BMS-754807

BMS-754807 inibisce efficacemente la crescita di un'ampia gamma di linee cellulari tumorali umane di diverse origini istologiche, incluse mesenchimali (sarcoma di Ewing, rabdomiosarcoma, neuroblastoma e liposarcoma), epiteliali (seno, polmone, pancreas, colon e gastriche) ed ematopoietiche (mieloma multiplo e leucemia), con valori di IC50 che vanno da 5 nM a 365 nM per le linee cellulari più sensibili. Questo composto inibisce la proliferazione delle cellule IGF-1R-Sal e delle cellule RH41 con IC50 di 7 nM e 5 nM. Inibisce la fosforilazione di IGF-1R nelle cellule IGF-1R-Sal, Rh41 e Geo con IC50 di 13 nM, 6 nM e 21 nM. Questo composto chimico inibisce la fosforilazione di Akt nelle cellule IGF-1R-Sal, Rh41 e Geo con IC50 di 22 nM, 13 nM e 16 nM. Induce una maggiore apoptosi nelle cellule Rh41 entro 24 ore, come indicato da un aumento del picco sub-G1 (23,1%), rispetto al controllo (2,4%). [1] Questo composto inibisce la fosforilazione di IGF-1R (IC50 = 13nM) e i bersagli a valle Akt (IC50 = 22nM) e MAPK (IC50 = 13nM) nella linea cellulare IGF-Sal con IC50 coerente con l'IC50 antiproliferativa (7 nM) in questa linea cellulare. La struttura cristallina di questo composto cocristallizzato con il dominio chinasi di IGF-1R mostra la triade di legami idrogeno donatore/accettore/donatore con Met1052 e Glu1050 all'interno della regione a cerniera della chinasi. [2] Mostra un valore mediano di EC50 di 0,62 μM contro 23 linee cellulari nel programma di test preclinici pediatrici (PPTP). [3]

BMS-754807 (12,5 mg/kg, per via orale) inibisce la fosforilazione di IGF-1R nel tumore e nel siero in topi nudi portatori di tumore IGF-1R-Sal. Questo composto inibisce la crescita tumorale in un gruppo selezionato di modelli di xenotrapianto tumorale epiteliale (IGF-1R-Sal, GEO e Colo205), ematopoietico (JJN3) e mesenchimale (RD1 e Rh41) con TGI che varia dal 53% al 115%. [1] Esso (6,25 mg/kg) raggiunge un'inibizione completa della crescita tumorale nel modello di topo transgenico con tumore IGF-Sal derivato, con un'inibizione correlata di pIGF-1R e pAKT. Il legame proteico per questo composto chimico varia dal 98,5% nel plasma di topo al 95,9% nel plasma umano. Esso provoca una clearance di 113 (mL/min)/kg, 20 (mL/min)/kg, 3,5 (mL/min)/kg e 41 (mL/min)/kg. [2] Questo composto (25 mg/kg) inibisce significativamente il tumore nei modelli murini di xenotrapianti KT-5 (Wilms), KT-14 (rabdoide), Rh28 (rabdomiosarcoma) e OS-1. [3]

• Saggi di inibizione della chinasi

  Lo screening primario per BMS-754807 è un saggio chinasico in vitro che utilizza l'enzima ricombinante del recettore IGF-1 umano in saggi biochimici con il peptide sintetico KKSRGDYMTMQIG come substrato fosfoaccettore. Il profilo di selettività viene valutato contro diverse enzimi ricombinanti che vengono generati presso BMS o acquistati esternamente. I saggi enzimatici vengono eseguiti in piastre a 384 pozzetti con fondo a U utilizzando un volume di reazione di 30 μL in tampone di saggio (100 mM Hepes pH 7.4, 10 mM MgCl₂, 0,015% Brij35 e 4 mM DTT). Le reazioni di 60 minuti sono avviate combinando ATP (concentrazione equivalente a K_m ATP), 1,5 μM di substrato peptidico marcato, enzima e questo composto. Le reazioni vengono terminate con EDTA. Le miscele di reazione vengono analizzate sul Caliper LabChip 3000 mediante separazione elettroforetica del substrato fluorescente e del prodotto fosforilato. I dati di inibizione vengono calcolati confrontandoli con le reazioni di controllo senza enzima per il 100% di inibizione e le reazioni con solo veicolo per lo 0% di inibizione. I composti vengono sciolti in DMSO, stock 10mM e valutati a undici concentrazioni. I valori di IC50 vengono derivati mediante analisi di regressione non lineare delle curve dose-risposta.

• Linee cellulari

  IGF-1R-Sal, RH41 and Geo cell lines

• Concentrazioni

  365 nM

• Tempo di incubazione

  72 hours

• Metodo

  Cells are grown at their optimal density in RPMI +GlutaMax supplemented with 10% heat-inactivated fetal bovine serum (FBS). Cell proliferation is evaluated by incorporation of ³H-thymidine into DNA after exposure of cells to this compound for 72 hours. Results are expressed as an IC50, which is the drug concentration required to inhibit cell proliferation by 50% compared with untreated control cells.

• Modelli animali

  IGF-1R-Sal, GEO, Colo205, JJN3, RD1 or Rh41 tumor–bearing nude mice

• Dosaggi

  150 mg/kg

• Somministrazione

  Orally