Name: Nirogacestat (PF-03084014)
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S8018
Rating: 5 (21 reviews)

Vai a

Controllo Qualità (Quality Control)

Lotto: Purezza: 99.31%

99.31

Target correlati	HDAC Caspase Proteasome MMP HCV Protease Cysteine Protease Tyrosinase HIV Protease DPP Serine Protease
Altro Secretase Inibitori	DAPT RO4929097 (RG-4733) LY411575 Dibenzazepine (YO-01027) MK-0752 Avagacestat (BMS-708163) Semagacestat (LY450139) MDL-28170 L-685,458 NGP 555

Informazioni chimiche, conservazione e stabilità (Chemical Information, Storage & Stability)

Peso molecolare	489.64	Formula	C₂₇H₄₁F₂N₅O	Conservazione (Dalla data di ricezione)	3 anni-20°Cpolvere
N. CAS	1290543-63-3	Scarica SDF		Conservazione delle soluzioni stock	1 anno-80°Cin solvente 1 mese-20°Cin solvente
Sinonimi	PF-3084014			Smiles	CCCC(C(=O)NC1=CN(C=N1)C(C)(C)CNCC(C)(C)C)NC2CCC3=C(C2)C(=CC(=C3)F)F

Solubilità (Solubility)

In vitro
Lotto:

DMSO : 98 mg/mL (200.14 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Ethanol : 49 mg/mL

Water : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa	Concentrazione	Volume	Peso molecolare
=	×	×

Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo Lotto:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Validato dai laboratori Selleck. Se necessiti di modifiche a questa formulazione, contatta il nostro team di vendita per test personalizzati.	2.400mg/ml (4.90mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 48 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to make it clear; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante l'esperimento)

Dosaggio: mg/kg Peso medio degli animali: g Volume di dosaggio per animale:μL Numero di animali:

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non c'è una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH₂O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nell'aggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere all'aggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno d'acqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo d'azione (Mechanism of Action)

Targets/IC₅₀/Ki	gamma-secretase (cell-free assay) 6.2 nM
In vitro	Il Nirogacestat (PF-03084014) inibisce la scissione del recettore Notch in saggi cellulari utilizzando cellule HPB-ALL che ospitano mutazioni sia nei domini di eterodimerizzazione che PEST in Notch1 con IC50 di 13,3 nM. Downregola l'espressione dei geni bersaglio di Notch Hes-1 e cMyc nelle cellule HPB-ALL con IC50 di <1 nM e 10 nM, rispettivamente, e inibisce la crescita cellulare di un sottogruppo di linee cellulari umane di T-ALL (HPB-ALL, DND-41, TALL-1 e Sup-T1) attraverso l'induzione dell'arresto del ciclo cellulare e dell'apoptosis con IC50 di 30–100 nM. Questo composto riduce la proliferazione delle HUVEC con IC50 di 0,5 μM e diminuisce la formazione del lume con un valore di IC50 di 50 nM. Esso (1 μM) non ha effetto antiproliferativo nelle cellule MX1; tuttavia, inibisce la migrazione del 95%.
Saggio chinasico	saggio della γ-secretase
Saggio chinasico	Un frammento di DNA che codifica gli amminoacidi 596 - 695 dell'isoforma di 695 aa di APP (APP695) e la sequenza Flag (DYKDDDDK) al C-terminale viene generato mediante amplificazione PCR con oligonucleotidi opportunamente progettati e il cDNA di APP695. La Met che funge da sito di inizio della traduzione è il residuo 596 di APP695 (il residuo P1 rispetto al sito di clivaggio della β-secretase). Questo frammento di DNA viene inserito nel vettore di espressione procariotico pET2-21b. La proteina ricombinante, C100Flag, viene sovraprodotta in Escherichia coli [ceppo BL21(DE3)] e purificata mediante cromatografia su colonna Mono-Q. C100Flag (1,7 μM) viene incubato con membrane cellulari (0,5 mg/mL) in presenza di CHAPSO, CHAPS (3-[(3-colamidopropil)dimetilammonio]-1-propansolfonato) o Triton X-100 (0, 0,125, 0,25, 0,5 o 1%) in tampone B (50 mM Pipes, pH 7,0; 5 mM MgCl₂; 5 mM CaCl₂; 150 mM KCl) a 37°C. Le reazioni vengono interrotte aggiungendo RIPA (150 mM NaCl/1,0% NP-40/0,5% desossicolato di sodio; 0,1% SDS/50 mM Tris HCl, pH 8,0) e bollendo per 5 min. I campioni vengono centrifugati e le soluzioni del surnatante vengono saggiate per i peptidi Aβ mediante ECL. I prodotti correlati ad Aβ40 e Aβ42 derivanti dalla lavorazione mediata dalla γ-secretase di C100Flag possiedono una Met all'N-terminale e sono quindi definiti rispettivamente come M-Aβ40 e M-Aβ42. Analogamente, la soluzione del surnatante (0,125 mg/mL) da membrane cellulari HeLa estratte con CHAPSO (γ-secretase solubilizzata) viene incubata con C100Flag (1,7 μM) in tampone B contenente 0,25% di CHAPSO e successivamente saggiata per M-Aβ40 e M-Aβ42 utilizzando ECL. Questo composto, Nirogacestat (PF-03084014), è utilizzato nel contesto sperimentale.
In vivo	Nirogacestat (PF-03084014) somministrato oralmente in una singola dose di 200 mg/kg provoca una inibizione massima di NICD di circa l'80% nei tumori di xenotrapianto HPB-ALL. Mostra una robusta attività antitumorale in questa modalità con una inibizione massima della crescita tumorale di circa il 92% a una dose di 150 mg/kg, accompagnata da una significativa riduzione della colorazione di NICD/Notch1, dell'indice mitotico tumorale (Ki67) e dell'apoptosis (caspasi-3 attivata). A 120 mg/kg, questo composto induce apoptosis, antiproliferazione, riduce la capacità di auto-rinnovamento delle cellule tumorali, compromette la vascolarizzazione tumorale e diminuisce l'attività metastatica in topi portatori di tumori di cancro al seno HCC1599. Il suo trattamento mostra una significativa attività antitumorale in vari tipi di modelli di xenotrapianto mammario con un valore TGI di almeno il 50%.
Riferimenti	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20530712/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22806875/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10801983/

Applicazioni (Applications)

Metodi	Biomarcatori	Immagini	PMID
Western blot	N1ICD / Hes-1 / Hey-1 / p-MEK / MEK / c-PARP		23402814

Informazioni sullo studio clinico (Clinical Trial Information)

(dati da https://clinicaltrials.gov, aggiornato il 2024-05-22)

Numero NCT	Reclutamento	Condizioni	Sponsor/Collaboratori	Data di inizio	Fasi
NCT02338531	Withdrawn	Breast Cancer	Jules Bordet Institute	June 2015	Phase 2
NCT02299635	Terminated	Triple Negative Breast Neoplasms	Pfizer	February 3 2015	Phase 2
NCT02109445	Terminated	Metastatic Cancer Pancreas	Pfizer\|Academic GI Cancer Consortium (AGICC)	September 3 2014	Phase 2
NCT01876251	Terminated	Breast Cancer Metastatic	Pfizer	November 4 2013	Phase 1

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

Nirogacestat (PF-03084014) γ-Secretase inhibitor

Struttura chimica

Peso molecolare: 489.64