Home GPCR & G Protein PAR Antagonista Vorapaxar (MK-5348)

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Vorapaxar (MK-5348) PAR Antagonista

N. Cat.S8067

Vorapaxar (SCH 530348, MK-5348) è un potente e oralmente attivo antagonista del recettore della trombina (PAR-1) con un Ki di 8,1 nM.
Vorapaxar (MK-5348) PAR Antagonista Chemical Structure

Struttura chimica

Peso molecolare: 492.58

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Controllo Qualità (Quality Control)

Lotto: Purezza: 99.87%
99.87

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Linee cellulari Tipo di saggio Concentrazione Tempo di incubazione Formulazione Descrizione dell'attività PMID
HEK293 Function assay 15 mins Antagonist activity at human PAR1 expressed in HEK293 cells co-expressing Galpha15 assessed as inhibition of haTRAP-induced calcium mobilization preincubated for 15 mins followed by haTRAP addition by calcium-4 dye based FLIPR assay, IC50 = 0.064 μM. 28745507
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Informazioni chimiche, conservazione e stabilità (Chemical Information, Storage & Stability)

Peso molecolare 492.58 Formula

C29H33FN2O4

 Conservazione (Dalla data di ricezione)
N. CAS 618385-01-6 Scarica SDF Conservazione delle soluzioni stock

Sinonimi SCH 530348 Smiles CCOC(=O)NC1CCC2C(C1)CC3C(C2C=CC4=NC=C(C=C4)C5=CC(=CC=C5)F)C(OC3=O)C

Solubilità (Solubility)

In vitro
Lotto:

DMSO : 99 mg/mL (200.98 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Ethanol : 99 mg/mL

Water : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa Concentrazione Volume Peso molecolare
Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo
Lotto:

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante l'esperimento)

mg/kg g μL

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non c'è una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH2O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nell'aggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere all'aggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno d'acqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo d'azione (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
PAR-1
(Cell-free assay)
8.1 nM(Ki)
In vitro

SCH 530348 è una 3-fenilpiridina triciclica sintetica e un antagonista del recettore della trombina a base di himbacina, attivo per via orale. SCH 530348 mostra una potente inibizione dell'aggregazione piastrinica indotta dalla trombina con una IC50 di 47 nM e dell'aggregazione piastrinica indotta da haTRAP con una IC50 di 25 nM, mentre non mostra alcuna inibizione dell'aggregazione piastrinica indotta da altri agonisti come ADP, collagene e un peptide agonista di PAR-4. SCH 530348 non ha inoltre alcun effetto sul tempo di protrombina (PT), sul tempo di tromboplastina parziale (PTT) o sul tempo di tromboplastina parziale attivata (aPTT). Inoltre, SCH 530348 non provoca alcun aumento del tempo di sanguinamento o del sanguinamento chirurgico rispetto al controllo inattivo. SCH530348 è selettivo per PAR-1 quando testato su numerosi canali ionici e recettori, incluso il recettore PAR-4.

Saggio chinasico
Saggio di legame al PAR-1 in vitro
Le membrane piastriniche umane (700 mg) vengono preparate da 40 unità di piastrine umane fresche. Gli antagonisti del recettore della trombina vengono sottoposti a screening utilizzando una modifica del saggio di legame del radioligando del recettore della trombina. Le membrane piastriniche umane (40 μg) vengono incubate con 10 nM di [3H]haTRAP (alanina-p-fluorofenilalanina-arginina-cicloesilalanina-omoarginina-[3H]fenilalanina ammide) in presenza di composti a concentrazioni di 1 nM, 3 nM, 30 nM, 100 nM, 300 nM e 1 μM (5% DMSO concentrazione finale) in tampone di legame (50 mM Tris-HCl, pH 7,5, 10 mM MgCl2, 1 mM EGTA, 0,1% BSA). Le piastre vengono coperte e mescolate delicatamente con un vortex su uno shaker per piastre per 1 ora a temperatura ambiente. Le membrane incubate vengono raccolte utilizzando un Packard FilterMate Universal Harvester su piastre filtranti Packard UniFilter GF/C che vengono immerse per almeno 1 ora in 0,1% polietilenimmina e quindi lavate rapidamente quattro volte con 300 μL di tampone di legame freddo senza BSA. Il cocktail di scintillazione MicroScint 20 viene aggiunto a ciascun pozzetto e le piastre vengono contate in un contatore a scintillazione per micropiastre Packard TopCount. Il legame specifico è definito come il legame totale meno il legame non specifico osservato in presenza di un eccesso (50 μM) di haTRAP non marcato.
In vivo

SCH 530348 è ben assorbito in modelli di ratto (68%; 10 mg/kg) e di scimmia (82%; 1 mg/kg). Il Tmax è osservato a circa 3 h nei ratti e 1 h nelle scimmie. L'emivita di eliminazione è di 5,1 h nei ratti e 13 h nelle scimmie. La biodisponibilità orale è del 33% nei ratti e dell'86% nelle scimmie. In studi preclinici sulle piastrine di scimmie cynomolgus, la somministrazione orale di SCH 530348 a una dose superiore a 0,1 mg/kg ha comportato un'inibizione del 100% dell'aggregazione piastrinica indotta dal peptide agonista del recettore della trombina (TRAP) per 24 h con un recupero parziale che si verifica a 48 h.

Riferimenti

Applicazioni (Applications)

Metodi Biomarcatori Immagini PMID
Western blot AKT / JNK / NF-κB / GAPDH ATM / ATR / GSK / Cyclin D1 / GAPDH fibronectin / tubulin
S8067-WB-1
31059055
Immunofluorescence proinflammatory signaling PLP / Olig2
S8067-IF-1
25587041