In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO
40%PEG300
5%Tween80
50%ddH2O
Convalidato dai laboratori Selleck. Se sono necessarie modifiche a questa formulazione, contattare il nostro team di vendita per test personalizzati.
2.000mg/ml
(8.61mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 40 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution
5% DMSO
95% Corn oil
Convalidato dai laboratori Selleck. Se sono necessarie modifiche a questa formulazione, contattare il nostro team di vendita per test personalizzati.
1.400mg/ml
(6.03mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 28 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile. * Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto. * Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)
Preparazione delle soluzioni stock
Attività biologica
Descrizione
Costunolide (NSC 106404), un composto sesquiterpenico naturale con molteplici attività biologiche; inibisce la FPTase con una IC50 di 20 μM, e inibisce anche la Telomerase con una IC50 di 65-90 μM.
Target
FPTase
Telomerase (MDA-MB-231)
Telomerase (MCF-7)
20 μM
65 μM
90 μM
In vitro
Costunolide inibisce la crescita e l'attività della Telomerase delle cellule MCF-7 e MDA-MB-231 in modo dipendente dalla concentrazione e dal tempo. Questo composto inibisce anche il processo di farnesilazione della lamina-B umana da parte della farnesil-protein-transferasi (FPTase), in modo dose-dipendente. Il trattamento continuo di questa sostanza chimica per 48 ore diminuirà significativamente la proliferazione delle cellule tumorali umane (A549, SK-OV-3, SK-MEL-2, XF498 e HCT-1) in modo dose-dipendente. Induce l'apoptosi tramite la transizione della permeabilità mitocondriale mediata da ROS e il rilascio di citocromo C nel citosol nelle cellule di leucemia umana HL-60. Uno studio recente indica che questo composto mostra una significativa attività antifungina, inclusi Trichophyton mentagrophytes, T.simlii, T.rubrum, e così via.
In vivo
Costunolide inibisce la risposta angiogenica bloccando la via di segnalazione del fattore angiogenico. In un saggio di micropocket corneale di topo, questo composto riduce la neovascolarizzazione stimolata dal VEGF nei topi.
L'attività della Telomerase viene misurata mediante il saggio TRAP utilizzando il kit di rilevamento della Telomerase TRAPez, che include primer di un controllo interno (IC) da 36 bp per quantificare l'amplificazione dell'attività della Telomerase all'interno di un intervallo lineare prossimo a 2,5 log. Per il trattamento con RNasi, 10 μL di estratto vengono incubati con 1 μg di RNasi a 37 °C per 20 minuti. I prodotti del saggio TRAP vengono risolti mediante elettroforesi in un PAGE non denaturante al 12% in un tampone contenente 0,5 × Tris-borato EDTA e rilevati mediante autoradiografia. Per la quantificazione dei prodotti TRAP, i gel essiccati vengono esposti a una Fuji Imaging Plate a temperatura ambiente. I risultati vengono corretti per il background e un valore standard di 100 viene assegnato al segnale delle cellule di controllo non trattate. Le intensità del segnale delle cellule trattate con questo composto vengono confrontate con lo standard ed espresse come una frazione del valore massimo di 100.
1) Plate 500-10,000 cells in 200 μL media per well in a 96 well plate. Leave 8 wells empty for blank controls.
2) Incubate (37 °C, 5% CO2) overnight to allow the cells to attach to the wells.
3) Add 2 μL of Costunolide dissolved in DMSO to each well. Place on a shaking table, 150 rpm for 5 minutes, to thoroughly mix the samples into the media.
5) Incubate (37 °C, 5% CO2) for 48 hours to allow this compound to take effect.
6) Make 2 mL or more of MTT solution per 96 well plate at 5 mg/mL in PBS. Do not make a stock as MTT in solution is not stable long-term.
7) Add 20 μL MTT solution to each well. Place on a shaking table, 150 rpm for 5 minutes, to thoroughly mix the MTT into the media.
8) Incubate (37 °C, 5% CO2) for 1-5 hours to allow the MTT to be metabolized.
9) Dump off the media. (Dry plate on paper towels to remove residue if necessary.
10) Resuspend formazan (MTT metabolic product) in 200 μL DMSO. Place on a shaking table, 150 rpm for 5 minutes, to thoroughly mix the formazan into the solvent.
11) Read optical density at 560 nm and subtract background at 670 nm. Optical density should be directly correlated with cell quantity.
Costunolide enhances cisplatin-induced cytotoxicity in hypopharyngeal SCC FaDu cells by increasing the production of reactive oxygen species
[ Pathol Res Pract, 2022, 236:153966]
Amelioration of Benign Prostatic Hyperplasia by Costunolide and Dehydrocostus Lactone in Wistar Rats.
[ World J Mens Health, 2019, 10.5534/wjmh.190053]
New sesquiterpene lactones from sunflower root exudate as germination stimulants for Orobanche cumana.
[Raupp FM, et al. J Agric Food Chem, 2013, 61(44):10481-7]
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