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Hoechst 33342 Dyes Chimico

N. Cat.: S0485

Hoechst 33342 (Pibenzimol, bisBenzimide H 33342, HOE 33342, HO342) è un colorante fluorescente permeabile alla membrana in grado di colorare cellule vive. Questo composto si lega alle regioni del DNA ricche di adenina e timina nel solco minore e aumenta notevolmente la fluorescenza. Consente una facile visualizzazione del nucleo nelle cellule interfase e dei cromosomi nelle cellule mitotiche.
Hoechst 33342 Dyes Chimico Chemical Structure

Struttura chimica

Peso molecolare: 452.55

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Controllo Qualità (Quality Control)

Lotto: Purezza: 99.94%
99.94

Informazioni chimiche, conservazione e stabilità (Chemical Information, Storage & Stability)

Peso molecolare 452.55 Formula

C27H28N6O

Conservazione (Dalla data di ricezione) 3 years -20°C powder
N. CAS 23491-52-3 -- Conservazione delle soluzioni stock

Sinonimi Pibenzimol, bisBenzimide H 33342, HOE 33342, HO342 Smiles CCOC1=CC=C(C=C1)C2=NC3=C(N2)C=C(C=C3)C4=NC5=C(N4)C=C(C=C5)N6CCN(CC6)C

Solubilità (Solubility)

In vitro
Lotto:

Water : 90 mg/mL

DMSO : 10 mg/mL (22.09 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Ethanol : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa Concentrazione Volume Peso molecolare
Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo
Lotto:

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante l'esperimento)

mg/kg g μL

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non c'è una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH2O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nell'aggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere all'aggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno d'acqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo d'azione (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
DNA
In vitro

1.1 Preparazione della soluzione madre
Sciogliere 10 mg di Hoechst 33342 in 5 mL di DMSO
Nota: Conservare la soluzione madre a 4 °C o -20 °C al riparo dalla luce ed evitare ripetuti cicli di congelamento-scongelamento.
1.2 Preparazione della soluzione di lavoro di questo
composto Diluire la soluzione madre in terreno di coltura cellulare privo di siero o PBS per ottenere una concentrazione finale di 10 μg/mL di questa soluzione di lavoro chimica.
Nota: regolare la concentrazione della soluzione di lavoro di questo reagente in base alla situazione reale.
1. Colorazione delle cellule
2.1 Cellule in sospensione (piastra a 6 pozzetti)
a. Centrifugare a 1000 g a 4 °C per 3-5 minuti, quindi eliminare il surnatante. Lavare due volte con PBS, 5 minuti ogni volta. La densità cellulare è 1×106/mL.
b. Aggiungere 1 mL di soluzione di lavoro, quindi incubare a temperatura ambiente per 3-10 minuti.
c. Centrifugare a 400 g a 4 °C per 3-4 minuti, quindi eliminare il surnatante.
d. Lavare due volte con PBS, 5 minuti ogni volta.
e. Risospendere le cellule con terreno di coltura cellulare privo di siero o PBS. Osservazione al microscopio a fluorescenza o citometria a flusso.
2.2 Cellule aderenti
a. Coltivare le cellule aderenti su coprioggetti sterili.
b. Rimuovere il coprioggetto dal terreno e aspirare il terreno in eccesso.
c. Aggiungere 100 μL di soluzione di lavoro, agitare delicatamente per coprire completamente le cellule, quindi incubare a temperatura ambiente per 3-10 minuti.
d. Lavare due volte con terreno, 5 minuti ogni volta. Osservazione al microscopio a fluorescenza o citometria a flusso.

Riferimenti