i.v.