BIX 02188

N. catalogoS1530 Lotto:S153002

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Dati tecnici

Formula

C25H24N4O2
Peso molecolare 412.48 Numero CAS 1094614-84-2
Solubilità (25°C)* In vitro DMSO 43 mg/mL (104.24 mM)
Ethanol 3 mg/mL (7.27 mM)
Water Insoluble
In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO 40%PEG300 55%ddH2O

Convalidato dai laboratori Selleck. Se sono necessarie modifiche a questa formulazione, contattare il nostro team di vendita per test personalizzati.

 5.000mg/ml (12.12mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG 300, mix evenly to clarify it; then continue to add 550 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile.
* Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto.
* Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)

Preparazione delle soluzioni stock

Attività biologica

Descrizione BIX02188 è un inibitore selettivo di MEK5 con una IC50 di 4,3 nM, inibisce anche l'attività catalitica di ERK5 con una IC50 di 810 nM e non inibisce le chinasi strettamente correlate MEK1, MEK2, ERK2 e JNK2.
Target
MEK5
4.3 nM
In vitro BIX02188 blocca significativamente l'attività catalitica di MEK5 con IC50 di 4,3 nM e inibisce l'attività catalitica di ERK5 con IC50 di 0,83 μM. Non mostra attività contro le chinasi strettamente correlate MEK1, MEK2, ERK1, p38α, JNK2, TGFβR1, EGFR e STK16 con valori di IC50 di 1,8 μM per TGFβR1, 3,9 μM per p38α e >6,3 μM per altre chinasi. Il pretrattamento con BIX02188 inibisce la fosforilazione di ERK5 indotta dal sorbitolo nelle cellule HeLa in modo dose-dipendente e non mostra alcuna attività inibitoria contro la fosforilazione delle MAPK ERK1/2, p38 e JNK1/2. Il trattamento con BIX02188 da solo per 24 ore nelle cellule HeLa o HEK293 non mostra alcun effetto citotossico. BIX02188 inibisce l'attivazione trascrizionale di MEF2C attraverso la cascata di segnalazione MEK5/ERK5 nel sistema di espressione della luciferasi guidato da MEK5/ERK5/MEF2C attivo nelle cellule HeLa e HEK293 con valori di IC50 rispettivamente di 1,15 μM e 0,82 μM. BIX02188 inibisce anche la fosforilazione di BMK1 nelle cellule endoteliali microvascolari polmonari bovine (BLMEC) che sono stimolate con 300 μM H2O2, in modo dose-dipendente, con IC50 di 0,8 μM, specificamente bloccando la via del segnale MEK5. BIX02188 inverte completamente l'effetto inibitorio sulla mediazione del TNF; l'attivazione di JNK ha avuto un effetto simile sull'inibizione di BMK1, suggerendo che inibisce la segnalazione del TNF attraverso l'attivazione della via di segnalazione MEK5-BMK1.

Protocollo (da riferimento)

Saggio della chinasi:[1]
  • Saggio catalitico

    La proteina MEK5 isolata da un sistema di espressione di baculovirus viene utilizzata per misurare l'attività chinasica utilizzando il reagente di rilevamento PKLight ATP. Il saggio viene eseguito utilizzando 15 nM di GST-MEK5 e 0,75 μM di ATP in un tampone di saggio costituito da 25 mM Hepes, pH 7,5, 10 mM MgCl2, 50 mM KCl, 0,2% BSA, 0,01% CHAPS, 100 μM Na3VO4, 0,5 mM DTT e 1% DMSO in presenza di concentrazioni variabili di BIX02188. La miscela di reazione chinasica viene incubata per 90 minuti a temperatura ambiente seguita dall'aggiunta di 10 μL di un reagente di rilevamento dell'ATP per 15 minuti. Il segnale in unità di luce relative (RLU) viene misurato e i segnali RLU vengono convertiti in valori percentuali di controllo (POC) per la determinazione del valore di IC50.
Saggio cellulare:[1]
  • Linee cellulari

    HeLa cells

  • Concentrazioni

    Dissolved in DMSO, final concentration ~10 μM

  • Tempo di incubazione

    Pretreatment for 1.5 hours

  • Metodo

    The cells are serum starved for 20 hours prior to stimulation with sorbitol at a final concentration of 0.4 M for 20 minutes at 37 °C. BIX02188 is added 1.5 hours prior to the addition of sorbitol. The cells are harvested and lysed in 50 μL RIPA buffer containing Halt protease and phosphate inhibitors at 4 °C for 5-10 minutes. The lysates are centrifuged for 10 minutes at 14,000 rpm and 50 μL lysate is added to 50 μl 2× sample buffer and boiled for 4 minutes at 95 °C. A 20 µl sample is run on SDS–PAGE 10% Tris-glycine gels and transferred to nitrocellulose. Western blotting is done with appropriate antibodies.

Riferimenti

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18834865/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18358237/

Convalida del prodotto da parte del cliente

<p>Retrograde NGF increased BDNF expression in sensory neurons, which was mediated by the MEK/ERK pathway. In two-compartmented DRG-nerve culture, NGF (50 ng/mL) was added to the chamber containing the sensory axonal terminals. The expression of BDNF was examined in the DRG neuronal soma located in another chamber. After 12 h of NGF treatment, the level of BDNF was increased in the sensory neuronal cell bodies by 3 fold (compare B to A) when compared to control (E). The role of the MEK/ERK pathway in retrograde NGF-triggered BDNF up-regulation was determined by pre-treatment of the ganglia with inhibitors U0126 (C), PD98059 (D) or BIX02188 (E). All inhibitors significantly reduced NGF-evoked BDNF up-regulation in the ganglia when compared to vehicle treatment (F). Results were from 4 independent experiments for each treatment. Bar=80 μm. *, p＜0.05 vs all groups.</p>

Dati da [ Exp Neurol , 2012 , 238(2), 209-17 ]

Intracellular location of CD3ζ (left) and CD3ε (right). Activated human T CD4+ cells were treated with DMSO, BIX02188 (10 μM), or XMD8-92 (10 μM) for 1 h at 37°C, permeabilized, and stained with antibodies against CD3ζ (green) or CD3ε (green) and LAMP-1 (red). The samples were visualized by confocal microscopy, and representative images are presented. Original scale bars, 10 mm; n = 2.

Dati da [ , , J Leukoc Biol, 2016, 99(1):143-52 ]

Sellecks BIX 02188 È stato citato da 13 Pubblicazioni

Enhanced Long-Term Antibacterial and Osteogenic Properties of Silver-Loaded Titanium Dioxide Nanotube Arrays for Implant Applications [ Int J Nanomedicine, 2025, 20:3749-3764] PubMed: 40162336
MAP kinase ERK5 modulates cancer cell sensitivity to extrinsic apoptosis induced by death-receptor agonists [ Cell Death Dis, 2023, 14(11):715] PubMed: 37919293
MAP kinase ERK5 modulates cancer cell sensitivity to extrinsic apoptosis induced by death-receptor agonists [ Cell Death Dis, 2023, 10.1038/s41419-023-06229-6] PubMed: 37919293
Non-canonical Targets of HIF1a Impair Oligodendrocyte Progenitor Cell Function [ Cell Stem Cell, 2021, 28(2):257-272.e11] PubMed: 33091368
ERK5 Inhibition Induces Autophagy-Mediated Cancer Cell Death by Activating ER Stress [ Front Cell Dev Biol, 2021, 9:742049] PubMed: 34805151
Tumor-derived exosomes antagonize innate antiviral immunity. [ Nat Immunol, 2018, 19(3):233-245] PubMed: 29358709
Dual role of ERK5 in the regulation of T cell receptor expression at the T cell surface [Rovira-Clavé X, et al. J Leukoc Biol, 2016, 99(1):143-52] PubMed: 26302753
BAFF activation of the ERK5 MAP kinase pathway regulates B cell survival. [ J Exp Med, 2015, 212(6):883-92] PubMed: 25987726
Erk5 inhibits endothelialmigration via KLF2-dependent down regulation of PAK1 [Komaravolu RK, et al. Cardiovasc Res, 2015, 105(1):86-95] PubMed: 25388666
Increased IGF-IEc expression and mechano-growth factor production in intestinal muscle of fibrostenotic Crohn's disease and smooth muscle hypertrophy [ Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol, 2015, 309(11):G888-99] PubMed: 26428636

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