CUDC-101

Specifico per le HDAC di classe I e classe II, CUDC-101 non inibisce le HDAC di classe III di tipo Sir. Questo composto mostra una debole attività contro altre chinasi proteiche tra cui KDR/VEGFR2, Lyn, Lck, Abl-1, FGFR-2, Flt-3 e Ret con IC50 di 0,85 μM, 0,84 μM, 5,91 μM, 2,89 μM, 3,43 μM, 1,5 μM e 3,2 μM, rispettivamente. Mostra un'ampia attività antiproliferativa in molti tipi di cellule tumorali umane con IC50 di 0,04-0,80 μM, esibendo una maggiore potenza e combinazioni di vorinostat nella maggior parte dei casi. Questa sostanza chimica inibisce potentemente le linee cellulari tumorali. [1] Inibisce la mutazione T790M dell'EGFR resistente sebbene i suoi effetti siano incompleti con un Amax di ~60% dell'attività enzimatica di picco dopo l'inibizione. Il trattamento con questo composto aumenta l'acetilazione degli istoni H3 e H4, così come l'acetilazione di substrati non istonici di HDAC come p53 e α-tubulina, in modo dose-dipendente in varie linee cellulari tumorali. Sopprime anche l'espressione di HER3, l'amplificazione di Met e la riattivazione di AKT nelle cellule tumorali. [2]

La somministrazione di CUDC-101 a 120 mg/kg/die induce la regressione tumorale nel modello di cancro al fegato Hep-G2, che è più efficace alla sua massima dose tollerata (25 mg/kg/die) e vorinostat a una dose a concentrazione equimolare (72 mg/kg/die). Questo composto inibisce la crescita di xenotrapianti di NSCLC H358 sensibili in modo dose-dipendente. Mostra anche una potente inibizione della crescita tumorale nel modello di xenotrapianto di NSCLC A549 resistente. Questa sostanza chimica produce una significativa regressione tumorale nel modello di cancro al seno MDA-MB-468 resistente, HER2-negativo, con sovraespressione di EGFR e nel modello di carcinoma a cellule squamose della testa e del collo (HNSCC) CAL-27 con sovraespressione di EGFR. Inoltre, inibisce la crescita tumorale nei modelli di cancro colorettale HCT116 mutante K-ras e di cancro pancreatico HPAC con espressione di EGFR/HER2 (neu). [1]

• Saggi di inibizione di HDAC, EGFR e HER2

  Le attività delle HDAC di Classe I e II sono valutate utilizzando il sistema Biomol Color de Lys. In breve, gli estratti nucleari di cellule HeLa sono utilizzati come fonte di HDAC. Diverse concentrazioni di CUDC-101 vengono aggiunte agli estratti nucleari di cellule HeLa in presenza di un substrato artificiale colorimetrico. Il rivelatore viene aggiunto alla fine del saggio e l'attività enzimatica viene misurata nel lettore di micropiastre Wallac Victor II 1420 a 405 nM. L'attività chinasica di EGFR e HER2 viene misurata utilizzando i kit di saggio chinasico HTScan EGF receptor e HER2. In breve, la proteina di fusione GST-EGFR viene incubata con un substrato peptidico biotinilato sintetico e varie concentrazioni di questo composto in presenza di 400 mM di ATP. Il substrato fosforilato viene catturato con piastre a 96 pozzetti rivestite di streptavidina. Il livello di fosforilazione viene monitorato mediante anticorpi secondari anti-fosfo-tirosina e marcati con europio. La soluzione di potenziamento viene aggiunta alla fine del saggio e l'attività enzimatica viene misurata nel lettore di micropiastre Wallac Victor II 1420 a 615 nM.

• Linee cellulari

  HCC827, H358, H460, HepG2, Hep3B2, Sk-Hep-1, Capan1, BxPc3, MCF-7, MDA-MB-231, and Sk-Br-3

• Concentrazioni

  Dissolved in DMSO, final concentrations ~10 μM

• Tempo di incubazione

  72 hours

• Metodo

  Cancer cell lines are plated at 5000 to 10000 cells per well in 96-well flatbottomed plates with varying concentrations of CUDC-101. The cells are incubated with this compound for 72 hours in the presence of 0.5% of fetal bovine serum. Growth inhibition is assessed by an adenosine triphosphate (ATP) content assay using the Perkin-Elmer ATPlite kit. Apoptosis is routinely assessed by measuring the activities of Caspase-3 and -7 using Apo-ONE Homogeneous Assay Kit.

• Modelli animali

  Female athymic mice (nude nu/nu CD-1) inoculated with Hep-G2, H358, A549, MDA-MB468, HCT116, CAL-27, HepG2, or HPAC

• Dosaggi

  ~120 mg/kg/day

• Somministrazione

  Administered via i.v.