Camptothecin (CPT)

N. catalogoS1288 Lotto:S128809

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Dati tecnici

Formula

C20H16N2O4
Peso molecolare 348.35 Numero CAS 7689-03-4
Solubilità (25°C)* In vitro DMSO 4 mg/mL (11.48 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile.
* Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto.
* Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)

Preparazione delle soluzioni stock

Attività biologica

Descrizione Camptothecin (CPT) è un inibitore specifico della DNA topoisomerase I (Topo I) con un IC50 di 0,68 μM in un saggio senza cellule. Camptothecin induce l'apoptosis nelle cellule tumorali tramite vie mitocondriali mediate da microRNA-125b. Fase 2.
Target
Topo I
(Cell-free assay)
0.68 μM
In vitro Camptothecin (CPT), un alcaloide vegetale originariamente isolato da *Camptotheca acuminate* nel 1966, è noto per arrestare le cellule durante la fase S della mitosi. Questo composto mostra una potenza nanomolare nella citotossicità contro molte linee cellulari tumorali umane, inclusi HT29, LOX, SKOV3 e SKVLB, con valori di IC50 che vanno da 37 nM a 48 nM. In combinazione con TNF, induce apoptosis negli epatociti primari di topo, con un valore di IC50 di 13 μM. Ha anche abrogato l'attivazione di NF-κB indotta dal TNF, così come l'espressione del fattore 2 associato al recettore del TNF (TRAF2), della proteina inibitrice dell'apoptosis legata all'X (X-IAP) e della proteina inibitrice di FLICE (FLIP). Nelle cellule HCT116, CPT (5 μM) induce la degradazione mediata dal proteasoma della proteina della leucemia a linea mista 5 (MLL5), che porta alla fosforilazione di p53 a Ser392. A causa della sua bassa solubilità e degli effetti avversi, sono stati sviluppati vari analoghi, e due di essi, topotecan e irinotecan, sono stati approvati dalla FDA e sono utilizzati nella chemioterapia antitumorale.
In vivo Camptothecin (CPT) (8 mg/kg) mostra un'inibizione completa della crescita e una regressione in xenotrapianti di topo di vari tumori, inclusi tumori del colon, polmone, seno, stomaco e ovaio. Nei topi, combinazioni di questo composto (50 mg/kg) e TNF (5 e 7 μg/kg), ma non da solo, inducono danni al fegato.

Protocollo (da riferimento)

Saggio della chinasi:[2]
  • Saggio del complesso clivabile della Topoisomerase I

    Topoisomerase I viene isolata dal timo di vitello ed è priva di topoisomerase II. Tutte le reazioni vengono eseguite in volumi di 10 mL di tampone di reazione (50 mM Tris-HCl, pH 7.5, 100 mM KCl, 0.5 mM EDTA e 30 pg/mL BSA) in piastre per microtitolazione. Questo composto viene sciolto in DMSO a 10 mg/mL e diluito serialmente in piastre per microtitolazione a 96 pozzetti a cui vengono aggiunti il DNA pBR322 marcato con 32P all'estremità e l'enzima topoisomerase. La miscela di reazione viene incubata a temperatura ambiente per 30 minuti e quindi la reazione viene interrotta aggiungendo 2 mL di una miscela di sodio dodecil solfato e proteinasi K (concentrazioni finali rispettivamente dell'1,6% e 0,14 mg/mL). Le piastre vengono riscaldate a 50 °C per 30 minuti, vengono aggiunti 10 mL di miscela di arresto standard contenente 0,45 N NaOH per generare DNA a singolo filamento, e i campioni vengono elettroforesi in gel di agarosio all'1,5% in tampone TBE. I gel vengono trasferiti su carta di nitrocellulosa, essiccati ed esposti a pellicola a raggi X. Le unità di clivaggio vengono calcolate dalle autoradiografie e tracciate in funzione della concentrazione logaritmica del farmaco. Vengono quindi ottenuti i valori di IC50. Camptothecin (CPT) viene utilizzato come composto di prova.
Saggio cellulare:[2]
  • Linee cellulari

    U87MG, A549 and H838 cells

  • Concentrazioni

    0.17 nM–10 mM

  • Tempo di incubazione

    48 hours

  • Metodo

    Tumor cells are plated in 100 μL of medium in 96-well microtiter plates at a density of 1500 to 4000 cells per well and allowed to adhere overnight. Cells are incubated with Camptothecin (CPT) for 48 hours and then with fresh medium for 48 hours. This compound at each concentration is added in quadruplicate. Following a 4-hour incubation of treated cells with MTT, the reduced dye product is extracted from the cells with 0.2 mL of DMSO followed by 50 μL of Sorensen's buffer. The plates are shaken briefly, and the absorbance at 570 nm is read and quantitated. Curves are fitted to the MTT assay data using a four-parameter logistic equation.
Studio sugli animali:[3]
  • Modelli animali

    Nude mice (NIH-I high fertility strain) bearing xenografts of CASE, SW48, DOY, SPA, and CLO cells

  • Dosaggi

    0–8 mg/kg

  • Somministrazione

    Administered via i.m. or i.v. injection

Riferimenti

  • http://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/ja00968a057
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7853331/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2032244/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15122760/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21423215/

Convalida del prodotto da parte del cliente

Growth suppression by UBE2M silencing is enhanced by DNA damaging agents. Growth sensitivity of HEY cells in the presence of Camptothecin(CPT) was monitored using clonogenic assay.

Dati da [ PLoS One , 2014 , 9(7), e101844 ]

<p>U2OS cells transfected with siRNA oligonucleotides were treated with DMSO or camptothecin (1 μM, 1 h) and DNA-PKcs autophosphorylation at S2056 was monitored. Arrow indicates the hyperphosphorylated form of CtIP.</p>

Dati da [ EMBO Rep , 2010 , 11(12), 962-8 ]

<p>CtIP and exonuclease 1 protect cells from chromosomal damage. (<strong>A</strong>) At 72 h after transfection with the indicated siRNA oligonucleotides, U2OS cells were treated with either DMSO or camptothecin (1 h, 1 μM; acute treatment) and survival was determined by colony formation. Data represent the mean±s.e.m. of five independent experiments. (<strong>B</strong>) Cell survival at low doses of camptothecin from the data shown in (<strong>A</strong>). Data represent the mean±s.e.m. of five independent experiments. (<strong>C</strong>) Cells transfected as in (<strong>A</strong>) were treated with either DMSO or camptothecin for 24 h (chronic treatment) and survival was determined by colony formation. Data represent the mean±s.e.m. of three independent experiments. (<strong>D</strong>) Metaphase spreads from cells transfected and treated as described in (<strong>A</strong>) were analysed for chromosomal aberrations. A total of 50 metaphase spreads was analysed for each sample. The percentages of metaphase spreads displaying the indicated numbers of radial chromosomes are shown. CNTL, control; DMSO, dimethyl sulphoxide; EXO1, exonuclease 1; siRNA, small interfering RNA.</p>

Dati da [ EMBO Rep , 2010 , 11(12), 962-8 ]

a. Effects of five concentrations of CXCL12 (0, 10, 50, 100, and 500 ng/ml) on apoptosis of NPC cells caused by 10 μM camptothecin were determined by the amount of cleaved PARP detected by Western blot.

Dati da [ , , Tumour Biol, 2016, 37(6):8169-79 ]

Sellecks Camptothecin (CPT) È stato citato da 164 Pubblicazioni

Non-canonical functions of DNMT3A in hematopoietic stem cells regulate telomerase activity and genome integrity [ Cell Stem Cell, 2025, S1934-5909(25)00256-5] PubMed: 40680747
Inherited deficiency of DIAPH1 identifies a DNA double strand break repair pathway regulated by γ-actin [ Nat Commun, 2025, 16(1):4491] PubMed: 40368919
A novel biosensor for the spatiotemporal analysis of STING activation during innate immune responses to dsDNA [ EMBO J, 2025, 10.1038/s44318-025-00370-y] PubMed: 39984755
DSCC1 restrains 53BP1/RIF1 signaling at DNA double-strand breaks to promote homologous recombination repair [ Cell Rep, 2025, 44(4):115452] PubMed: 40117291
Steroid-Modulated Transcription Synergistically Forms DNA Double-Strand Breaks With Topoisomerase II Inhibitor [ Cancer Sci, 2025, 10.1111/cas.70081] PubMed: 40231641
The novel role of LCK and other PcDEGs in the diagnosis and prognosis of sepsis: Insights from bioinformatic identification and experimental validation [ Int Immunopharmacol, 2025, 149:114194] PubMed: 39904039
The Kinase Inhibitor GNF-7 Is Synthetically Lethal in Topoisomerase 1-Deficient Ewing Sarcoma [ Cancers (Basel), 2025, 17(15)2475] PubMed: 40805174
Peroxiredoxin 1 inhibits tumorigenesis by activating the NLRP3/GSDMD pathway to induce pyroptosis of colorectal cancer cells [ World J Gastroenterol, 2025, 31(36):111557] PubMed: 41025079
Discovery and Characterization of Small Molecule Inhibitors Targeting Exonuclease 1 for Homologous Recombination-Deficient Cancer Therapy [ ACS Chem Biol, 2025, 10.1021/acschembio.5c00117] PubMed: 40378357
DDX18 influences chemotherapy sensitivity in colorectal cancer by regulating genomic stability [ Exp Cell Res, 2025, 444(1):114344] PubMed: 39577603

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