AR-A014418

N. catalogoS7435 Lotto:S743501

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Dati tecnici

Formula

C12H12N4O4S
Peso molecolare 308.31 Numero CAS 487021-52-3
Solubilità (25°C)* In vitro DMSO 62 mg/mL (201.09 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile.
* Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto.
* Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)

Preparazione delle soluzioni stock

Attività biologica

Descrizione AR-A014418 (GSK-3β Inhibitor VIII) è un inibitore di GSK3β selettivo e competitivo per l'ATP con IC50 e Ki di 104 nM e 38 nM in saggi acellulari, senza inibizione significativa su 26 altre chinasi testate.
Target
GSK-3β
(Cell-free assay)		 GSK-3β
(Cell-free assay)
38 nM(Ki) 38 nM(Ki)
In vitro AR-A014418 inibisce la fosforilazione della tau in un sito specifico della GSK3 (Ser-396) in fibroblasti 3T3 che esprimono la proteina tau umana a quattro ripetizioni con IC50 di 2,7 μM e protegge le cellule N2A coltivate dalla morte indotta dal blocco della via PI3K/PKB. Nelle sezioni ippocampali, questo composto inibisce la neurodegenerazione mediata dal peptide beta-amiloide. Mentre nelle cellule NGP e SH-5Y-SY, questa sostanza chimica riduce i marcatori neuroendocrini e sopprime la crescita delle cellule di neuroblastoma.
In vivo Nel modello murino di SLA con la SOD1 umana mutante G93A, AR-A014418 (0-4 mg/kg, i.p.) ritarda l'insorgenza dei sintomi, migliora l'attività motoria, rallenta la progressione della malattia e posticipa il punto finale della malattia. Inoltre, questo composto produce un effetto inibitorio sulla nocicezione indotta da acido acetico e formalina nei topi modulando la segnalazione dei recettori NMDA e metabotropici, nonché la trasmissione di TNF-α e IL-1β nel midollo spinale.
Caratteristiche Inibitore selettivo di GSK3 permeabile alle cellule.

Protocollo (da riferimento)

Saggio della chinasi:

[1]
  • Saggio di prossimità a scintillazione per GSK3

    Gli esperimenti di competizione vengono eseguiti in duplicato con 10 concentrazioni dell'inibitore in micropiastre a fondo trasparente. Il substrato peptidico biotinilato, biotina-AAEELDSRAGS(PO3H2)PQL, viene aggiunto a una concentrazione finale di 2 μM in un tampone di saggio contenente 6 milliunità di GSK3 umana ricombinante (miscela equimolare di α e β), 12 mM MOPS, pH 7,0, 0,3 mM EDTA, 0,01% β-mercaptoetanolo, 0,004% Brij 35, 0,5% glicerolo e 0,5 μg di albumina di siero bovino/25 μl e preincubato per 10-15 min. La reazione viene avviata con l'aggiunta di 0,04 μCi di [γ-33P]ATP e ATP non marcato in 50 mM Mg(Ac)2 a una concentrazione finale di 1 μM ATP e un volume di saggio di 25 μl. Vengono utilizzati controlli in bianco senza substrato peptidico. Dopo l'incubazione per 20 min a temperatura ambiente, ogni reazione viene terminata con l'aggiunta di 25 μl di soluzione di stop contenente 5 mM EDTA, 50 μM ATP, 0,1% Triton X-100 e 0,25 mg di perline SPA rivestite di streptavidina corrispondenti a ~35 pmol di capacità di legame. Dopo 6 ore la radioattività viene determinata in un contatore a scintillazione liquida. Le curve di inibizione vengono analizzate mediante regressione non lineare utilizzando GraphPad Prism.
Saggio cellulare:

[1]
  • Linee cellulari

    N2A cells

  • Concentrazioni

    ~50 μM

  • Tempo di incubazione

    24 h

  • Metodo

    Cell viability is assessed by calcein/propidium iodide uptake. Calcein AM is taken up and cleaved by esterases present within living cells, yielding yellowish-green fluorescence, whereas PI is only taken up by dead cells, which become orange-red fluorescent. In brief, N2A cells are cultured for 2 days in vitro and then treated with 50 μM LY-294002 in the presence of AR-A014418 or vehicle (DMSO) for 24 h. Subsequently, N2A cells are incubated for 30 min with 2 μM PI and 1 μM calcein-AM. The cultures are then rinsed three times with Hanks' buffered saline solution containing 2 mM CaCl2, and the cells are visualized by fluorescence microscopy using a Zeiss Axiovert 135 microscope. Three fields (selected at random) are analyzed per well (∼300 cells/field) in at least three different experiments. Cell death is expressed as percentage of PI-positive cells from the total number of cells. In every experiment, specific cell death is obtained after subtracting the number of dead cells present in vehicle-treated cultures.
Studio sugli animali:

[2]
  • Modelli animali

    ALS mouse model with the G93A mutant human SOD1

  • Dosaggi

    ~4 mg/kg

  • Somministrazione

    i.p.

Riferimenti

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12928438/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24521712/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17433298/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20705523/

Convalida del prodotto da parte del cliente

Protein levels of p-GSK3α/β (Tyr279/Tyr216, Ser21/Ser9) and total GSK3α/β in A549 cells with Lithium chloride, SB216763, TWS119 or ARA014418 treatment were assessed by immunoblotting

Dati da [ , , Cell Physiol Biochem, 2017, 42(3):1177-1191 ]

A. Dual-luciferase reporter assay showing β-catenin activity after treatment of 5 μM AR-A (n = 3). B. The influence of AR-A on the expression of β-catenin downstream targets in KCNQ1-overexpressing Huh7 and LM3 cells was determined by CCK-8 assay (n = 3).

Dati da [ , , Biochem Biophys Res Commun, 2018, 503(4):3100-3107 ]

Sellecks AR-A014418 È stato citato da 21 Pubblicazioni

A highly sensitive screening system to evaluate the reversibility of neuroendocrine prostate cancer to prostate adenocarcinoma [ Cancer Med, 2025, 14(5):e70047] PubMed: 40013333
Targeting ErbB and tankyrase1/2 prevent the emergence of drug-tolerant persister cells in ALK-positive lung cancer [ NPJ Precis Oncol, 2024, 8(1):264] PubMed: 39551860
Deficiencies in corin and atrial natriuretic peptide-mediated signaling impair endochondral ossification in bone development [ Commun Biol, 2024, 7(1):1380] PubMed: 39443661
Establishment and characterization of immortalized sweat gland myoepithelial cells [ Sci Rep, 2022, 12(1):7] PubMed: 34997030
Discovery of Novel Tacrine-Pyrimidone Hybrids as Potent Dual AChE/GSK-3 Inhibitors for the Treatment of Alzheimer's Disease [ J Med Chem, 2021, 64(11):7483-7506] PubMed: 34024109
Caspase-9 acts as a regulator of necroptotic cell death [ FEBS J, 2021, 10.1111/febs.15898] PubMed: 33899329
SOX2 enhances cell survival and induces resistance to apoptosis under serum starvation conditions through the AKT/GSK-3β signaling pathway in esophageal squamous cell carcinoma [ Oncol Lett, 2021, 21(4):269] PubMed: 33717266
Ribosomal S6 protein kinase 4 promotes radioresistance in esophageal squamous cell carcinoma [ J Clin Invest, 2020, 130(8):4301-4319] PubMed: 32396532
Suppression of histone deacetylases by SAHA relieves bone cancer pain in rats via inhibiting activation of glial cells in spinal dorsal horn and dorsal root ganglia. [ J Neuroinflammation, 2020, 22;17(1):125] PubMed: 32321538
Differences in the Sensitivity of Classically and Alternatively Activated Macrophages to TAK1 Inhibitor-Induced Necroptosis [ Cancer Immunol Immunother, 2020, 29] PubMed: 32472370

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