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GSK126 EZH2 inhibitor

N. Cat.: S7061

GSK126 (GSK2816126A, GSK2816126) is a potent, highly selective EZH2 methyltransferase inhibitor with IC50 of 9.9 nM, >1000-fold selective for EZH2 over 20 other human methyltransferases.
GSK126 EZH2 inhibitor Chemical Structure

Struttura chimica

Peso molecolare: 526.67

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Controllo Qualità (Quality Control)

Lotto: Purezza: 99.91%
99.91

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Linee cellulari Tipo di saggio Concentrazione Tempo di incubazione Formulazione Descrizione dell'attività PMID
human U87MG cells Cytotoxic assay 72 h Cytotoxicity against human U87MG cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by WST-1 assay, GI50=28.5 μM. 24767850
human A549 cells Cytotoxic assay 72 h Cytotoxicity against human A549 cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by WST-1 assay, GI50=18.7 μM. 24767850
human T98G cells Cytotoxic assay 72 h Cytotoxicity against human T98G cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by WST-1 assay, GI50=12.6 μM. 24767850
human Daudi cells Cytotoxic assay 72 h Cytotoxicity against human Daudi cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by WST-1 assay, GI50=11.2 μM. 24767850
human PC3 cells Cytotoxic assay 72 h Cytotoxicity against human PC3 cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by WST-1 assay, GI50=9.4 μM. 24767850
human U2932 cells Cytotoxic assay 72 h Cytotoxicity against human U2932 cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by WST-1 assay, GI50=6.7 μM. 24767850
human HeLa cells Function assay 72 h Inhibition of EZH2 in human HeLa cells assessed as reduction in H3K27me3 levels incubated for 72 hrs by ELISA method, IC50=0.28 μM. 26189078
human Pfeiffer cells Cytotoxic assay 72 h Cytotoxicity against human Pfeiffer cells expressing EZH2 A667G mutant assessed as growth inhibition after 72 hrs by WST-1 assay, GI50=0.18 μM. 24767850
infected SF9 cells Binding affinity to EZH2 (unknown origin) expressed in baculovirus infected SF9 cells co-expressing SUZ12/EED/RbAp48 complex assessed as binding off-rate at 0.4 uM incubated for 20 mins by Q-TOF mass spectrometry 27512831
A673 cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells 29435139
DAOY cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for DAOY cells 29435139
Saos-2 cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells 29435139
BT-37 cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-37 cells 29435139
RD cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells 29435139
SK-N-SH cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-SH cells 29435139
BT-12 cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-12 cells 29435139
MG 63 (6-TG R) cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for MG 63 (6-TG R) cells 29435139
NB1643 cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB1643 cells 29435139
OHS-50 cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells 29435139
Rh41 cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh41 cells 29435139
SK-N-MC cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells 29435139
LAN-5 cells qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells 29435139
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Informazioni chimiche, conservazione e stabilità (Chemical Information, Storage & Stability)

Peso molecolare 526.67 Formula

C31H38N6O2

 Conservazione (Dalla data di ricezione)
N. CAS 1346574-57-9 Scarica SDF Conservazione delle soluzioni stock

Sinonimi GSK2816126A, GSK2816126 Smiles CCC(C)N1C=C(C2=C(C=C(C=C21)C3=CN=C(C=C3)N4CCNCC4)C(=O)NCC5=C(C=C(NC5=O)C)C)C

Solubilità (Solubility)

In vitro
Lotto:

DMSO : 5 mg/mL (9.49 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Ethanol : 4 mg/mL

Water : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa Concentrazione Volume Peso molecolare
Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo
Lotto:

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante l'esperimento)

mg/kg g μL

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non c'è una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH2O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nell'aggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere all'aggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno d'acqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo d'azione (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
EZH2
(Cell-free assay)
9.9 nM
In vitro
In vitro, GSK126 most potently inhibits H3K27me3, followed by H3K27me2 in both EZH2 wild-type and mutant DLBCL cell lines. This compound also effectively inhibits the proliferation of EZH2 mutant DLBCL cell lines, and induces transcriptional activation of EZH2 target genes in sensitive cell lines. In A687V EZH2-mutant cells, this treatment results in a global decrease in H3K27me3, robust gene activation, caspase activation, and decreased proliferation. In parental H2087 cells, it inhibits the expression of VEGF-A and phosphorylated Ser(473)-AKT, and thus causes the inhibition of cell proliferation, migration and metastasis.
Saggio chinasico
Saggio EZH2
Il complesso PRC2 a cinque membri (Flag–EZH2, EED, SUZ12, AEBP2, RbAp48) contenente EZH2 di tipo selvaggio o mutante viene preparato. GSK126 viene sciolto in DMSO e testato a concentrazioni da 0,6 nM a 300 nM con una concentrazione finale di DMSO del 2,5%. A differenza dell'EZH2 di tipo selvaggio che preferisce H3K27me0 come substrato in vitro, i mutanti Y641 di EZH2 preferiscono H3K27me2 e hanno poca attività con H3K27me0 o H3K27me1. Il mutante A677G è distinto sia dalle forme wild-type che mutanti Y641 di EZH2 in quanto metila efficacemente H3K27me0, H3K27me1 e H3K27me2; pertanto, i peptidi di istone H3 (residui 21-44; 10 μM finali) con K27me0 (wild type, A677G EZH2), K27me1 (A677G EZH2) o K27me2 (A677G, Y641N, Y641C, Y641H, Y641S e Y641F EZH2) sono usati come substrati di metiltransferasi. Questo composto viene aggiunto alle piastre seguito dall'aggiunta di 6 nM di complesso EZH2 e peptide. Poiché la potenza di questa sostanza chimica è al limite o vicino al limite di legame stretto di un saggio eseguito a [SAM] = Km, i valori di IC50 vengono misurati ad alta concentrazione del substrato competitivo SAM rispetto al suo Km (7,5 μM SAM dove il Km di SAM è 0,3 μM). In queste condizioni, il contributo della concentrazione enzimatica diventa relativamente piccolo e possono essere calcolate stime accurate di Ki. Le reazioni vengono avviate con [3H]-SAM, incubate per 30 minuti, bloccate con l'aggiunta di un eccesso 500 volte di SAM non marcato, e il peptide prodotto metilato viene catturato su filtri di fosfocellulosa secondo il protocollo fornito dal fornitore per le piastre MSPH Multiscreen. Le piastre vengono lette su un TopCount dopo l'aggiunta di 20 μL di cocktail Microscint-20. I valori apparenti di Ki vengono calcolati usando la relazione di Cheng–Prusoff per un inibitore competitivo. IC50=Ki (1+[S]/Km)+[E]/2, dove E è l'enzima e S è il substrato.
In vivo
In mice bearing KARPAS-422 and Pfeiffer xenografts, GSK126 (150 mg/kg/d, i.p.) decreases global H3K27me3, increases gene expression, and thus causes marked tumour regression.
Riferimenti

Applicazioni (Applications)

Metodi Biomarcatori Immagini PMID
Western blot H3K27Me3 / EZH2 XIAP / Survivin / MCL-1 / BID / BIM / BAX / BCL-xl/ Bcl-2 β-catenin / c-Myc / LEF1 / DVL2 / DVL3 / p-GSK3β
S7061-WB1
28418882
Immunofluorescence H3K27me3
S7061-IF1
25053977
Growth inhibition assay Cell viability Cell proliferation
S7061-viability
28418882

Informazioni sullo studio clinico (Clinical Trial Information)

(dati da https://clinicaltrials.gov, aggiornato il 2024-05-22)

Numero NCT Reclutamento Condizioni Sponsor/Collaboratori Data di inizio Fasi
NCT02082977 Terminated
Cancer|Neoplasms
GlaxoSmithKline
 April 24 2014 Phase 1

Domande Frequenti (Frequently Asked Questions)

Domanda 1:
Could you please suggest a vehicle for in vivo uses of this compound without oil?

Risposta:
It could be dissolved in 4% DMSO+30% PEG 300+ddH2O (0.5mg/ml).

Domanda 2:
Does this compound require an activation step to be functional? For example, an acidic or basic environment.

Risposta:
It does not require an activation step to be functional.