FTY720 (Fingolimod) Hydrochloride

L'effetto inibitorio di S1P è rovesciato da varie concentrazioni di FTY720, con un effetto IC50 di 173 nM. Inoltre, FTY720 (10 nM) da solo non esercita alcun effetto sull'espressione delle molecole co-stimolatorie. FTY720 inverte l'aumento dell'espressione di HLA-I indotto da S1P sia per le percentuali di cellule che per il MFI, confrontando l'effetto di S1P con l'effetto della combinazione di S1P con FTY720. [1] FTY720-P a dosi medie e alte migliora anche i livelli di TGF-β1. L'espressione di mRNA di TGF-β1 e Foxp3 è sovraregolata nel gruppo FTY720-P a dose alta. La proliferazione delle cellule T effettrici è soppressa significativamente nel gruppo FTY720-P a dosi medie e alte con un rapporto cellule Treg/Teff di 1:1. Con un rapporto di 1:1, la proliferazione delle cellule T effettrici è soppressa anche nel gruppo FTY720 a dose alta. [2]

FTY720 è efficace nei xenotrapianti di ALL Ph⁺ ma non Ph^- utilizzando un modello di malattia precoce. FTY720 produce una significativa riduzione del carico di malattia nei xenotrapianti di ALL Ph⁺ utilizzando un modello di malattia precoce. I xenotrapianti di ALL Ph⁺ umani rispondono a FTY720 con una riduzione dell'80% della malattia complessiva se il trattamento è stato iniziato precocemente. Al contrario, il trattamento di topi con FTY720 non comporta una riduzione della leucemia rispetto ai controlli utilizzando quattro xenotrapianti di ALL Ph^- umani separati. [3]

• Linee cellulari

  Immature DCs

• Concentrazioni

  10 nM

• Tempo di incubazione

  4 hours

• Metodo

  Immature DCs are left intact or are incubated with 2 μM S1P, 10 nM FTY720, 10 nM SEW2871 or the combinations of S1P with these drugs for 4 hours. As a control 1 μg/mL LPS is used. The cells are washed and incubated in a 96-well plate (v-bottom, 2 × 10⁵ cells per well), washed again and resuspended in PBS buffer containing 0.1% sodium azide. They are labeled with 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human CD80, 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human CD83, 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human CD86, 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human HLA-class I, 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human HLA-DR, 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human HLA-E, or 1 μg/mL FITC-conjugated mouse IgG as a control. The cells are washed twice, and examined in the flow cytometer. Markers are set according to the isotype control FITC-conjugated mouse IgG. To stain NK cells with antibodies for various NK cell activating receptors, they are either left untreated or incubated with 2 μM S1P for 4 hours, washed and stained with 1 μg/mL PE-conjugated mouse anti-human NKp30 (CD337), 1 μg/mL PE-conjugated mouse anti-human NKp44 (CD336), 1 μg/mL PE-conjugated mouse anti-human NKG2D (CD314), or as a control 1 μg/mL PE-conjugated mouse IgG1, for 45 min at 4 °C. NK cells are also stained with 1 μg/mL FITC-conjugated anti-killer inhibitory receptor (KIR)/CD158 antibody which recognizes KIR2DL2, KIR2DL3, KIR2DS2 and KIR2DS4, and as a control with FITC-conjugated mouse IgG. The cells are washed twice, and examined in the flow cytometer. Markers are set according to the isotype control PE-conjugated or FITC-conjugated mouse IgG.

• Modelli animali

  NOD/SCIDγc^−/− mice bearing ALL cells.

• Dosaggi

  5 mg/kg/day, 10 mg/kg/day

• Somministrazione

  Administered via i.p.