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GSK1349572 (Dolutegravir) Inibitore dell'Integrase dell'HIV

N. Cat.S2667

Dolutegravir è un inibitore della integrase dell'HIV a legame bimetallico con IC50 di 2,7 nM in un saggio senza cellule, attività modesta contro i mutanti firma resistenti al raltegravir Y143R, Q148K, N155H e G140S/Q148H.
GSK1349572 (Dolutegravir) Integrase Inibitore Chemical Structure

Struttura chimica

Peso molecolare: 419.38

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Controllo Qualità (Quality Control)

Lotto: Purezza: 99.76%
99.76

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Linee cellulari Tipo di saggio Concentrazione Tempo di incubazione Formulazione Descrizione dell'attività PMID
MDCK2 cells Function assay Inhibition of human OCT2 expressed in MDCK2 cells using [14C]metformin as substrate by liquid scintillation counting analysis 23132334
HOS Antiviral assay 3 hrs Antiviral activity against HIV-1 harboring wild type integrase infected in human HOS cells pretreated with compound for 3 hrs by single-round HIV-1 infectivity assay, EC50 = 0.0016 μM. 24901667
HEK293T Antiviral assay 2 days Antiviral activity against pseudo Human immunodeficiency virus infected in HEK293T cells after 2 days, IC50 = 0.0017 μM. 23845180
MT4 Antiviral assay 4 to 5 days Antiviral activity against Human immunodeficiency virus 1 3B infected in human MT4 cells after 4 to 5 days by bioluminescence assay, IC50 = 0.002 μM. 23845180
HOS Antiviral assay 3 hrs Antiviral activity against raltegravir-resistant HIV-1 harboring integrase N155H mutant infected in human HOS cells pretreated with compound for 3 hrs by single-round HIV-1 infectivity assay, EC50 = 0.0036 μM. 24901667
HOS Antiviral assay 3 hrs Antiviral activity against raltegravir-resistant HIV-1 harboring integrase Y143R mutant infected in human HOS cells pretreated with compound for 3 hrs by single-round HIV-1 infectivity assay, EC50 = 0.0043 μM. 24901667
HOS Antiviral assay 3 hrs Antiviral activity against raltegravir-resistant HIV-1 harboring integrase G140S/Q148H double mutant infected in human HOS cells pretreated with compound for 3 hrs by single-round HIV-1 infectivity assay, EC50 = 0.0058 μM. 24901667
HOS Antiviral assay 3 hrs Antiviral activity against INSTI-resistant HIV-1 harboring integrase R263K mutant infected in human HOS cells pretreated with compound for 3 hrs by single-round HIV-1 infectivity assay, EC50 = 0.011 μM. 24901667
HOS Antiviral assay 3 hrs Antiviral activity against INSTI-resistant HIV-1 harboring integrase G118R mutant infected in human HOS cells pretreated with compound for 3 hrs by single-round HIV-1 infectivity assay, EC50 = 0.013 μM. 24901667
P4R5 MAGI Antiviral assay 24 hrs Antiviral activity against HIV1 infected in CD4/CXCR4/CCR5 expressing human P4R5 MAGI cells preincubated with cells for 24 hrs followed by viral infection measured after 48 hrs by beta-galactosidase reporter gene assay, EC50 = 0.02 μM. 30031976
P4R5 Antiviral assay 24 hrs Antiviral activity against HIV1 infected in CD4/CXCR4/CCR5 expressing human P4R5 cells assessed as inhibition of viral replication preincubated with cells for 24 hrs followed by viral infection measured after 48 hrs by beta-galactosidase reporter gene ass, EC50 = 0.02 μM. 28525279
HEK293T Antiviral assay 2 days Antiviral activity against pseudo Human immunodeficiency virus infected in HEK293T cells after 2 days in presence of human serum albumin, IC50 = 0.022 μM. 23845180
MDCK2 Function assay Inhibition of human OCT2 expressed in MDCK2 cells using [14C]metformin as substrate by liquid scintillation counting analysis, IC50 = 1.9 μM. 23132334
Vero E6 Antiviral assay 2 days Antiviral efficacy against SARS-CoV-2 (strain BavPat1) in Vero E6 cells assessed by inhibition of viral RNA replication measured by RT-PCR after 2 days, EC50 = 22.04 μM. ChEMBL
Vero E6 Antiviral assay 2 days Antiviral efficacy against SARS-CoV-2 (strain BavPat1) in Vero E6 cells assessed by inhibition of viral RNA replication measured by RT-PCR after 2 days, EC90 = 42.81 μM. ChEMBL
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Informazioni chimiche, conservazione e stabilità (Chemical Information, Storage & Stability)

Peso molecolare 419.38 Formula

C20H19F2N3O5

 Conservazione (Dalla data di ricezione)
N. CAS 1051375-16-6 Scarica SDF Conservazione delle soluzioni stock

Sinonimi GSK1349572,S/GSK1349572 Smiles CC1CCOC2N1C(=O)C3=C(C(=O)C(=CN3C2)C(=O)NCC4=C(C=C(C=C4)F)F)O

Solubilità (Solubility)

In vitro
Lotto:

DMSO : 83 mg/mL (197.91 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa Concentrazione Volume Peso molecolare
Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo
Lotto:

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante l'esperimento)

mg/kg g μL

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non c'è una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH2O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nell'aggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere all'aggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno d'acqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo d'azione (Mechanism of Action)

Caratteristiche
A next-generation and two-metal-binding HIV integrase strand transfer inhibitor.
Targets/IC50/Ki
HIV integrase
(Cell-free assay)
2.7 nM
In vitro

Dolutegravir (GSK1349572) mostra un potente effetto inibitorio su nove isolati clinici di pazienti infetti da HIV-2 naïve agli inibitori dell'integrasi con EC50 compresa tra 0,2 nM e 1,4 nM.

In vitro, inibisce il trasferimento del filamento catalizzato dall'integrasi ricombinante dell'HIV-1 con un IC50 di 2,7 nM. Inoltre, questo composto inibisce potentemente la replicazione dell'HIV in cellule come le cellule mononucleari del sangue periferico (PBMC), le cellule MT-4 e le cellule CIP4 infettate con un vettore lentivirale PHIV auto-inattivante, con valori di EC50 rispettivamente di 0,51 nM, 0,71 nM e 2,2 nM.

In vitro, mostra anche una potente attività contro cinque diversi virus resistenti agli inibitori della trascrittasi inversa non nucleosidici o agli inibitori della trascrittasi inversa nucleosidici, con EC50 compresa tra 1,3 nM e 2,1 nM. Similmente alla sua attività contro il virus di tipo selvatico, mostra un'efficacia equivalente contro due virus resistenti agli inibitori della proteasi, con valori di EC50 rispettivamente di 0,36 nM e 0,37 nM.
Saggio chinasico
Saggio di trasferimento del filamento in vitro
Le potenze inibitorie di Dolutegravir (GSK1349572) e di altri INI sono misurate in un saggio di trasferimento del filamento utilizzando l'integrasi ricombinante dell'HIV. Un complesso di integrasi e microsfere di saggio di prossimità a scintillazione (SPA) rivestite di streptavidina-DNA donatore pre-processato biotinilato viene formato incubando 2 μM di integrasi ricombinante purificata con 0,66 μM di microsfere SPA rivestite di streptavidina-DNA donatore biotinilato da 4 mg/mL in 25 mM di acido morfolinopropanosolfonico di sodio (MOPS) (pH 7,2), 23 mM di NaCl e 10 mM di MgCl2 per 5 minuti a 37 °C. Queste microsfere vengono centrifugate e preincubate con INI diluiti per 60 minuti a 37 °C. Quindi viene aggiunto un substrato di DNA target marcato con 3H per ottenere una concentrazione finale di 7 nM di substrato, e la miscela di reazione di trasferimento del filamento viene incubata a 37 °C per 25-45 minuti, il che consente un aumento lineare del trasferimento del filamento del DNA donatore al DNA target radiomarcato. Il segnale viene letto utilizzando un lettore di piastre a scintillazione Wallac MicroBeta.
In vivo

Il Dolutegravir (GSK1349572), un farmaco antiretrovirale (ARV) di prima linea utilizzato nella terapia combinata per l'HIV-1, inibisce l'attività delle MMP e ha il potenziale di influenzare il neurosviluppo prenatale e postnatale.
Riferimenti

Applicazioni (Applications)

Metodi Biomarcatori Immagini PMID
Dose-response infectivity curves NL4.3IN(WT) / NL4.3IN(S230R) virus
S2667-other-1
29617824

Informazioni sullo studio clinico (Clinical Trial Information)

(dati da https://clinicaltrials.gov, aggiornato il 2024-05-22)

Numero NCT Reclutamento Condizioni Sponsor/Collaboratori Data di inizio Fasi
NCT06281834 Not yet recruiting
Pediatric HIV Infection|Latent Tuberculosis
Brigham and Women''s Hospital|APIN Public Health Initiatives|University of Cape Town
 May 2024 Phase 1
NCT05122026 Recruiting
HIV Seropositivity|Pregnancy|Tuberculosis Infection
The Aurum Institute NPC|Johns Hopkins University|Weill Medical College of Cornell University|University of Washington
 January 17 2024 Phase 1|Phase 2
NCT05069688 Recruiting
Pediatric HIV Infection|Tuberculosis Infection
Brigham and Women''s Hospital|APIN Public Health Initiatives|University of Cape Town
 July 7 2023 Phase 1
NCT05122767 Recruiting
Tuberculosis|HIV
The Aurum Institute NPC|Johns Hopkins University
 May 24 2023 Phase 1|Phase 2