In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile. * Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto. * Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)
Preparazione delle soluzioni stock
Attività biologica
Descrizione
8-OH-DPAT (8-Hydroxy-DPAT) è un agonista classico di 5-HT1A con un pIC50 di 8,19. Questo composto ha una selettività quasi 1000 volte superiore per un sottotipo del sito di legame 5-HT1 e la sua emivita biologica è di 1,5 ore.
Target
5-HT1A (Cell-free)
8.19(pIC50)
In vitro
L'8-OH-DPAT (8-Hydroxy-DPAT) è solo debolmente efficace sul sottotipo 5-HT1B, con un pIC50 di 5,42 ± 0,08 (n = 5), e non ha alcun effetto sul legame 5-HT1B a concentrazioni inferiori a 100 nM. Questo composto è in grado di ridurre l'accumulo di lipofuscina derivata sia dall'autofagia che dai segmenti esterni dei fotorecettori, aumentare la protezione antiossidante e ridurre il danno ossidativo nelle cellule RPE umane coltivate.
In vivo
L'agonista selettivo del recettore 5-HT1A 8-OH-DPAT (8-Hydroxy-DPAT) inverte rapidamente le risposte ipotensive e bradicardiche stabilite durante emorragie gravi con una variabilità relativamente bassa dopo somministrazione endovenosa. È relativamente lipofilo e attraversa facilmente la barriera emato-encefalica.
Cells are exposed to H2O2 (200 µM) for 1 hour and either pre-or post treated with 8-OH-DPAT (8-Hydroxy-DPAT) (10 µM) for 24 hours. In the case of pretreatment all measurements are made 24 hr after H2O2 and for post treatment this compound is added immediately following H2O2 exposure. 5HT1A agonist treatment: To assess the ability of the 5-HT1A receptor agonist to reduce lipofuscin formation in cultured RPE cells, it is added to the culture medium every 48 hours at concentrations ranging from 0.1 to 20 µM. All experiments are undertaken in basal medium, and cells receiving vehicle alone (PBS) acted as negative controls. To determine if the effect of it is sustained following discontinuation of 5-HT1A receptor agonist treatment, this compound is discontinued after 28 days and the cells maintained in basal medium or fed POS for a further 28 days. To assess its ability to remove existing lipofuscin, autophagy-derived lipofuscin and phagocytic-derived lipofuscin are allowed to accumulate as described above and then it is added every second day for up to 28 days. To confirm that it is acting via the 5-HT1A receptor agonist we include the 5-HT1A receptor antagonist S(-)-UH-301 at 5 µM in some experiments. To determine the effect of timing of its treatment on oxidative stress markers, RPE cultures are either pre-treated with it (at 1 or 10 µM) for 3 or 24 hours prior to exposure to 200 µM H2O2 for 1 hour or treated with the 5HT1A agonist for 3 or 24 hours post-exposure to H2O2. Cells not exposed to oxidative stressor serve as a negative control, and cells exposed to oxidative stressor but not it serve as a positive control. Cells exposed to it only act as an additional control.
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