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L-NAME HCl NOS inhibitor

N. Cat.: S2877

L-NAME HCl (NG-Nitroarginine methyl ester, N-Nitro-L-arginine methylester) is a nonselective inhibitor of nitric oxide synthetases (NOS) for nNOS (bovine), eNOS (human), and iNOS (murine), with Ki of 15 nM, 39 nM and 4.4 μM, respectively. This compound can be used to induce animal models of Hypertension.
L-NAME HCl NOS inhibitor Chemical Structure

Struttura chimica

Peso molecolare: 269.69

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Controllo Qualità (Quality Control)

Lotto: Purezza: 99.94%
99.94

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Linee cellulari Tipo di saggio Concentrazione Tempo di incubazione Formulazione Descrizione dell'attività PMID
mouse BV2 cells Function assay 24 h Inhibition of Nitric oxide synthase activity in mouse BV2 cells assessed as LPS-induced NO production after 24 hrs by Griess reaction, IC50=18.9 μM 21377368
mouse RAW264.7 cells Function assay 17-20 h Antiinflammatory activity in mouse RAW264.7 cells assessed as inhibition of IFN-gamma/LPS-stimulated nitric oxide production after 17 to 20 hrs by Griess assay, IC50=27.13 μM 19359068
HUVEC Function assay Ability to inhibit conversion of [3H]L-Arg to [3H]L-citrulline catalyzed by endothelial NOS (e NOS) from HUVEC cells, IC50=2.7μM 11327580
DLD-1 Function assay Ability to inhibit conversion of [3H]L-Arg to [3H]L-citrulline catalyzed by inducible NOS (i NOS) from human DLD-1 cells, IC50=14μM 11327580
BV2 Function assay Inhibition of NOS-dependent nitric oxide production in mouse BV2 cells, IC50=36μM 17046255
BV2 Function assay Inhibition of nitric oxide synthase in mouse BV2 cells assessed as inhibition of LPS-induced NO production, IC50=20.1μM 18161942
BV2 Function assay Inhibition of iNOS-mediated NO production in LPS-induced mouse BV2 cells, IC50=25.8μM 18926710
BV2 Antiinflammatory assay 24 hrs Antiinflammatory activity in mouse BV2 cells assessed as inhibition of LPS-induced iNOS-dependent nitrite production after 24 hrs by Griess method, IC50=25.8μM 21028898
BV2 Function assay Inhibition of iNOS in mouse BV2 microglial cells assessed as NO production, IC50=25.8μM 21115251
RAW264.7 Function assay 1 hr Inhibition of LPS-induced nitric oxide production in mouse RAW264.7 cells preincubated with compound for 1 hr before exposure to LPS measured after 24 hrs by Griess reaction method, IC50=48.5μM 21435874
Sf9 Function assay 45 mins Inhibition of human recombinant eNOS expressed in Sf9 cells assessed as inhibition of conversion of [3H]-L-arginine to [3H]-L-citrulline after 45 mins by liquid scintillation counting, IC50=0.68μM 21923116
Sf9 Function assay 45 mins Inhibition of human recombinant nNOS expressed in Sf9 cells assessed as inhibition of conversion of [3H]-L-arginine to [3H]-L-citrulline after 45 mins by liquid scintillation counting, IC50=0.69μM 21923116
Sf9 Function assay 45 mins Inhibition of human recombinant iNOS expressed in Sf9 cells assessed as inhibition of conversion of [3H]-L-arginine to [3H]-L-citrulline after 45 mins by liquid scintillation counting, IC50=0.83μM 21923116
BV2 Function assay 24 hrs Inhibition of iNOS-mediated nitric oxide production in LPS-stimulated mouse BV2 cells measured after 24 hrs of post-stimulation by Griess reaction method, IC50=13.35μM 22115618
BV2 Function assay 1 hr Inhibition of LPS-induced NO production in mouse BV2 cells preincubated for 1 hr followed by LPS addition measured after 24 hrs by Griess assay, IC50=24.7μM 27588326
RAW264.7 Antiinflammatory assay 2 hrs Antiinflammatory activity in mouse RAW264.7 cells assessed as inhibition of LPS-induced nitric oxide production preincubated for 2 hrs followed by LPS stimulation measured after 18 hrs by Griess assay, IC50=30.6μM 28099011
SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells 29435139
SK-N-SH qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-SH cells 29435139
NB1643 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB1643 cells 29435139
RAW264.7 Anti-inflammatory assay 17 to 20 hr Anti-inflammatory activity in Mus musculus (mouse) RAW264.7 cells assessed as inhibition of IFN-gamma/LPS-induced NO production after 17 to 20 hr by Griess assay, IC50=23.21μM ChEMBL
RAW264.7 Anti-inflammatory assay 17 to 20 hr Anti-inflammatory activity in Mus musculus (mouse) RAW264.7 cells assessed as inhibition of IFN-gamma/LPS-induced nitric oxide production after 17 to 20 hr by Griess assay, IC50=26.21μM ChEMBL
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Informazioni chimiche, conservazione e stabilità (Chemical Information, Storage & Stability)

Peso molecolare 269.69 Formula

C7H15N5O4.HCl

 Conservazione (Dalla data di ricezione)
N. CAS 51298-62-5 Scarica SDF Conservazione delle soluzioni stock

Sinonimi NG-Nitroarginine methyl ester, N-Nitro-L-arginine methylester Smiles COC(=O)C(CCCN=C(N)N[N+](=O)[O-])N.Cl

Solubilità (Solubility)

In vitro
Lotto:

Water : 54 mg/mL

DMSO : Insoluble
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Ethanol : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa Concentrazione Volume Peso molecolare
Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo
Lotto:

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante l'esperimento)

mg/kg g μL

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non c'è una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH2O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nell'aggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere all'aggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno d'acqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo d'azione (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
nNOS
(Cell-free assay)
15 nM(Ki)
eNOS
(Cell-free assay)
39 nM(Ki)
In vitro
L'estere metilico di NG-nitro-L-arginina (L-NAME; a 0,1-100 mM) provoca un'inibizione dipendente dalla concentrazione della NO sintasi endoteliale Ca2(+)-dipendente da aorte suine. Questo composto provoca una contrazione endotelio-dipendente e un'inibizione del rilassamento endotelio-dipendente indotto dall'acetilcolina (ACh) negli anelli aortici. In un'altra ricerca, la vitalità delle cellule rMC-1 o BREC in 25 mM di glucosio è significativamente inferiore rispetto a 5 mM di glucosio, e questa morte cellulare è inibita da questa sostanza chimica in entrambi i tipi di cellule.
Saggio chinasico
Saggio enzimatico
L'ossidazione di L-NAME HCl (Nω-nitro-L-arginina metil estere cloridrato) è monitorata dalla conversione di [3H]- o [14C]-arginina in L-citrullina che separa L-citrullina da L-arginina mediante cromatografia Dowex 50x8-200 (Na). Le miscele di reazione tipiche (100 pL) contengono 50 mM HEPES, pH 7.0, 8 pM tetraidrobiopterina, 1 mM CaC12, 0.01 mg/mL calmodulina, 0.5 mM EDTA, 0.450 pM [14C]-arginina (30000 cpm) e 100-200 pM NADPH. L'ossidazione di NADPH a NADP+ catalizzata dalla cNOS è monitorata dalla riduzione dell'assorbanza a 340 nm con uno spettrofotometro Kontron 860 in un volume di 300 pL. Tutte le reazioni sono a 30 ℃ salvo diversa indicazione.
In vivo
L-NAME HCl (0,03-300 mg kg-1, i.v.) induce un aumento dose-dipendente della pressione arteriosa sistemica media accompagnato da bradicardia. Questo composto (100 mg kg-1, i.v.) inibisce significativamente le risposte ipotensive ad ACh e bradichinina. L'aumento della pressione sanguigna e la bradicardia prodotti da questa sostanza chimica sono invertiti dalla L-arginina (30-100 mg kg-1, i.v.) in modo dose-dipendente.
Riferimenti
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9395704/